致谢 | 第4-5页 |
缩略词表 Abbreviation | 第5-6页 |
摘要 | 第6-10页 |
1 文献综述 | 第10-20页 |
1.1 枣树遗传转化概况 | 第10-11页 |
1.2 果树遗传转化概述 | 第11-18页 |
1.2.1 常用遗传转化方法及其优缺点 | 第11-12页 |
1.2.1.1 农杆菌介导法 | 第11页 |
1.2.1.2 基因枪法 | 第11-12页 |
1.2.1.3 PEG介导法 | 第12页 |
1.2.1.4 超生波介导法 | 第12页 |
1.2.2 常用外植体类型 | 第12-15页 |
1.2.2.1 愈伤组织 | 第12-13页 |
1.2.2.2 原生质体 | 第13页 |
1.2.2.3 悬浮细胞 | 第13页 |
1.2.2.4 胚状体 | 第13页 |
1.2.2.5 叶片 | 第13-14页 |
1.2.2.6 茎段 | 第14页 |
1.2.2.7 子叶 | 第14页 |
1.2.2.8 胚轴 | 第14-15页 |
1.2.3 常用报告基因 | 第15-16页 |
1.2.3.1 绿色荧光蛋白 | 第15页 |
1.2.3.2 红色荧光蛋白 | 第15页 |
1.2.3.3 β-葡糖苷酸酶 | 第15-16页 |
1.2.4 影响转化的因素 | 第16-18页 |
1.2.4.1 基因型 | 第16页 |
1.2.4.2 菌株 | 第16页 |
1.2.4.3 预培养时间 | 第16-17页 |
1.2.4.4 菌液浓度和侵染时间 | 第17页 |
1.2.4.6 共培养时间和温度 | 第17页 |
1.2.4.7 乙酰丁香酮 | 第17-18页 |
1.2.4.8 侵染方式 | 第18页 |
1.3 抗虫基因研究进展 | 第18-19页 |
1.4 研究意义 | 第19-20页 |
2 引言 | 第20-21页 |
3 材料与方法 | 第21-28页 |
3.1 材料 | 第21-23页 |
3.1.1 试验材料 | 第21页 |
3.1.2 农杆菌菌株和质粒 | 第21-22页 |
3.1.3 主要药品试剂 | 第22页 |
3.1.4 主要仪器设备 | 第22页 |
3.1.5 培养基 | 第22-23页 |
3.1.6 培养条件 | 第23页 |
3.2 试验方法 | 第23-28页 |
3.2.1 无菌材料的获得 | 第23页 |
3.2.2 上胚轴、子叶Kan敏感性试验 | 第23页 |
3.2.3 农杆菌侵染液的制备 | 第23-24页 |
3.2.4 农杆菌介导‘蜂蜜罐’枣不同外植体的遗传转化 | 第24-25页 |
3.2.4.1 预培养 | 第24页 |
3.2.4.2 侵染 | 第24页 |
3.2.4.3 共培养 | 第24-25页 |
3.2.4.4 筛选培养 | 第25页 |
3.2.4.5 抗性植株再生 | 第25页 |
3.2.5 GUS组织化学检测 | 第25页 |
3.2.6 分子检测 | 第25-27页 |
3.2.6.1 质粒DNA提取 | 第25-26页 |
3.2.6.2 植物DNA提取 | 第26页 |
3.2.6.3 PCR检测 | 第26-27页 |
3.2.7 数据统计与分析 | 第27-28页 |
4 结果与分析 | 第28-38页 |
4.1 不同外植体Kan敏感性试验 | 第28-30页 |
4.1.1 不同浓度Kan对上胚轴再生的影响 | 第28-29页 |
4.1.2 不同浓度Kan对子叶再生的影响 | 第29-30页 |
4.2 农杆菌介导上胚轴和子叶遗传转化体系的建立 | 第30-35页 |
4.2.1 不同的预培养时间对转化效率的影响 | 第30页 |
4.2.2 不同的侵染浓度对转化效率的影响 | 第30-31页 |
4.2.3 不同的侵染时间对转化效率的影响 | 第31-32页 |
4.2.4 不同的共培养时间对转化效率的影响 | 第32-33页 |
4.2.5 不同的乙酰丁香酮浓度对转化效率的影响 | 第33-34页 |
4.2.6 不同的侵染方式对转化效率的影响 | 第34页 |
4.2.7 不同处理对GUS染色状况的影响 | 第34-35页 |
4.3 根癌农杆菌介导‘蜂蜜罐’ 枣Bt基因的遗传转化 | 第35-38页 |
5 讨论与结论 | 第38-42页 |
5.1 讨论 | 第38-40页 |
5.1.1 不同外植体Kan敏感性试验 | 第38页 |
5.1.2 不同的预培养时间对转化效率的影响 | 第38页 |
5.1.3 不同的菌液浓度对转化效率的影响 | 第38-39页 |
5.1.4 不同的侵染时间对转化效率的影响 | 第39页 |
5.1.5 不同的共培养时间对转化效率的影响 | 第39页 |
5.1.6 不同的乙酰丁香酮浓度对转化效率的影响 | 第39页 |
5.1.7 不同侵染方式对转化效率的影响 | 第39-40页 |
5.2 结论 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
ABSTACT | 第47-48页 |