摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4页 |
第一章 绪论 | 第7-18页 |
1.1 结核病简介 | 第7-10页 |
1.1.1 结核病的产生 | 第7页 |
1.1.2 结核病的基本现状 | 第7-8页 |
1.1.3 耐药结核病的分类 | 第8页 |
1.1.4 结核病的主治药物 | 第8-9页 |
1.1.5 结核杆菌的耐药机理 | 第9-10页 |
1.2 检测结核病耐药性的常用方法 | 第10-14页 |
1.2.1 药物敏感性试验法 | 第10-11页 |
1.2.2 直接测序法 | 第11页 |
1.2.3 聚合酶链式反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP) | 第11-12页 |
1.2.4 PCR-线性探针杂交技术 | 第12-13页 |
1.2.5 固相芯片法 | 第13-14页 |
1.3 Luminex液相芯片技术 | 第14-16页 |
1.3.1 Luminex液相芯片技术原理 | 第14-15页 |
1.3.2 Luminex xTAG技术 | 第15-16页 |
1.3.3 液相芯片技术的优势及其应用 | 第16页 |
1.4 本研究实验设计 | 第16-18页 |
1.4.1 研究目的和意义 | 第16-17页 |
1.4.2 实验设计 | 第17-18页 |
第二章 液相芯片技术检测耐多药结核分枝杆菌方法建立 | 第18-36页 |
2.1 实验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 材料 | 第18页 |
2.1.2 主要仪器 | 第18页 |
2.1.3 主要试剂 | 第18页 |
2.1.4 实验溶液的配制 | 第18-19页 |
2.2 方法 | 第19-27页 |
2.2.1 检测序列信息 | 第19-20页 |
2.2.2 感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
2.2.3 含有检测模板的质粒转化 | 第21页 |
2.2.4 质粒的提取 | 第21-22页 |
2.2.5 PCR扩增反应 | 第22-23页 |
2.2.6 PCR产物纯化 | 第23页 |
2.2.7 ASPE反应 | 第23-24页 |
2.2.8 荧光微球杂交 | 第24-25页 |
2.2.9 Luminex 200仪器校正 | 第25-26页 |
2.2.10 样品检测 | 第26-27页 |
2.2.11 反应条件优化 | 第27页 |
2.3 实验结果 | 第27-33页 |
2.3.0 质粒含量检测结果 | 第27-28页 |
2.3.1 PCR扩增及反应体系优化结果 | 第28-29页 |
2.3.2 PCR扩增产物纯化结果 | 第29页 |
2.3.3 Tsp DNA聚合酶浓度优化结果 | 第29-30页 |
2.3.4 荧光微球浓度优化结果 | 第30-31页 |
2.3.5 链霉亲和素藻红蛋白浓度优化结果 | 第31-32页 |
2.3.6 链霉亲和素藻红蛋白杂交时间优化结果 | 第32-33页 |
2.3.7 8种重组质粒的检测结果 | 第33页 |
2.4 讨论 | 第33-35页 |
2.5 小结 | 第35-36页 |
第三章 液相芯片技术检测耐多药结核分枝杆菌可靠性研究 | 第36-44页 |
3.1 实验材料 | 第36-37页 |
3.1.1 材料 | 第36页 |
3.1.2 主要仪器 | 第36页 |
3.1.3 主要试剂 | 第36页 |
3.1.4 实验溶液的配制 | 第36-37页 |
3.2 方法 | 第37-38页 |
3.2.1 灵敏度实验 | 第37页 |
3.2.2 重复性实验 | 第37-38页 |
3.3 结果 | 第38-42页 |
3.3.1 灵敏度检测 | 第38-39页 |
3.3.2 重复性检测 | 第39-42页 |
3.4 讨论 | 第42-43页 |
3.5 小结 | 第43-44页 |
结论 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-48页 |