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农杆菌介导虎杖芪合酶基因遗传转化枣树增强抗性的研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
1. 绪论第14-30页
    1.1. 枣栽培、产业发展及存在需要解决的问题第14页
    1.2. STS基因与遗传转化代谢白藜芦醇第14-19页
        1.2.1. STS基因第15页
        1.2.2. 白藜芦醇是从植物体中获取最有前景的物质之一第15-16页
        1.2.3. 白藜芦醇在营养和医药方面的应用第16页
        1.2.4. 白藜芦醇在农业方面对应用第16页
        1.2.5. 商业化生产白藜芦醇的方法第16-19页
    1.3. 芪合酶遗传转化实例第19-22页
        1.3.1. 芪合酶基因来源第19页
        1.3.2. 农作物过表达芪合酶基因第19-21页
        1.3.3. 果树基因工程研究现状第21-22页
        1.3.4. 枣树基因工程遗传转化研究第22页
    1.4. 立题依据与产业前景第22-24页
        1.4.1. 立题依据第22-24页
        1.4.2. 拟解决的关键问题第24页
    1.5. 本研究的目的意义第24-25页
    1.6. 技术路线第25-26页
    1.7. 试验研究方法第26-30页
        1.7.1. 枣树的高效率再生体系的研究第26-27页
        1.7.2. 植物表达载体构建第27页
        1.7.3. 遗传转化体系建立第27页
        1.7.4. 遗传转化植株检测第27-30页
2. 芪合酶基因植物表达载体的构建第30-36页
    2.1. 材料与方法第30-31页
        2.1.1. 基因及试剂第30页
        2.1.2. 方法第30-31页
    2.2. 结果与分析第31-34页
        2.2.1. 表达载体的构建与侵染菌株制备第31-33页
        2.2.2. 构建植物表达载体的验证第33-34页
    2.3. 讨论第34页
        2.3.1. 表达载体构建成功第34页
        2.3.2. 植物表达载体的应用前景分析第34页
    2.4. 本章小结第34-36页
3. 壶瓶枣遗传转化体系的建立第36-48页
    3.1. 材料与方法第36-39页
        3.1.1. 壶瓶枣与试剂第36-37页
        3.1.2. 方法第37-39页
    3.2. 结果与分析第39-45页
        3.2.1. 壶瓶枣枣苗生长状况结果的统计分析第39-40页
        3.2.2. 壶瓶枣无性系生根第40-41页
        3.2.3. 遗传转化影响因子的筛选第41-43页
        3.2.4. 遗传转化体系的优化第43-45页
        3.2.5. Basta筛选遗传转化体系材料的获得第45页
    3.3. 讨论第45-46页
        3.3.1. 外植体材料的可行性分析第45页
        3.3.2. 壶瓶枣遗传转化体系的建立第45-46页
    3.4. 本章小结第46-48页
4. 狗头枣遗传转化体系的建立第48-58页
    4.1. 材料与方法第48-51页
        4.1.1. 狗头枣及试验试剂第48页
        4.1.2. 方法第48-51页
    4.2. 结果与分析第51-56页
        4.2.1. 狗头枣叶片诱导愈伤组织的培养基筛选第51-52页
        4.2.2. 狗头枣愈伤组织的分化第52-53页
        4.2.3. 狗头枣狗头枣诱导生根第53页
        4.2.4. As对叶片愈伤组织诱导的影响第53页
        4.2.5. 抗生素的筛选第53-54页
        4.2.6. AgNO_3对愈伤组织分化的影响第54页
        4.2.7. 无性系试管苗抗除草剂试验第54-55页
        4.2.8. 狗头枣遗传转化体系优化第55-56页
    4.3. 讨论第56-57页
        4.3.1. 狗头枣叶片再生体系的建立第56-57页
        4.3.2. 再生遗传转化体系仍需深入研究第57页
    4.4. 本章小结第57-58页
5. 转基因材料测试验证第58-68页
    5.1. 材料与方法第59-61页
        5.1.1. 遗传转化材料及试剂第59页
        5.1.2. 方法第59-61页
    5.2. 结果与分析第61-65页
        5.2.1. 阳性植株的检测第61-63页
        5.2.2. 白藜芦醇的提取、分离与HPLC、LCMS分析第63-65页
    5.3. 讨论第65-66页
    5.4. 本章小结第66-68页
6. 转基因材料的抗性试验第68-76页
    6.1. 材料与方法第68-69页
        6.1.1. 遗传转化材料与枣病原真菌第68-69页
        6.1.2. 方法第69页
    6.2. 结果与分析第69-73页
        6.2.1. 白藜芦醇抑菌桃褐腐试验第69-70页
        6.2.2. 壶瓶枣遗传转化材料抑菌试验第70-72页
        6.2.3. 遗传转化材料抗螨虫试验第72-73页
    6.3. 讨论第73-75页
    6.4. 本章小结第75-76页
7. 结论第76-80页
    7.1. 主要结果第76-77页
        7.1.1. 成功构建PcPKS5植物表达载体第76页
        7.1.2. 建立和优化枣树再生遗传体系第76页
        7.1.3. 虎杖芪合酶基因在枣树异源成功表达第76页
        7.1.4. 转基因遗传枣树材料产生新的抗性第76-77页
    7.2. 本研究的创新点第77页
    7.3. 枣树转基因的展望与环境安全的思考第77-80页
参考文献第80-94页
附录第94-96页
个人简介第96-98页
导师简介第98-100页
成果目录第100-102页
致谢第102页

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