| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 绪论 | 第14-20页 |
| 1.1 前言 | 第14-18页 |
| 1.2 技术路线 | 第18-20页 |
| 第2章 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1 细胞株 | 第20页 |
| 2.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2.3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.4 数据处理和分析 | 第21-22页 |
| 第3章 实验方法 | 第22-40页 |
| 3.1 细胞培养 | 第22-23页 |
| 3.1.1 细胞复苏 | 第22页 |
| 3.1.2 细胞传代 | 第22-23页 |
| 3.1.3 细胞冻存 | 第23页 |
| 3.2 实验分组 | 第23-24页 |
| 3.3 CYGB在各种细胞中的表达 | 第24-26页 |
| 3.3.1 试剂配制 | 第24-25页 |
| 3.3.2 蛋白提取 | 第25页 |
| 3.3.3 蛋白定量 | 第25页 |
| 3.3.4 SDS-PAGE电泳 | 第25-26页 |
| 3.4 H_2O_2处理巨噬细对CYGB表达的影响 | 第26-27页 |
| 3.4.1 H_2O_2处理RAW264.7 不同时间对CYGB表达的影响 | 第26-27页 |
| 3.4.2 不同浓度H_2O_2处理RAW264.7 对CYGB表达的影响 | 第27页 |
| 3.5 CYGB过表达和低表达巨噬细胞模型的构建和鉴定 | 第27-31页 |
| 3.5.1 溶液的配制 | 第27-28页 |
| 3.5.2 培养受体菌 | 第28页 |
| 3.5.3 制备感受态细胞 | 第28页 |
| 3.5.4 质粒的转化 | 第28页 |
| 3.5.5 质粒的提取 | 第28-30页 |
| 3.5.6 细胞转染 | 第30-31页 |
| 3.6 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力的测定 | 第31-32页 |
| 3.6.1 试剂组成及配制 | 第31页 |
| 3.6.2 样本的前处理 | 第31页 |
| 3.6.3 细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力测定操作表 | 第31-32页 |
| 3.7 超氧化物歧化酶(SOD)活性检测 | 第32-33页 |
| 3.7.1 试剂组成与配制 | 第32-33页 |
| 3.7.2 样本的前处理 | 第33页 |
| 3.7.3 细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性检测操作表 | 第33页 |
| 3.8 乳酸脱氢酶(LDH)活性检测 | 第33-34页 |
| 3.8.1 试剂组成及配制 | 第33-34页 |
| 3.8.2 样本的前处理 | 第34页 |
| 3.8.3 培养基中乳酸脱氢酶(LDH)检测操作表 | 第34页 |
| 3.9 丙二醛(MDA)活性检测 | 第34-35页 |
| 3.9.1 试剂的组成与配制 | 第34-35页 |
| 3.9.2 样品前处理 | 第35页 |
| 3.9.3 细胞中丙二醛(MDA)活性检测操作表 | 第35页 |
| 3.10 活性氧(ROS)活性检测 | 第35-36页 |
| 3.10.1 试剂组成及保存 | 第35-36页 |
| 3.10.2 操作步骤 | 第36页 |
| 3.11 荧光定量PCR检测CYGB、NF-κB在细胞中的表达 | 第36-40页 |
| 3.11.1 溶液配制 | 第36页 |
| 3.11.2 RNA提取 | 第36-37页 |
| 3.11.3 RNA反转录 | 第37-38页 |
| 3.11.4 荧光定量-PCR | 第38-40页 |
| 第4章 实验结果 | 第40-52页 |
| 4.1 细胞形态学观察结果 | 第40-41页 |
| 4.2 CYGB在各种细胞中的表达 | 第41页 |
| 4.3 H_2O_2处理RAW264.7 对CYGB表达的影响 | 第41-43页 |
| 4.3.1 H_2O_2处理RAW264.7 不同时间对CYGB表达的影响 | 第41-42页 |
| 4.3.2 不同浓度H_2O_2处理RAW264.7 对CYGB表达的影响 | 第42-43页 |
| 4.4 CYGB过表达和低表达巨噬细胞模型的构建和鉴定 | 第43-45页 |
| 4.5 CYGB对H_2O_2处理的巨噬细胞的保护作用 | 第45-51页 |
| 4.5.1 H_2O_2处理对RAW264.7 细胞CYGB表达的影响 | 第45-46页 |
| 4.5.2 CYGB对RAW264.7 细胞GSH-PX活性影响 | 第46-47页 |
| 4.5.3 CYGB对RAW264.7 细胞SOD活性影响 | 第47-48页 |
| 4.5.4 CYGB对RAW264.7 细胞LDH活性影响 | 第48-49页 |
| 4.5.5 CYGB对RAW264.7 细胞MDA活性影响 | 第49-50页 |
| 4.5.6 CYGB对RAW264.7 细胞ROS活性影响 | 第50-51页 |
| 4.6 荧光定量PCR检测NF-κB在细胞中的表达 | 第51-52页 |
| 第5章 讨论 | 第52-56页 |
| 第6章 结论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 文献综述 | 第62-72页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 作者攻读学位期间的科研成果 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 本研究基金资助项目 | 第75页 |
