摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-25页 |
1.1 抗虫玉米研究的重要性 | 第13页 |
1.2 抗虫玉米的研究进展 | 第13-17页 |
1.2.1 外源转基因抗虫玉米的研究进展 | 第13-15页 |
1.2.2 玉米内源抗虫性的研究进展 | 第15-17页 |
1.3 SSR分子标记在玉米中的研究进展与应用 | 第17-19页 |
1.3.1 SSR标记在玉米中的研究进展 | 第17-18页 |
1.3.2 SSR标记在玉米研究中的应用 | 第18-19页 |
1.4 植物中JA介导的响应伤害的研究进展 | 第19-23页 |
1.4.1 拟南芥中JA介导的响应伤害的研究进展 | 第20-21页 |
1.4.2 番茄中JA介导的系统防御信号基因及相关突变体 | 第21-22页 |
1.4.3 JA介导的水稻对病原菌和害虫的抗性及突变体 | 第22-23页 |
1.4.4 玉米中JA介导的突变体的研究进展 | 第23页 |
1.5 立题依据 | 第23-24页 |
1.6 本研究的目的意义 | 第24-25页 |
第二章 玉米突变体库抗虫相关突变体的筛选及基因的初步定位 | 第25-41页 |
2.1 实验材料 | 第25-27页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 供试虫源 | 第25页 |
2.1.3 酶与生化试剂 | 第25页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第25页 |
2.1.5 实验所用的SSR引物及其来源 | 第25-27页 |
2.2 实验所需溶液的配制 | 第27-28页 |
2.2.1 基因组DNA的提取 | 第27页 |
2.2.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
2.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第27-28页 |
2.3 研究方法 | 第28-32页 |
2.3.1 突变体材料的播种和编号 | 第28页 |
2.3.2 室内生测筛选 | 第28页 |
2.3.3 田间接虫验证 | 第28-29页 |
2.3.4 玉米突变体抗虫性遗传鉴定 | 第29页 |
2.3.5 抗虫突变体的繁育和遗传作图群体的构建及取样 | 第29页 |
2.3.6 植物基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
2.3.7 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第30页 |
2.3.8 基因组DNA的PCR扩增 | 第30-31页 |
2.3.9 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第31页 |
2.3.10 银染显色 | 第31-32页 |
2.3.11 玉米突变体M264抗虫相关基因遗传连锁性分析 | 第32页 |
2.3.12 目标基因的SSR标记定位 | 第32页 |
2.4 结果与分析 | 第32-39页 |
2.4.1 室内24孔板虫测结果 | 第32-33页 |
2.4.2 田间接虫结果 | 第33-34页 |
2.4.3 突变体的抗虫性遗传分析和表型鉴定 | 第34-36页 |
2.4.4 突变体M264的遗传作图群体F2的分离比 | 第36-37页 |
2.4.5 M264基因组DNA的检测 | 第37页 |
2.4.6 SSR引物在亲本材料和抗感池间筛选多态性 | 第37-38页 |
2.4.7 筛选出的引物在F2群体中的扩增分析 | 第38页 |
2.4.8 突变体M264目标基因的SSR定位图谱 | 第38-39页 |
2.5 本章小结 | 第39-41页 |
2.5.1 筛选获得了抗虫矮化突变体M264 | 第39页 |
2.5.2 对M264的抗虫性进行了遗传分析和表型鉴定 | 第39页 |
2.5.3 确定了M264抗虫表型的分离比和显隐性性状 | 第39-40页 |
2.5.4 运用SSR标记技术对目的基因进行了初步定位 | 第40-41页 |
第三章 玉米突变体库MeJA不敏感突变体的筛选及鉴定 | 第41-55页 |
3.1 实验材料 | 第41-42页 |
3.1.1 植物材料 | 第41页 |
3.1.2 培养基 | 第41页 |
3.1.3 酶与生化试剂 | 第41页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第41页 |
3.1.5 实验所用的引物 | 第41-42页 |
3.2 研究方法 | 第42-46页 |
3.2.1 浸种处理 | 第42页 |
3.2.2 转盒发芽 | 第42页 |
3.2.3 耐受性筛选培养基的配制 | 第42页 |
3.2.4 转管培养 | 第42-43页 |
3.2.5 筛选和评价指标 | 第43页 |
3.2.6 MeJA不敏感突变体的遗传性分析 | 第43-44页 |
3.2.7 突变体植株在分子检测前的预处理 | 第44页 |
3.2.8 植物组织总RNA的提取 | 第44页 |
3.2.9 总RNA的纯化、电泳检测和浓度测定 | 第44-45页 |
3.2.10第一链cDNA的合成 | 第45-46页 |
3.2.11实时荧光定量PCR | 第46页 |
3.3 结果与分析 | 第46-54页 |
3.3.1 MeJA不敏感突变体的初步筛选 | 第46-47页 |
3.3.2 MeJA不敏感突变体的验证 | 第47-48页 |
3.3.3 MeJA不敏感突变体的遗传性分析 | 第48-51页 |
3.3.4 JA途径中的几个关键酶基因表达的数据分析 | 第51-54页 |
3.4 本章小结 | 第54-55页 |
3.4.1 获得了61个MeJA不敏感突变体 | 第54页 |
3.4.2 MeJA不敏感突变体具有可遗传性 | 第54页 |
3.4.3 改进了玉米MeJA不敏感突变体筛选的方法 | 第54页 |
3.4.4 突变体对MeJA的不敏感性与JA途径有关 | 第54-55页 |
第四章 讨论 | 第55-57页 |
4.1 玉米抗虫突变体的筛选 | 第55页 |
4.2 M264突变体F2代遗传作图群体的构建 | 第55页 |
4.3 目标基因的SSR标记定位 | 第55页 |
4.4 玉米MeJA不敏感突变体的筛选 | 第55-56页 |
4.5 JA途径中的几个关键酶基因在玉米突变体中的表达 | 第56-57页 |
第五章 结论 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简历 | 第67页 |