致谢 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩写清单 | 第11-16页 |
引言 | 第16-18页 |
1 糖脂嫁接物的合成及其理化性质研究 | 第18-30页 |
1.1 试剂与仪器 | 第18-19页 |
1.1.1 试剂 | 第18页 |
1.1.2 仪器 | 第18-19页 |
1.2 实验方法 | 第19-21页 |
1.2.1 壳聚糖-硬脂酸糖脂嫁接物的合成 | 第19页 |
1.2.2 聚乙二醇化糖脂嫁接物的合成 | 第19页 |
1.2.3 核磁共振分析 | 第19-20页 |
1.2.4 氨基取代度测定 | 第20页 |
1.2.5 临界胶束浓度测定 | 第20-21页 |
1.2.6 粒径和表面电位测定 | 第21页 |
1.2.7 透射电子显微镜观察 | 第21页 |
1.3 结果与讨论 | 第21-27页 |
1.3.1 糖脂嫁接物的合成及结构确证 | 第21-24页 |
1.3.2 氨基取代度 | 第24-25页 |
1.3.3 临界胶束浓度 | 第25-26页 |
1.3.4 粒径与表面电位 | 第26-27页 |
1.3.5 透射电子显微镜观察 | 第27页 |
1.4 小结 | 第27-30页 |
2 糖脂嫁接物/聚乙二醇化多聚谷氨酸/pDNA三元基因递送系统的基因转染研究 | 第30-50页 |
2.1 试剂与仪器 | 第30-31页 |
2.1.1 试剂 | 第30-31页 |
2.1.2 仪器 | 第31页 |
2.2 实验方法 | 第31-36页 |
2.2.1 基因递送系统的制备 | 第31-33页 |
2.2.2 粒径和表面电位测定 | 第33页 |
2.2.3 透射电子显微镜观察 | 第33页 |
2.2.4 凝胶阻滞分析 | 第33页 |
2.2.5 酶保护实验 | 第33-34页 |
2.2.6 细胞培养 | 第34页 |
2.2.7 基因转染 | 第34-35页 |
2.2.7.1 HEK293细胞系转染的荧光观察 | 第34页 |
2.2.7.2 HEK293细胞系转染的定量研究 | 第34页 |
2.2.7.3 EC-1细胞系转染的荧光观察 | 第34-35页 |
2.2.7.4 EC-1细胞系转染的定量研究 | 第35页 |
2.2.8 细胞毒性 | 第35-36页 |
2.2.8.1 基因载体与基因递送系统的细胞毒性 | 第35页 |
2.2.8.2 基因递送系统的转染毒性 | 第35-36页 |
2.3 结果与讨论 | 第36-49页 |
2.3.1 粒径和表面电位 | 第36-37页 |
2.3.2 凝胶阻滞分析 | 第37-38页 |
2.3.3 酶保护实验 | 第38-39页 |
2.3.4 透射电子显微镜观察 | 第39-40页 |
2.3.5 基因转染 | 第40-47页 |
2.3.5.1 HEK293细胞系转染的荧光观察及定量 | 第42-43页 |
2.3.5.2 EC-1细胞系转染的荧光观察及定量研究 | 第43-47页 |
2.3.6 胞毒性 | 第47-49页 |
2.2.6.1 基因载体与基因递送系统的细胞毒性 | 第47-49页 |
2.3.6.2 基因递送系统的转染毒性 | 第49页 |
2.4 小结 | 第49-50页 |
3 糖脂嫁接物/聚乙二醇化多聚谷氨酸/pDNA三元基因递送系统的基因转染机制研究 | 第50-68页 |
3.1 试剂与仪器 | 第50-51页 |
3.1.1 试剂 | 第50-51页 |
3.1.2 仪器 | 第51页 |
3.2 实验方法 | 第51-54页 |
3.2.1 细胞培养 | 第51页 |
3.2.2 基因递送系统细胞摄取 | 第51-53页 |
3.2.2.1 基因载体荧光标记 | 第51-52页 |
3.2.2.2 基因递送系统摄取的荧光观察 | 第52页 |
3.2.2.3 基因递送系统定量摄取 | 第52页 |
3.2.2.4 抑制性摄取实验 | 第52-53页 |
3.2.3 基因递送系统的内-溶酶体逃逸机制 | 第53页 |
3.2.4 基因递送系统的pDNA释放动力学 | 第53-54页 |
3.2.4.1 凝胶阻滞实验 | 第53页 |
3.2.4.2 pDNA体外释放 | 第53-54页 |
3.3 结果与讨论 | 第54-66页 |
3.3.1 基因递送系统细胞摄取 | 第54-57页 |
3.3.1.1 基因递送系统摄取的荧光观察 | 第54-56页 |
3.3.1.2 定量摄取研究 | 第56-57页 |
3.3.2 内吞抑制剂对基因递送系统摄取的影响 | 第57-58页 |
3.3.3 基因递送系统的巨噬细胞RAW264.7摄取 | 第58-61页 |
3.3.4 基因递送系统的内-溶酶体逃逸机制 | 第61-62页 |
3.3.5 pDNA释放机制 | 第62-66页 |
3.3.5.1 凝胶阻滞分析 | 第62-64页 |
3.3.5.2 共聚焦显微镜观察 | 第64-66页 |
3.4 结论 | 第66-68页 |
4 结论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
综述 | 第76-96页 |
参考文献 | 第90-96页 |
作者简历 | 第96页 |