致谢 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
1 昆虫病原真菌抗逆生物学研究现状 | 第11-23页 |
·影响生防真菌制剂应用效果的环境胁迫 | 第11-16页 |
·真菌过氧化氢酶的研究现状 | 第16-19页 |
·丝状真菌基因工程研究方法 | 第19-21页 |
·展望 | 第21-23页 |
2 球孢白僵菌过氧化氢酶基因(BbcatA)的克隆 | 第23-29页 |
·材料 | 第23页 |
·菌株和载体 | 第23页 |
·试剂 | 第23页 |
·方法 | 第23-26页 |
·DNA提取 | 第23-24页 |
·RNA提取及反转录 | 第24页 |
·BbcatA基因克隆和分析 | 第24-26页 |
·结果 | 第26-28页 |
·BbcatA基因序列及编码蛋白的结构分析 | 第26-27页 |
·BbcatA蛋白的聚类分析 | 第27-28页 |
·讨论 | 第28-29页 |
3 球孢白僵菌BbcatA基因的表达调控 | 第29-32页 |
·材料 | 第29页 |
·菌株和载体 | 第29页 |
·试剂 | 第29页 |
·方法 | 第29-30页 |
·胁迫条件下BbcatA的表达调控分析 | 第29-30页 |
·生长发育阶段BbcatA的表达调控分析 | 第30页 |
·结果 | 第30页 |
·讨论 | 第30-32页 |
4 BbcatA基因敲除及突变子筛选鉴定 | 第32-37页 |
·材料 | 第32页 |
·菌株和载体 | 第32页 |
·试剂 | 第32页 |
·方法 | 第32-34页 |
·重组载体的构建 | 第32页 |
·根癌农杆菌感受态制备 | 第32-33页 |
·重组载体电击转化 | 第33页 |
·根癌农杆菌的培养及处理 | 第33页 |
·球孢白僵菌孢子悬液的制备 | 第33页 |
·农杆菌介导的真菌转化 | 第33-34页 |
·同源重组转化子PCR筛选及验证 | 第34页 |
·重组转化子DNA的Sourhern杂交验证 | 第34页 |
·结果与讨论 | 第34-37页 |
5 BbcatA敲除株的表型分析 | 第37-43页 |
·材料 | 第37页 |
·菌株及试剂 | 第37页 |
·方法 | 第37-39页 |
·蛋白提取物的制备及检测 | 第37-38页 |
·ΔBbcatA的表型测定 | 第38-39页 |
·数据处理及分析 | 第39页 |
·结果 | 第39-41页 |
·CAT体外酶活分析 | 第39-40页 |
·ABbcatA的抗逆性状变化 | 第40-41页 |
·ΔBbcatA的侵染毒力变化 | 第41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
6 结语 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
Summary | 第48-49页 |