摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
1. 绪论 | 第14-30页 |
1.1. 枣栽培、产业发展及存在需要解决的问题 | 第14页 |
1.2. STS基因与遗传转化代谢白藜芦醇 | 第14-19页 |
1.2.1. STS基因 | 第15页 |
1.2.2. 白藜芦醇是从植物体中获取最有前景的物质之一 | 第15-16页 |
1.2.3. 白藜芦醇在营养和医药方面的应用 | 第16页 |
1.2.4. 白藜芦醇在农业方面对应用 | 第16页 |
1.2.5. 商业化生产白藜芦醇的方法 | 第16-19页 |
1.3. 芪合酶遗传转化实例 | 第19-22页 |
1.3.1. 芪合酶基因来源 | 第19页 |
1.3.2. 农作物过表达芪合酶基因 | 第19-21页 |
1.3.3. 果树基因工程研究现状 | 第21-22页 |
1.3.4. 枣树基因工程遗传转化研究 | 第22页 |
1.4. 立题依据与产业前景 | 第22-24页 |
1.4.1. 立题依据 | 第22-24页 |
1.4.2. 拟解决的关键问题 | 第24页 |
1.5. 本研究的目的意义 | 第24-25页 |
1.6. 技术路线 | 第25-26页 |
1.7. 试验研究方法 | 第26-30页 |
1.7.1. 枣树的高效率再生体系的研究 | 第26-27页 |
1.7.2. 植物表达载体构建 | 第27页 |
1.7.3. 遗传转化体系建立 | 第27页 |
1.7.4. 遗传转化植株检测 | 第27-30页 |
2. 芪合酶基因植物表达载体的构建 | 第30-36页 |
2.1. 材料与方法 | 第30-31页 |
2.1.1. 基因及试剂 | 第30页 |
2.1.2. 方法 | 第30-31页 |
2.2. 结果与分析 | 第31-34页 |
2.2.1. 表达载体的构建与侵染菌株制备 | 第31-33页 |
2.2.2. 构建植物表达载体的验证 | 第33-34页 |
2.3. 讨论 | 第34页 |
2.3.1. 表达载体构建成功 | 第34页 |
2.3.2. 植物表达载体的应用前景分析 | 第34页 |
2.4. 本章小结 | 第34-36页 |
3. 壶瓶枣遗传转化体系的建立 | 第36-48页 |
3.1. 材料与方法 | 第36-39页 |
3.1.1. 壶瓶枣与试剂 | 第36-37页 |
3.1.2. 方法 | 第37-39页 |
3.2. 结果与分析 | 第39-45页 |
3.2.1. 壶瓶枣枣苗生长状况结果的统计分析 | 第39-40页 |
3.2.2. 壶瓶枣无性系生根 | 第40-41页 |
3.2.3. 遗传转化影响因子的筛选 | 第41-43页 |
3.2.4. 遗传转化体系的优化 | 第43-45页 |
3.2.5. Basta筛选遗传转化体系材料的获得 | 第45页 |
3.3. 讨论 | 第45-46页 |
3.3.1. 外植体材料的可行性分析 | 第45页 |
3.3.2. 壶瓶枣遗传转化体系的建立 | 第45-46页 |
3.4. 本章小结 | 第46-48页 |
4. 狗头枣遗传转化体系的建立 | 第48-58页 |
4.1. 材料与方法 | 第48-51页 |
4.1.1. 狗头枣及试验试剂 | 第48页 |
4.1.2. 方法 | 第48-51页 |
4.2. 结果与分析 | 第51-56页 |
4.2.1. 狗头枣叶片诱导愈伤组织的培养基筛选 | 第51-52页 |
4.2.2. 狗头枣愈伤组织的分化 | 第52-53页 |
4.2.3. 狗头枣狗头枣诱导生根 | 第53页 |
4.2.4. As对叶片愈伤组织诱导的影响 | 第53页 |
4.2.5. 抗生素的筛选 | 第53-54页 |
4.2.6. AgNO_3对愈伤组织分化的影响 | 第54页 |
4.2.7. 无性系试管苗抗除草剂试验 | 第54-55页 |
4.2.8. 狗头枣遗传转化体系优化 | 第55-56页 |
4.3. 讨论 | 第56-57页 |
4.3.1. 狗头枣叶片再生体系的建立 | 第56-57页 |
4.3.2. 再生遗传转化体系仍需深入研究 | 第57页 |
4.4. 本章小结 | 第57-58页 |
5. 转基因材料测试验证 | 第58-68页 |
5.1. 材料与方法 | 第59-61页 |
5.1.1. 遗传转化材料及试剂 | 第59页 |
5.1.2. 方法 | 第59-61页 |
5.2. 结果与分析 | 第61-65页 |
5.2.1. 阳性植株的检测 | 第61-63页 |
5.2.2. 白藜芦醇的提取、分离与HPLC、LCMS分析 | 第63-65页 |
5.3. 讨论 | 第65-66页 |
5.4. 本章小结 | 第66-68页 |
6. 转基因材料的抗性试验 | 第68-76页 |
6.1. 材料与方法 | 第68-69页 |
6.1.1. 遗传转化材料与枣病原真菌 | 第68-69页 |
6.1.2. 方法 | 第69页 |
6.2. 结果与分析 | 第69-73页 |
6.2.1. 白藜芦醇抑菌桃褐腐试验 | 第69-70页 |
6.2.2. 壶瓶枣遗传转化材料抑菌试验 | 第70-72页 |
6.2.3. 遗传转化材料抗螨虫试验 | 第72-73页 |
6.3. 讨论 | 第73-75页 |
6.4. 本章小结 | 第75-76页 |
7. 结论 | 第76-80页 |
7.1. 主要结果 | 第76-77页 |
7.1.1. 成功构建PcPKS5植物表达载体 | 第76页 |
7.1.2. 建立和优化枣树再生遗传体系 | 第76页 |
7.1.3. 虎杖芪合酶基因在枣树异源成功表达 | 第76页 |
7.1.4. 转基因遗传枣树材料产生新的抗性 | 第76-77页 |
7.2. 本研究的创新点 | 第77页 |
7.3. 枣树转基因的展望与环境安全的思考 | 第77-80页 |
参考文献 | 第80-94页 |
附录 | 第94-96页 |
个人简介 | 第96-98页 |
导师简介 | 第98-100页 |
成果目录 | 第100-102页 |
致谢 | 第102页 |