| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 主要符号表 | 第17-18页 |
| 1 绪论 | 第18-46页 |
| 1.1 脑肿瘤微环境简介 | 第18-37页 |
| 1.1.1 脑肿瘤微环境定义 | 第18-19页 |
| 1.1.2 脑肿瘤微环境组成 | 第19页 |
| 1.1.3 血脑屏障 | 第19-24页 |
| 1.1.4 脑肿瘤微环境研究意义 | 第24页 |
| 1.1.5 脑肿瘤微环境的影响因素 | 第24-37页 |
| 1.1.6 脑肿瘤微环境研究方法 | 第37页 |
| 1.2 微流控芯片技术 | 第37-40页 |
| 1.2.1 微流控芯片技术简介 | 第37-39页 |
| 1.2.2 微流控技术用于肿瘤微环境研究的特点和优势 | 第39-40页 |
| 1.3 微流控芯片技术肿瘤微环境仿生构建研究进展 | 第40-44页 |
| 1.3.1 组织器官仿生与肿瘤微环境构建 | 第41页 |
| 1.3.2 脑微环境仿生建立 | 第41-43页 |
| 1.3.3 药物评价与筛选 | 第43-44页 |
| 1.4 微流控技术脑肿瘤微环境仿生构建总结与展望 | 第44页 |
| 1.5 本论文主要研究思路 | 第44-46页 |
| 2 微流控技术脑肿瘤微环境仿生构建方法学研究 | 第46-68页 |
| 2.1 引言 | 第46-47页 |
| 2.2 实验部分 | 第47-59页 |
| 2.2.1 仪器与试剂 | 第47-49页 |
| 2.2.2 脑微血管炎症模型芯片设计与制备 | 第49-52页 |
| 2.2.3 肿瘤侵袭模型芯片设计与制备 | 第52-56页 |
| 2.2.4 三维动态血脑屏障芯片设计与制备 | 第56-59页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第59-67页 |
| 2.3.1 脑微血管炎症模型芯片表征与评价 | 第59-61页 |
| 2.3.2 肿瘤脑转移模型芯片表征与评价 | 第61-64页 |
| 2.3.3 三维动态血脑屏障芯片表征与评价 | 第64-67页 |
| 2.4 本章小结 | 第67-68页 |
| 3 肺癌细胞对肿瘤坏死因子诱导炎性脑微血管内皮细胞的响应及机制研究 | 第68-84页 |
| 3.1 引言 | 第68-69页 |
| 3.2 实验部分 | 第69-76页 |
| 3.2.1 仪器与试剂 | 第69-72页 |
| 3.2.2 肿瘤坏死因子诱导脑微血管炎症模型的建立与表征 | 第72-73页 |
| 3.2.3 肺癌细胞对炎性脑微血管内皮细胞的响应 | 第73页 |
| 3.2.4 肺癌细胞对炎性脑微血管内皮细胞响应机制研究 | 第73-76页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第76-83页 |
| 3.3.1 TNF-α和Y27632分子对BMECs细胞生存和增殖能力的影响 | 第76-77页 |
| 3.3.2 肺癌细胞在炎症BMECs细胞表面的滚动和粘附 | 第77-79页 |
| 3.3.3 BMECs细胞中粘附蛋白的表达 | 第79-81页 |
| 3.3.4 实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测粘附基因的变化 | 第81页 |
| 3.3.5 肺癌细胞在炎症BMECs细胞表面粘附行为的机制 | 第81-83页 |
| 3.4 本章小结 | 第83-84页 |
| 4 脑肿瘤微环境的构建及肿瘤细胞侵袭行为研究 | 第84-106页 |
| 4.1 引言 | 第84-86页 |
| 4.2 实验部分 | 第86-95页 |
| 4.2.1 仪器与试剂 | 第86-88页 |
| 4.2.2 缺氧微环境的构建 | 第88-89页 |
| 4.2.3 缺氧诱导因子-1α/2α(HIF-1α/2α)转染脑胶质瘤细胞系构建 | 第89页 |
| 4.2.4 脑胶质瘤细胞缺氧微环境中的增殖和形态学变化 | 第89-90页 |
| 4.2.5 脑胶质瘤细胞形态和运动能力变化机制研究 | 第90-95页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第95-104页 |
| 4.3.1 缺氧环境中脑胶质瘤细胞的增殖 | 第95-96页 |
| 4.3.2 缺氧环境中脑胶质瘤细胞的形态学变化与EMT | 第96-98页 |
| 4.3.3 Western blot定量表征EMT标记物蛋白表达 | 第98-100页 |
| 4.3.4 缺氧微环境下脑胶质瘤细胞的运动侵袭 | 第100-102页 |
| 4.3.5 HIF-1α/HIF-2α质粒转染U87细胞的运动侵袭 | 第102-103页 |
| 4.3.6 血管新生相关基因的变化 | 第103-104页 |
| 4.3.7 EMT相关基因的变化 | 第104页 |
| 4.4 本章小结 | 第104-106页 |
| 5 三维动态血脑屏障的仿生构建及相关研究 | 第106-126页 |
| 5.1 引言 | 第106-108页 |
| 5.2 实验部分 | 第108-115页 |
| 5.2.1 仪器与试剂 | 第108-111页 |
| 5.2.2 三维动态血脑屏障模型的构建 | 第111页 |
| 5.2.3 三维动态血脑屏障模型的表征与功能评价 | 第111-113页 |
| 5.2.4 肿瘤细胞跨血脑屏障行为考察 | 第113页 |
| 5.2.5 肿瘤细胞跨血脑屏障的药物评价 | 第113-115页 |
| 5.2.6 血脑屏障功能及肿瘤转移机制的初步研究 | 第115页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第115-125页 |
| 5.3.1 高通量血脑屏障模型结构图 | 第116页 |
| 5.3.2 屏障功能性蛋白的表征 | 第116-117页 |
| 5.3.3 血脑屏障模型的分子渗透性表征 | 第117-119页 |
| 5.3.4 跨膜电阻TEER的测量表征屏障功能 | 第119页 |
| 5.3.5 外源性肿瘤脑转移过程模拟 | 第119-121页 |
| 5.3.6 脑胶质瘤脑内转移 | 第121页 |
| 5.3.7 抗肿瘤药物评价 | 第121-124页 |
| 5.3.8 星形胶质细胞与肿瘤细胞共培养 | 第124-125页 |
| 5.4 本章小结 | 第125-126页 |
| 6 结论与展望 | 第126-128页 |
| 6.1 结论 | 第126页 |
| 6.2 创新点 | 第126-127页 |
| 6.3 展望 | 第127-128页 |
| 参考文献 | 第128-145页 |
| 附录A 重复性数据和图表 | 第145-148页 |
| 附录B 论文所述溶液和试剂的配制 | 第148-151页 |
| 附录C 文中所用缩略语 | 第151-154页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第154-156页 |
| 致谢 | 第156-157页 |
| 作者简介 | 第157页 |
