摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
第一章 蛋白质组学及其在动物医学中的应用 | 第9-15页 |
·蛋白组组学常用技术 | 第9-11页 |
·蛋白质的分离技术 | 第9-10页 |
·蛋白质的鉴定技术 | 第10-11页 |
·生物信息学 | 第11页 |
·蛋白质组学研究策略 | 第11页 |
·蛋白质组学在动物医学中的应用研究进展 | 第11-15页 |
·蛋白质组学在动物细菌性疾病研究中的应用 | 第11-12页 |
·蛋白质组学在动物病毒性疾病研究中的应用 | 第12-13页 |
·蛋白质组学在动物寄生虫病研究中的应用 | 第13页 |
·蛋白质组学在动物其他疾病及相关领域研究中的应用 | 第13-14页 |
·展望 | 第14-15页 |
第二章 口蹄疫病毒前导白蛋(L~(pro))功能研究进展 | 第15-19页 |
·L~(pro) 的结构特征及活性区域 | 第15页 |
·L~(pro) 对宿主蛋白质翻译的影响 | 第15-16页 |
·L~(pro) 是FMDV 主要毒力决定因子之一 | 第16页 |
·L~(pro) 抑制宿主天然免疫应答 | 第16-18页 |
·L~(pro) 与细胞凋亡 | 第18页 |
·L~(pro) 的亚细胞定位特征 | 第18页 |
·展望 | 第18-19页 |
第三章 亚洲1 型FMDV 前导蛋白亚细胞定位 | 第19-30页 |
前言 | 第19页 |
·材料 | 第19-21页 |
·病毒、菌株、细胞、载体 | 第19页 |
·工具酶及要试剂 | 第19-20页 |
·主要仪器 | 第20页 |
·培养基及抗生素的配置 | 第20-21页 |
·方法 | 第21-26页 |
·引物的设计与合成 | 第21页 |
·病毒RNA 提取 | 第21页 |
·目的基因的RT-PCR 扩增 | 第21页 |
·PCR 产物回收 | 第21-22页 |
·目的基因与载体的双酶切 | 第22页 |
·目的基因与真核表达载体的连接 | 第22页 |
·连接产物的转化 | 第22-23页 |
·重组质粒的提取 | 第23页 |
·重组质粒的酶切及PCR 鉴定 | 第23-24页 |
·重组质粒的大量提取及浓度测定 | 第24页 |
·转染 | 第24页 |
·表达产物的荧光检测 | 第24-25页 |
·表达产物的western-blot 分析 | 第25页 |
·PI 核染及亚细胞定位观察 | 第25-26页 |
·结果 | 第26-29页 |
·L~(pro) 基因的RT-PCR 扩增 | 第26页 |
·pEGFPN-L~(pro) 重组质粒的鉴定 | 第26-27页 |
·重组蛋白的荧光检测 | 第27-28页 |
·western blot 分析 | 第28页 |
·L~(pro) 的亚细胞定位 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
第四章 Asia1 型FMDV 前导蛋白致BHK-21 蛋白质组变化研究 | 第30-49页 |
前言 | 第30页 |
·材料 | 第30-31页 |
·病毒、菌株、细胞、载体 | 第30页 |
·工具酶及要试剂 | 第30-31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
·方法 | 第31-36页 |
·目的基因与载体的双酶切 | 第31页 |
·目的基因与真核表达载体的连接 | 第31-32页 |
·重组质粒的鉴定 | 第32页 |
·重组质粒的大量提取 | 第32页 |
·转染及样品制备 | 第32页 |
·表达产物的RT-PCR 检测 | 第32页 |
·表达产物的Western blot 分析 | 第32页 |
·第一向IEF | 第32-33页 |
·第二向SDS-PAGE | 第33-34页 |
·凝胶染色 | 第34-35页 |
·图像扫描和分析 | 第35页 |
·胶内酶切与质谱鉴定 | 第35-36页 |
·鉴定蛋白的生物信息学分析 | 第36页 |
·结果 | 第36-48页 |
·重组质粒pCDNA-L~(pro) 的鉴定 | 第36页 |
·表达产物的RT-PCR 检测 | 第36-37页 |
·western blot 分析 | 第37页 |
·2-DE 图谱 | 第37-38页 |
·2-DE 图谱分析 | 第38-40页 |
·蛋白鉴定 | 第40-44页 |
·鉴定蛋白的注释及生物信息学分析 | 第44-48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
第五章 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
附录 | 第57-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简介 | 第63页 |
硕士期间文章发表情况 | 第63-64页 |
导师简介 | 第64页 |