| 致谢 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 英文缩略词 | 第7-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-14页 |
| 1.1 课题背景 | 第10-13页 |
| 1.2 实验设计流程图 | 第13-14页 |
| 第2章 材料方法 | 第14-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第14页 |
| 2.1.1 实验仪器和设备 | 第14页 |
| 2.2 实验方法 | 第14-24页 |
| 2.2.1 公共数据库资料采集分析 | 第14-15页 |
| 2.2.2 细胞系与培养条件 | 第15页 |
| 2.2.3 细胞转染 | 第15-16页 |
| 2.2.4 细胞转染实验 | 第16页 |
| 2.2.5 免疫印迹(Western blot)分析 | 第16-17页 |
| 2.2.6 逆转录反应及PCR | 第17-18页 |
| 2.2.7 免疫荧光实验 | 第18页 |
| 2.2.8 染色质免疫共沉淀 | 第18-20页 |
| 2.2.9 链霉亲和素珠子Pull-down实验 | 第20-21页 |
| 2.2.10 荧光素酶报告基因实验 | 第21页 |
| 2.2.11 端粒酶活性检测 | 第21页 |
| 2.2.12 细胞增殖实验 | 第21-22页 |
| 2.2.13 细胞粘附实验 | 第22页 |
| 2.2.14 EdU法细胞增殖检测 | 第22页 |
| 2.2.15 免疫组织化学染色 | 第22-23页 |
| 2.2.16 动物实验 | 第23页 |
| 2.2.17 统计学分析 | 第23-24页 |
| 第3章 实验结果 | 第24-45页 |
| 3.1 肺癌中KLF4和hTERT的表达负性相关 | 第24-29页 |
| 3.1.1 TCGA数据库分析 | 第24-25页 |
| 3.1.2 KLF4与hTERT的表达水平呈负性相关 | 第25-26页 |
| 3.1.3 肺癌组织微阵列芯片免疫组化分析 | 第26-28页 |
| 3.1.4 KLF4和hTERT表达水平与肺癌病人预后相关 | 第28-29页 |
| 3.2 KLF4抑制hTERT表达水平及端粒酶活性 | 第29-32页 |
| 3.2.1 阻断内源性KLF4蛋白表达后hTERT表达上调 | 第30页 |
| 3.2.2 过表达KLF4细胞中的hTERT表达水平下调 | 第30-31页 |
| 3.2.3 过表达KLF4抑制hTERT活性 | 第31页 |
| 3.2.4 KLF4与hTERT免疫荧光共定位检测 | 第31-32页 |
| 3.3 KLF4直接结合在hTERT启动子区域 | 第32-35页 |
| 3.3.1 荧光素酶报告基因实验 | 第32-33页 |
| 3.3.2 KLF4结合在hTERT的启动子区域 | 第33-34页 |
| 3.3.3 Pull-down实验证实KLF4与hTERT直接结合 | 第34-35页 |
| 3.4 KLF4调节肺癌细胞生长和粘附能力 | 第35-36页 |
| 3.4.1 敲低KLF4促进肺癌细胞生长 | 第35页 |
| 3.4.2 KLF4对于细胞活力及粘附能力的影响 | 第35-36页 |
| 3.5 MAPK信号通路参与KLF4对细胞生长及hTERT表达的调节 | 第36-39页 |
| 3.5.1 过表达KLF4抑制MAPK信号通路 | 第37-38页 |
| 3.5.2 敲低KLF4后MAPK信号通路被激活 | 第38-39页 |
| 3.6 hTERT参与KLF4对于肺癌细胞生长的调节作用 | 第39-42页 |
| 3.6.1 干扰hTERT对细胞活力的影响 | 第39页 |
| 3.6.2 共干扰KLF4和hTERT蛋白表达对细胞活力的影响 | 第39-40页 |
| 3.6.3 共转染KLF4和hTERT过表达质粒对细胞生长能力的影响 | 第40-42页 |
| 3.7 动物模型验证KLF4对抑制肿瘤生长及对hTERT的负性调控 | 第42-45页 |
| 3.7.1 KLF4表达对细胞成瘤能力的影响 | 第42-44页 |
| 3.7.2 肿瘤的免疫组织化学分析 | 第44-45页 |
| 第4章 讨论 | 第45-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 综述 | 第54-66页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 作者简历及在校期间所取得的科研成果 | 第66页 |
