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农杆菌介导‘蜂蜜罐枣上胚轴和子叶遗传转化体系的建立及Bt基因的转化

致谢第4-5页
缩略词表 Abbreviation第5-6页
摘要第6-10页
1 文献综述第10-20页
    1.1 枣树遗传转化概况第10-11页
    1.2 果树遗传转化概述第11-18页
        1.2.1 常用遗传转化方法及其优缺点第11-12页
            1.2.1.1 农杆菌介导法第11页
            1.2.1.2 基因枪法第11-12页
            1.2.1.3 PEG介导法第12页
            1.2.1.4 超生波介导法第12页
        1.2.2 常用外植体类型第12-15页
            1.2.2.1 愈伤组织第12-13页
            1.2.2.2 原生质体第13页
            1.2.2.3 悬浮细胞第13页
            1.2.2.4 胚状体第13页
            1.2.2.5 叶片第13-14页
            1.2.2.6 茎段第14页
            1.2.2.7 子叶第14页
            1.2.2.8 胚轴第14-15页
        1.2.3 常用报告基因第15-16页
            1.2.3.1 绿色荧光蛋白第15页
            1.2.3.2 红色荧光蛋白第15页
            1.2.3.3 β-葡糖苷酸酶第15-16页
        1.2.4 影响转化的因素第16-18页
            1.2.4.1 基因型第16页
            1.2.4.2 菌株第16页
            1.2.4.3 预培养时间第16-17页
            1.2.4.4 菌液浓度和侵染时间第17页
            1.2.4.6 共培养时间和温度第17页
            1.2.4.7 乙酰丁香酮第17-18页
            1.2.4.8 侵染方式第18页
    1.3 抗虫基因研究进展第18-19页
    1.4 研究意义第19-20页
2 引言第20-21页
3 材料与方法第21-28页
    3.1 材料第21-23页
        3.1.1 试验材料第21页
        3.1.2 农杆菌菌株和质粒第21-22页
        3.1.3 主要药品试剂第22页
        3.1.4 主要仪器设备第22页
        3.1.5 培养基第22-23页
        3.1.6 培养条件第23页
    3.2 试验方法第23-28页
        3.2.1 无菌材料的获得第23页
        3.2.2 上胚轴、子叶Kan敏感性试验第23页
        3.2.3 农杆菌侵染液的制备第23-24页
        3.2.4 农杆菌介导‘蜂蜜罐’枣不同外植体的遗传转化第24-25页
            3.2.4.1 预培养第24页
            3.2.4.2 侵染第24页
            3.2.4.3 共培养第24-25页
            3.2.4.4 筛选培养第25页
            3.2.4.5 抗性植株再生第25页
        3.2.5 GUS组织化学检测第25页
        3.2.6 分子检测第25-27页
            3.2.6.1 质粒DNA提取第25-26页
            3.2.6.2 植物DNA提取第26页
            3.2.6.3 PCR检测第26-27页
        3.2.7 数据统计与分析第27-28页
4 结果与分析第28-38页
    4.1 不同外植体Kan敏感性试验第28-30页
        4.1.1 不同浓度Kan对上胚轴再生的影响第28-29页
        4.1.2 不同浓度Kan对子叶再生的影响第29-30页
    4.2 农杆菌介导上胚轴和子叶遗传转化体系的建立第30-35页
        4.2.1 不同的预培养时间对转化效率的影响第30页
        4.2.2 不同的侵染浓度对转化效率的影响第30-31页
        4.2.3 不同的侵染时间对转化效率的影响第31-32页
        4.2.4 不同的共培养时间对转化效率的影响第32-33页
        4.2.5 不同的乙酰丁香酮浓度对转化效率的影响第33-34页
        4.2.6 不同的侵染方式对转化效率的影响第34页
        4.2.7 不同处理对GUS染色状况的影响第34-35页
    4.3 根癌农杆菌介导‘蜂蜜罐’ 枣Bt基因的遗传转化第35-38页
5 讨论与结论第38-42页
    5.1 讨论第38-40页
        5.1.1 不同外植体Kan敏感性试验第38页
        5.1.2 不同的预培养时间对转化效率的影响第38页
        5.1.3 不同的菌液浓度对转化效率的影响第38-39页
        5.1.4 不同的侵染时间对转化效率的影响第39页
        5.1.5 不同的共培养时间对转化效率的影响第39页
        5.1.6 不同的乙酰丁香酮浓度对转化效率的影响第39页
        5.1.7 不同侵染方式对转化效率的影响第39-40页
    5.2 结论第40-42页
参考文献第42-47页
ABSTACT第47-48页

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