| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| 1.1 脂肪酸 | 第11-13页 |
| 1.1.1 脂肪酸的分类 | 第11-12页 |
| 1.1.2 脂肪酸的生理功能 | 第12-13页 |
| 1.2 脂肪酸代谢相关基因结构及功能 | 第13-16页 |
| 1.2.1 肉碱棕榈酰转移酶Ⅱ（CPT2） | 第13-14页 |
| 1.2.2 二酰甘油酰基转移酶Ⅱ（DGAT2） | 第14页 |
| 1.2.3 脂肪酸链延长酶Ⅲ（ELOVL3） | 第14-16页 |
| 1.3 Myo G和MYH2基因的结构与功能 | 第16-17页 |
| 1.3.1 Myo G基因的结构与功能 | 第16-17页 |
| 1.3.2 MYH2基因的结构与功能 | 第17页 |
| 1.4 脂肪酸对骨骼肌卫星细胞分化影响研究进展 | 第17-18页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-31页 |
| 2.1 主要实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 菌株、质粒与细胞 | 第19页 |
| 2.1.2 工具酶、试剂盒和其他试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.4 分析软件 | 第20页 |
| 2.1.5 主要试剂的配制 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-31页 |
| 2.2.1 DH5α 大肠杆菌感受态的制备 | 第21-22页 |
| 2.2.2 质粒的小量提取 | 第22页 |
| 2.2.3 载体去磷酸化 | 第22-23页 |
| 2.2.4 去内毒素质粒的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.5 ELOVL3干扰表达载体的构建 | 第24页 |
| 2.2.6 牛骨骼肌卫星细胞的原代培养 | 第24-25页 |
| 2.2.7 细胞的冻存与复苏 | 第25页 |
| 2.2.8 细胞总RNA的提取 | 第25页 |
| 2.2.9 c DNA的获得 | 第25-26页 |
| 2.2.10 Real-time PCR检测相关基因的表达变化 | 第26-27页 |
| 2.2.11 Western blot检测相关基因的表达变化 | 第27-29页 |
| 2.2.12 免疫荧光染肌球蛋白重链 | 第29-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-45页 |
| 3.1 牛骨骼肌卫星细胞m RNA高通量测序结果分析及验证 | 第31-33页 |
| 3.1.1 测序结果分析 | 第31页 |
| 3.1.2 测序结果验证 | 第31-33页 |
| 3.2 脂肪酸对牛骨骼肌卫星细胞分化的影响 | 第33-36页 |
| 3.2.1 免疫荧光检测肌管融合率 | 第33-34页 |
| 3.2.2 实时定量PCR检测Myo G和MYH2表达量变化 | 第34-35页 |
| 3.2.3 Western blot检测Myo G和MYH2蛋白量变化 | 第35-36页 |
| 3.3 肪酸处理后实时定量PCR检测CPT2、DGAT2和ELOVL3的表达变化 | 第36-37页 |
| 3.4 ELOVL3基因干扰表达载体的构建 | 第37-41页 |
| 3.4.1 p SPg RNA空载体单酶切鉴定结果 | 第38页 |
| 3.4.2 p SPg RNA干扰载体测序结果 | 第38-40页 |
| 3.4.3 ELOVL3基因干扰表达载体的筛选 | 第40-41页 |
| 3.5 ELOVL3干扰表达载体转染牛骨骼肌卫星细胞 | 第41-45页 |
| 3.5.1 干扰ELOVL3后免疫荧光检测肌管融合率 | 第41-42页 |
| 3.5.2 实时定量PCR检测分化相关基因的表达 | 第42-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 4.1 脂肪酸促分化的机制 | 第45-46页 |
| 4.2 ELOVL3对肌分化的作用机制 | 第46页 |
| 4.3 脂肪酸在肌分化过程的代谢途径 | 第46页 |
| 4.4 研究的发展前景 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
