摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第12-33页 |
1.1 研究背景 | 第12-17页 |
1.1.1 微生物视紫质分类与特性 | 第12-14页 |
1.1.2 嗜盐古生菌习性与归属 | 第14-15页 |
1.1.3 视紫质膜蛋白bR和aR4的结构与功能 | 第15-17页 |
1.2 研究进展 | 第17-26页 |
1.2.1 bR的光循环和质子泵功能 | 第17-19页 |
1.2.2 aR4可能的光循环和质子泵功能 | 第19-21页 |
1.2.3 Y185/Y186的功能对比研究 | 第21-23页 |
1.2.4 膜蛋白的合适表达系统 | 第23-26页 |
1.3 研究手段 | 第26-31页 |
1.3.1 基因定点突变技术 | 第26页 |
1.3.2 固体核磁共振技术 | 第26-29页 |
1.3.3 傅立叶变换红外光谱技术 | 第29-31页 |
1.4 本论文的研究目的、内容及意义 | 第31-33页 |
第二章 Y186F突变体基因构建与表达 | 第33-41页 |
2.1 引言 | 第33页 |
2.2 材料与方法 | 第33-35页 |
2.2.1 材料 | 第33页 |
2.2.2 重组RC~(L33)-ar4基因构建 | 第33-34页 |
2.2.3 Y186F-ar4基因构建 | 第34-35页 |
2.2.4 Y186F~(L33)-aR4蛋白表达与纯化 | 第35页 |
2.3 结果与讨论 | 第35-40页 |
2.3.1 Y186F-ar4基因鉴定 | 第35-37页 |
2.3.2 Y186F~(L33)-aR4蛋白性质鉴定 | 第37-40页 |
2.4 本章总结 | 第40-41页 |
第三章 Y186F突变对视黄醛键合区及光循环的影响 | 第41-60页 |
3.1 引言 | 第41页 |
3.2 材料与方法 | 第41-45页 |
3.2.1 样品制备 | 第41-42页 |
3.2.2 光循环动力学中间态测定 | 第42-43页 |
3.2.3 固体核磁共振研究 | 第43-44页 |
3.2.4 D86和D97的酸碱滴定 | 第44页 |
3.2.5 FTIR光循环中间态捕捉 | 第44-45页 |
3.3 结果与讨论 | 第45-59页 |
3.3.1 Y186F~(L33)-aR4蛋白的重构 | 第45-46页 |
3.3.2 Y186F~(L33)-aR4蛋白的光循环 | 第46-49页 |
3.3.3 Y186F突变对视黄醛键合区的影响 | 第49-57页 |
3.3.4 D86和D97的pKa值测定 | 第57-59页 |
3.4 本章总结 | 第59-60页 |
第四章 Y186F突变对细胞膜稳定性及菌株ATP合成的影响 | 第60-66页 |
4.1 引言 | 第60页 |
4.2 材料与方法 | 第60-61页 |
4.2.1 材料与仪器 | 第60页 |
4.2.2 蛋白质聚集状态测定 | 第60-61页 |
4.2.3 嗜盐菌ATP生成率测定 | 第61页 |
4.3 结果与讨论 | 第61-64页 |
4.3.1 嗜盐菌产能机制 | 第61-62页 |
4.3.2 蛋白质聚集状态测定结果讨论 | 第62-64页 |
4.3.3 不同菌体ATP生成率测定结果讨论 | 第64页 |
4.4 本章总结 | 第64-66页 |
第五章 总结和展望 | 第66-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
硕士期间发表论文 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |