| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-28页 |
| ·高等植物启动子研究概述 | 第11-21页 |
| ·启动子结构 | 第11-13页 |
| ·启动子的分类 | 第13-19页 |
| ·启动子的克隆方法 | 第19-20页 |
| ·启动子的研究方法 | 第20-21页 |
| ·常用报告基因类型及主要特点 | 第21-25页 |
| ·gus作为报告基因的主要特点 | 第22-24页 |
| ·绿色荧光蛋白(GFP)基因 | 第24页 |
| ·荧光素酶(Luc)基因 | 第24-25页 |
| ·人工启动子研究进展 | 第25-27页 |
| ·本文研究背景及目的意义 | 第27-28页 |
| ·本文研究背景 | 第27页 |
| ·本研究的目的意义 | 第27-28页 |
| 2 材料方法 | 第28-41页 |
| ·突变型和野生型tls启动子的RT-PCR半定量分析 | 第28-31页 |
| ·材料及主要试剂 | 第28页 |
| ·处理方法 | 第28页 |
| ·总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第29页 |
| ·tls基因表达的半定量分析 | 第29-31页 |
| ·tls基因启动子克隆及其5’端缺失表达载体的构建 | 第31-34页 |
| ·质粒载体菌株及主要试剂 | 第31页 |
| ·tls全长启动子的克隆 | 第31页 |
| ·目的基因片段回收及纯化 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及热激转化 | 第32-33页 |
| ·质粒的提取 | 第33-34页 |
| ·水稻遗传转化 | 第34-37页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·农杆菌EHA105感受态细胞制备及表达载体转化 | 第34-35页 |
| ·愈伤组织诱导 | 第35-36页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第36-37页 |
| ·阳性植株的鉴定及纯系筛选 | 第37-38页 |
| ·CTAB法小量抽提基因组DNA | 第37页 |
| ·PCR反应体系及程序 | 第37-38页 |
| ·启动子活性分析 | 第38-41页 |
| ·GUS组织化学染色 | 第38页 |
| ·GUS活性的荧光定量检测 | 第38-41页 |
| 3 结果分析 | 第41-69页 |
| ·tls启动子的分段克隆及分子特征分析 | 第41-59页 |
| ·tls启动子5'端MAR序列的克隆 | 第41页 |
| ·片段1(F1)的克隆 | 第41页 |
| ·片段3(F3)的克隆 | 第41-42页 |
| ·片段2(F2)的克隆 | 第42页 |
| ·tls启动子的分子特征分析 | 第42-59页 |
| ·tls启动子与GUS基因重组表达载体的构建 | 第59-61页 |
| ·pGUS载体构建 | 第60页 |
| ·tls启动子缺失表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·内源tls启动子的RT-PCR半定量表达分析 | 第61-63页 |
| ·野生型和突变型tls的基础表达分析 | 第61-62页 |
| ·高低温胁迫后的应答反应 | 第62页 |
| ·盐和干旱胁迫后的应答反应 | 第62-63页 |
| ·外源重组型tls启动子的表达分析 | 第63-69页 |
| ·GUS荧光定量分析 | 第63-67页 |
| ·GUS组织化学染色分析 | 第67-69页 |
| 4 结论与讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 作者简历 | 第76-77页 |
| 附录 本文所使用的培养基及前文未尽试剂配方 | 第77-81页 |