摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-19页 |
1.1 石斑鱼的养殖背景及细菌性病原的研究进展 | 第12-14页 |
1.1.1 石斑鱼的养殖背景 | 第12-13页 |
1.1.2 石斑鱼细菌性疾病的研究进展 | 第13-14页 |
1.2 哈维氏弧菌的研究进展 | 第14-18页 |
1.2.1 哈维氏弧菌的其致病性 | 第14-15页 |
1.2.2 哈维氏弧菌的诊断技术的发展 | 第15-16页 |
1.2.3 哈维氏弧菌致病因子的研究进展 | 第16-18页 |
1.3 小结 | 第18-19页 |
第二章 珍珠龙胆石斑鱼幼鱼皮肤溃疡病病原ML01的分离鉴定与药敏特性分析 | 第19-34页 |
2.1 材料与方法 | 第19-25页 |
2.1.1 疾病的发现与调查 | 第19页 |
2.1.2 实验用鱼 | 第19页 |
2.1.3 病原筛查和细菌分离、培养 | 第19-20页 |
2.1.4 人工感染实验 | 第20-21页 |
2.1.5 病原菌的鉴定 | 第21-24页 |
2.1.6 病原菌的药物敏感实验 | 第24-25页 |
2.2 结果 | 第25-32页 |
2.2.1 疾病调查及发病症状 | 第25页 |
2.2.2 病原的筛查与细菌分离 | 第25页 |
2.2.3 人工感染及病原菌的再分离 | 第25-27页 |
2.2.3.1 浸泡感染 | 第25-26页 |
2.2.3.2 创伤后浸泡感染 | 第26页 |
2.2.3.3 腹腔注射感染 | 第26-27页 |
2.2.4 病原菌的鉴定 | 第27-31页 |
2.2.4.1 菌落特征 | 第27页 |
2.2.4.2 菌体形态 | 第27页 |
2.2.4.3 生理生化特征 | 第27-28页 |
2.2.4.4 致病菌的系统发育分析 | 第28-31页 |
2.2.5 病原菌的药物敏感实验 | 第31-32页 |
2.3 小结 | 第32-34页 |
第三章 哈维氏弧菌ML01株的毒力基因分析 | 第34-39页 |
3.1 材料与方法 | 第34-36页 |
3.1.1 菌株ML01的全基因组提取 | 第34页 |
3.1.2 引物设计 | 第34-35页 |
3.1.3 PCR实验 | 第35-36页 |
3.2 结果 | 第36-37页 |
3.3 小结 | 第37-39页 |
第四章 哈维氏弧菌ML01株胞外产物的致病性分析 | 第39-46页 |
4.1 实验材料及方法 | 第39-41页 |
4.1.1 实验鱼 | 第39页 |
4.1.2 胞外产物(ECP)的提取 | 第39-40页 |
4.1.3 ECP总蛋白含量的测定 | 第40-41页 |
4.1.3.1 标准蛋白(BSA)稀释液的制备 | 第40页 |
4.1.3.2 WR工作试剂的制备 | 第40页 |
4.1.3.3 测定方法 | 第40-41页 |
4.1.4 酶活性测定及溶血性测定 | 第41页 |
4.1.5 胞外产物毒性测定 | 第41页 |
4.2 结果 | 第41-44页 |
4.2.1 48h内ECP中总蛋白含量随时间的变化趋势测定 | 第41-43页 |
4.2.2 酶活性及溶血性测定结果 | 第43页 |
4.2.3 胞外产物的毒性测定 | 第43-44页 |
4.3 小结 | 第44-46页 |
第五章 哈维氏弧菌ML01株分泌性蛋白的分离及特性分析 | 第46-58页 |
5.1 材料与方法 | 第46-48页 |
5.1.1 细菌分泌性蛋白的分离及纯化 | 第46页 |
5.1.2 分泌性蛋白的SDS-PAGE及主要区带的质谱分析 | 第46-47页 |
5.1.2.1 蛋白变性 | 第46页 |
5.1.2.2 制胶 | 第46-47页 |
5.1.2.3 配制电泳缓冲液 | 第47页 |
5.1.2.4 跑胶 | 第47页 |
5.1.2.5 染色 | 第47页 |
5.1.2.6 脱色 | 第47页 |
5.1.3 主要蛋白区带的质谱分析法 | 第47页 |
5.1.4 分泌性蛋白编码基因序列的克隆、测序与比对 | 第47-48页 |
5.1.4.1 细菌基因组DNA的提取 | 第47页 |
5.1.4.2 引物的设计 | 第47-48页 |
5.1.4.3 PCR实验 | 第48页 |
5.2 结果 | 第48-58页 |
5.2.1 维氏弧菌分泌性蛋白的纯化及SDS-PAGE | 第48-50页 |
5.2.1.1 Sephadex G-100凝胶柱层析 | 第48-49页 |
5.2.1.2 分泌性蛋白的SDS-PAGE | 第49-50页 |
5.2.2 P42、P36、P31分泌性蛋白的质谱分析法 | 第50-55页 |
5.2.3 ML01株分泌性蛋白编码基因的克隆、测序与比对 | 第55-58页 |
5.3 小结 | 第58页 |
参考文献 | 第58-67页 |
致谢 | 第67页 |