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γ-多聚谷氨酸对糖脂嫁接物胶束介导基因转染的影响

致谢第4-5页
中文摘要第5-8页
Abstract第8-10页
缩写清单第11-16页
引言第16-18页
1 糖脂嫁接物的合成及其理化性质研究第18-30页
    1.1 试剂与仪器第18-19页
        1.1.1 试剂第18页
        1.1.2 仪器第18-19页
    1.2 实验方法第19-21页
        1.2.1 壳聚糖-硬脂酸糖脂嫁接物的合成第19页
        1.2.2 聚乙二醇化糖脂嫁接物的合成第19页
        1.2.3 核磁共振分析第19-20页
        1.2.4 氨基取代度测定第20页
        1.2.5 临界胶束浓度测定第20-21页
        1.2.6 粒径和表面电位测定第21页
        1.2.7 透射电子显微镜观察第21页
    1.3 结果与讨论第21-27页
        1.3.1 糖脂嫁接物的合成及结构确证第21-24页
        1.3.2 氨基取代度第24-25页
        1.3.3 临界胶束浓度第25-26页
        1.3.4 粒径与表面电位第26-27页
        1.3.5 透射电子显微镜观察第27页
    1.4 小结第27-30页
2 糖脂嫁接物/聚乙二醇化多聚谷氨酸/pDNA三元基因递送系统的基因转染研究第30-50页
    2.1 试剂与仪器第30-31页
        2.1.1 试剂第30-31页
        2.1.2 仪器第31页
    2.2 实验方法第31-36页
        2.2.1 基因递送系统的制备第31-33页
        2.2.2 粒径和表面电位测定第33页
        2.2.3 透射电子显微镜观察第33页
        2.2.4 凝胶阻滞分析第33页
        2.2.5 酶保护实验第33-34页
        2.2.6 细胞培养第34页
        2.2.7 基因转染第34-35页
            2.2.7.1 HEK293细胞系转染的荧光观察第34页
            2.2.7.2 HEK293细胞系转染的定量研究第34页
            2.2.7.3 EC-1细胞系转染的荧光观察第34-35页
            2.2.7.4 EC-1细胞系转染的定量研究第35页
        2.2.8 细胞毒性第35-36页
            2.2.8.1 基因载体与基因递送系统的细胞毒性第35页
            2.2.8.2 基因递送系统的转染毒性第35-36页
    2.3 结果与讨论第36-49页
        2.3.1 粒径和表面电位第36-37页
        2.3.2 凝胶阻滞分析第37-38页
        2.3.3 酶保护实验第38-39页
        2.3.4 透射电子显微镜观察第39-40页
        2.3.5 基因转染第40-47页
            2.3.5.1 HEK293细胞系转染的荧光观察及定量第42-43页
            2.3.5.2 EC-1细胞系转染的荧光观察及定量研究第43-47页
        2.3.6 胞毒性第47-49页
            2.2.6.1 基因载体与基因递送系统的细胞毒性第47-49页
            2.3.6.2 基因递送系统的转染毒性第49页
    2.4 小结第49-50页
3 糖脂嫁接物/聚乙二醇化多聚谷氨酸/pDNA三元基因递送系统的基因转染机制研究第50-68页
    3.1 试剂与仪器第50-51页
        3.1.1 试剂第50-51页
        3.1.2 仪器第51页
    3.2 实验方法第51-54页
        3.2.1 细胞培养第51页
        3.2.2 基因递送系统细胞摄取第51-53页
            3.2.2.1 基因载体荧光标记第51-52页
            3.2.2.2 基因递送系统摄取的荧光观察第52页
            3.2.2.3 基因递送系统定量摄取第52页
            3.2.2.4 抑制性摄取实验第52-53页
        3.2.3 基因递送系统的内-溶酶体逃逸机制第53页
        3.2.4 基因递送系统的pDNA释放动力学第53-54页
            3.2.4.1 凝胶阻滞实验第53页
            3.2.4.2 pDNA体外释放第53-54页
    3.3 结果与讨论第54-66页
        3.3.1 基因递送系统细胞摄取第54-57页
            3.3.1.1 基因递送系统摄取的荧光观察第54-56页
            3.3.1.2 定量摄取研究第56-57页
        3.3.2 内吞抑制剂对基因递送系统摄取的影响第57-58页
        3.3.3 基因递送系统的巨噬细胞RAW264.7摄取第58-61页
        3.3.4 基因递送系统的内-溶酶体逃逸机制第61-62页
        3.3.5 pDNA释放机制第62-66页
            3.3.5.1 凝胶阻滞分析第62-64页
            3.3.5.2 共聚焦显微镜观察第64-66页
    3.4 结论第66-68页
4 结论第68-70页
参考文献第70-76页
综述第76-96页
    参考文献第90-96页
作者简历第96页

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