| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 MICRORNAS简介 | 第9-10页 |
| 1.1.1 microRNAs的发现与命名 | 第9页 |
| 1.1.2 microRNAs的产生与作用机理 | 第9-10页 |
| 1.2 血红素加氧酶 1（HO-1）的研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2.1 血红素加氧酶 1（HO-1）生物学特点 | 第10-11页 |
| 1.2.2 HO-1 与病原感染的发生发展关系 | 第11页 |
| 1.3 猪繁殖与呼吸综合征及其病原的研究进展 | 第11-15页 |
| 1.3.1 PRRSV病原学特征 | 第12-13页 |
| 1.3.2 PRRSV生物学特性 | 第13页 |
| 1.3.3 PRRSV分子生物学特征 | 第13-14页 |
| 1.3.4 PRRSV主要蛋白的特性 | 第14-15页 |
| 1.3.5 抗体依赖性增强作用 | 第15页 |
| 1.4 本研究的目的与意义 | 第15-17页 |
| 第二章 靶向HO-1 的MIRNAS的筛选及初步鉴定 | 第17-37页 |
| 2.1 材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 细胞及质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂的购买 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂和缓冲液的配置及保存 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-30页 |
| 2.2.1 HO-1靶miRNAs的筛选 | 第19-27页 |
| 2.2.2 HO-1 靶miRNAs靶基因结合位点的确定 | 第27-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-36页 |
| 2.3.1 HO-13'-UTR报告载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.3.2 靶向HO-1 的miRNAs预测 | 第32页 |
| 2.3.3 双荧光素酶初步筛选HO-1 靶miRNAs | 第32-33页 |
| 2.3.4 HO-1靶miRNAs靶基因结合位点的确定 | 第33-36页 |
| 2.4 小结 | 第36-37页 |
| 第三章 MIR243P与HO-1直接相互作用的鉴定 | 第37-49页 |
| 3.1 材料 | 第37-38页 |
| 3.1.1 细胞及质粒 | 第37页 |
| 3.1.2 主要试剂和材料的购买 | 第37页 |
| 3.1.3 主要试剂和缓冲液的配置及保存 | 第37-38页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第38页 |
| 3.2 方法 | 第38-46页 |
| 3.2.1 miR243p调控靶基因HO-1 的表达 | 第38-41页 |
| 3.2.2 miR243p通过结合HO-1 的 3'-UTR调控HO-1 的翻译 | 第41-42页 |
| 3.2.3 RNA结合蛋白免疫共沉淀验证 | 第42-46页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第46-48页 |
| 3.3.1 miR243p抑制正常Marc145细胞中HO-1 表达 | 第46页 |
| 3.3.2 miR243p抑制CoPP处理的Marc145细胞中HO-1 表达 | 第46-47页 |
| 3.3.3 双荧光素酶活性验证miR243p与HO-13'-UTR结合 | 第47页 |
| 3.3.4 RNA结合蛋白免疫沉淀验证miR243p与HO-13'-UTR结合 | 第47-48页 |
| 3.4 小结 | 第48-49页 |
| 第四章 MIR243P通过抑制HO-1 的表达从而促进PRRSV感染 | 第49-59页 |
| 4.1 材料 | 第49页 |
| 4.2 方法 | 第49-55页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第49-52页 |
| 4.2.2 PRRSV感染Marc145细胞后miR243p表达量上升 | 第52页 |
| 4.2.3 miR243p通过抑制Marc145细胞中HO-1 的表达从而促进PRRSV感染 . 444.2.4 miR243p通过抑制PAM细胞中HO-1 的表达从而促进PRRSV感染 | 第52-55页 |
| 4.3 结果与分析 | 第55-58页 |
| 4.3.1 PRRSV感染细胞后miR243p表达量上升 | 第55页 |
| 4.3.2 miR243p通过抑制Marc145细胞中HO-1 的表达从而促进PRRSV感染 . 474.3.3 流式细胞术检测 | 第55-56页 |
| 4.3.3 流式细胞术检测 | 第56-57页 |
| 4.3.4 miR243p通过抑制PAM细胞中HO-1 的表达从而促进PRRSV感染 | 第57-58页 |
| 4.4 小结 | 第58-59页 |
| 讨论 | 第59-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 缩略词 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
