| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 NO_3~-信号概述 | 第10-13页 |
| 1.1.1 硝酸盐转运体种类及功能 | 第10-11页 |
| 1.1.2 NO_3~-信号与水分传输 | 第11-12页 |
| 1.1.3 NO_3~-信号与ABA信号转导机制 | 第12-13页 |
| 1.2 ABA信号概述 | 第13-16页 |
| 1.2.1 ABA受体种类 | 第13-14页 |
| 1.2.2 ABA信号的感知和转导 | 第14-15页 |
| 1.2.3 ABA信号与水分传输 | 第15-16页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第16-18页 |
| 第二章 BiFC鉴定NO_3~-信号与ABA信号的互作 | 第18-33页 |
| 2.1 试验材料、试剂及仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.2 试验试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 试验仪器 | 第19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-28页 |
| 2.2.1 运用生物信息学知识预测互作蛋白 | 第19-20页 |
| 2.2.2 PCR引物设计 | 第20页 |
| 2.2.3 cDNA全长的获得 | 第20-22页 |
| 2.2.4 目的基因的扩增与回收 | 第22-23页 |
| 2.2.5 感受态的制备及转化 | 第23-24页 |
| 2.2.6 质粒的提取与鉴定 | 第24-26页 |
| 2.2.7 BiFC重组表达载体构建 | 第26-27页 |
| 2.2.8 重组质粒转化农杆菌EHA105 | 第27页 |
| 2.2.9 瞬时表达 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-33页 |
| 2.3.1 目的蛋白互作预测结果 | 第28-29页 |
| 2.3.2 目的基因功能描述 | 第29页 |
| 2.3.3 目的基因PCR扩增结果 | 第29-30页 |
| 2.3.4 目的基因BiFC重组表达载体构建 | 第30-31页 |
| 2.3.5 互作蛋白在烟草叶片表皮细胞中的表达与观察 | 第31-33页 |
| 第三章 酵母双杂交对NO_3~-信号与ABA信号的互作验证 | 第33-42页 |
| 3.1 试验材料 | 第33-34页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第33-34页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第34页 |
| 3.2 试验方法 | 第34-37页 |
| 3.2.1 表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 3.2.2 阳性克隆的筛选与酶切鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2.3 酵母感受态细胞制备（LiAc法） | 第36页 |
| 3.2.4 重组质粒共转化酵母感受态 | 第36-37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-42页 |
| 3.3.1 酵母菌株的活化 | 第37-38页 |
| 3.3.2 重组质粒的构建与鉴定 | 第38-39页 |
| 3.3.3 酵母重组质粒的转化结果 | 第39-40页 |
| 3.3.4 酵母双杂交验证互作结果 | 第40-42页 |
| 第四章 讨论 | 第42-44页 |
| 第五章 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
