| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-27页 |
| 1 植物高温、干旱胁迫响应机制 | 第15-21页 |
| 1.1 高温和干旱胁迫对植物的影响 | 第15-16页 |
| 1.2 植物对高温和干旱胁迫的生理响应 | 第16-18页 |
| 1.3 植物对高温和干旱胁迫的分子响应 | 第18-19页 |
| 1.4 茶树高温、干旱胁迫响应机制研究进展 | 第19-21页 |
| 2 RNA-Seq技术在植物响应高温、干旱胁迫分子机制研究中的应用 | 第21-22页 |
| 2.1 基于RNA-Seq技术的植物耐热、耐旱分子机制研究 | 第21-22页 |
| 2.2 RNA-Seq在茶树研究中的应用 | 第22页 |
| 3 茶树生物活性成分合成代谢的分子机制 | 第22-25页 |
| 3.1 儿茶素生物合成途径 | 第23-24页 |
| 3.2 咖啡碱生物合成途径 | 第24页 |
| 3.3 茶氨酸生物合成途径 | 第24-25页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 第二章 基于RNA-Seq的茶树响应高温和干旱胁迫的转录组分析 | 第27-73页 |
| 1 材料与方法 | 第28-31页 |
| 1.1 植物材料与处理 | 第28页 |
| 1.2 总RNA提取、cDNA文库构建和测序 | 第28-29页 |
| 1.3 测序数据处理 | 第29页 |
| 1.4 Unigene表达差异分析 | 第29-30页 |
| 1.5 荧光实时定量PCR (Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)验证 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-68页 |
| 2.1 测序质量分析 | 第31页 |
| 2.2 de novo组装结果统计 | 第31-32页 |
| 2.3 Unigene功能注释结果 | 第32-39页 |
| 2.4 高温和干旱胁迫下茶树转录组比较分析 | 第39-50页 |
| 2.5 高温和干旱胁迫下关键响应基因差异表达分析 | 第50-66页 |
| 2.6 差异表达基因的qRT-PCR验证 | 第66-68页 |
| 3 讨论 | 第68-73页 |
| 3.1 茶树响应高温和干旱胁迫的整体转录模式 | 第68页 |
| 3.2 Ca~(2+)信号途径与高温干旱胁迫响应 | 第68-69页 |
| 3.3 转录因子与高温干旱胁迫响应 | 第69-70页 |
| 3.4 关键功能基因与高温、干旱胁迫响应 | 第70-73页 |
| 第三章 干旱胁迫对茶树主要生物活性成分积累的影响及相关差异表达基因鉴定 | 第73-93页 |
| 1 材料与方法 | 第74-77页 |
| 1.1 植物材料与处理 | 第74页 |
| 1.2 干旱胁迫下茶树表型及生理特性分析 | 第74页 |
| 1.3 干旱胁迫下茶树叶片总多酚、黄酮和游离氨基酸含量的测定 | 第74-76页 |
| 1.4 干旱胁迫下茶树叶片儿茶素和咖啡碱含量的测定 | 第76页 |
| 1.5 干旱胁迫下茶树叶片茶氨酸和其他氨基酸含量的测定 | 第76页 |
| 1.6 干旱胁迫下氨基酸代谢和次生物质代谢相关DEGs的鉴定和分析 | 第76页 |
| 1.7 差异表达基因的qRT-PCR验证 | 第76-77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-90页 |
| 2.1 干旱胁迫下茶树表型及生理特性的变化 | 第77-78页 |
| 2.2 干旱胁迫下茶树叶片总多酚、黄酮和游离氨基酸含量的变化 | 第78-79页 |
| 2.3 干旱胁迫下茶树叶片儿茶素和咖啡碱含量的变化 | 第79-81页 |
| 2.4 干旱胁迫下茶树叶片茶氨酸和其他氨基酸含量的变化 | 第81-82页 |
| 2.5 干旱胁迫下氨基酸代谢和次生物质代谢相关DEGs的鉴定和分析 | 第82-84页 |
| 2.6 干旱胁迫下类黄酮生物合成途径的变化 | 第84-86页 |
| 2.7 干旱胁迫下咖啡碱生物合成途径的变化 | 第86-87页 |
| 2.8 干旱胁迫下茶氨酸生物合成途径的变化 | 第87-88页 |
| 2.9 关键DEGs的qRT-PCR验证 | 第88-90页 |
| 3 讨论 | 第90-93页 |
| 第四章 茶树Histone H1基因(CsHis-H1)在逆境胁迫下的功能分析 | 第93-111页 |
| 1 材料与方法 | 第94-98页 |
| 1.1 植物材料与处理 | 第94页 |
| 1.2 茶树CsHis-H1基因的克隆 | 第94-95页 |
| 1.3 亚细胞定位分析 | 第95页 |
| 1.4 CsHis-H1的原核表达和Western blot分析 | 第95-96页 |
| 1.5 CsHis-H1的qRT-PCR分析 | 第96页 |
| 1.6 转基因烟草的获得与鉴定 | 第96-97页 |
| 1.7 超显微结构观察 | 第97页 |
| 1.8 转基因烟草的抗逆性分析 | 第97-98页 |
| 2 结果与分析 | 第98-108页 |
| 2.1 茶树CsHis-H1基因的克隆 | 第98页 |
| 2.2 茶树CsHis-H1蛋白的亚细胞定位分析 | 第98-99页 |
| 2.3 CsHis-H1蛋白的原核表达分析 | 第99-100页 |
| 2.4 CsHis-H1基因的表达分析 | 第100-101页 |
| 2.5 转基因烟草的获得与鉴定 | 第101-103页 |
| 2.6 转基因烟草的表型分析 | 第103-105页 |
| 2.7 转基因烟草在非生物胁迫下的表型及生理特性分析 | 第105-108页 |
| 3 讨论 | 第108-111页 |
| 全文结论 | 第111-113页 |
| 创新点 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-129页 |
| 附录 | 第129-163页 |
| 一 植物总RNA提取 | 第129-130页 |
| 二 1st-Strand cDNA合成及检测 | 第130-131页 |
| 三 叶绿素含量的测定 | 第131-132页 |
| 四 丙二醛含量的测定 | 第132-133页 |
| 五 DNA片段凝胶纯化回收 | 第133-134页 |
| 六 目的片段连接转化 | 第134-135页 |
| 七 高保真PCR | 第135-136页 |
| 八 双酶切和载体构建 | 第136-137页 |
| 九 洋葱表皮细胞瞬时表达 | 第137-138页 |
| 十 转化农杆菌感受态 | 第138-139页 |
| 十一 农杆菌叶盘侵染法转化烟草 | 第139-140页 |
| 十二 CTAB法提取DNA | 第140-141页 |
| 十三 质粒提取 | 第141-142页 |
| 十四 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第142-143页 |
| 十五 农杆菌感受态细胞的制备 | 第143-144页 |
| 十六 常用培养基配制方法 | 第144-145页 |
| 十七 MS培养基配制方法 | 第145-147页 |
| 十八 附表 | 第147-163页 |
| 攻读学位期间发表论文及所获奖励 | 第163-165页 |
| 致谢 | 第165页 |
