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MiR-29a和miR-142-3p促进髓系分化的基因调控网络研究

中文摘要第1-7页
Abstract第7-9页
前言第9-12页
材料与方法第12-24页
 一、材料与方法第12-17页
  1. 工具酶及分子量Marker第12页
  2. 主要生化试剂第12页
  3. 培养基、血清及添加剂第12页
  4. 试剂盒第12-13页
  5. 菌株第13页
  6. 质粒第13-14页
  7. 细胞系第14页
  8. 引物第14-16页
  9. 生物信息学分析软件第16-17页
  10. 主要仪器及设备第17页
 二、实验方法第17-24页
  1. 细胞学实验第17-18页
   ·细胞系的培养及诱导分化第17页
   ·HL-60细胞的转染第17页
   ·细胞诱导向粒系或单核-巨噬细胞分化的检测第17-18页
  2. Real-time PCR第18-19页
   ·TRIZOI法提取细胞总RNA第18页
   ·RNA质量的检测第18页
   ·M-MLV合成cDNA第一链第18-19页
   ·Real-time PCR第19页
  3. miRNA real-time PCR第19-20页
   ·miRNA的cDNA第一链的合成第19-20页
   ·miRNA的Real-time PCR检测第20页
  4. 基因表达谱分析第20-21页
   ·基因表达模式相似性分析第20页
   ·表达模式相似基因的GO及基因功能相关性分析第20-21页
  5. 靶基因预测第21页
  6. 双萤光报告实验第21-24页
   ·靶基因3'UTR萤光报告载体的构建第21-22页
   ·质粒DNA的大量制备及纯化第22-23页
   ·双萤光报告实验第23-24页
结果第24-47页
 1. miR-29a和miR-142-3p基因结构第24-25页
 2. HL-60细胞经诱导向髓系分化第25-27页
   ·PMA诱导HL-60细胞向单核细胞分化第25-26页
   ·ATRA诱导HL-60细胞向粒细胞分化第26-27页
 3. HL-60细胞内过表达miR-29a/miR-142-3p第27-28页
 4. 过表达miRNAs/髓系诱导的HL-60细胞与对照细胞的mRNA表达芯片分析第28-29页
   ·实验流程第28页
   ·数据分析第28-29页
 5. 过表达miR-29a/miR-142-3p及PMA/ATRA诱导分化后基因表达模式分析第29-30页
 6. GO与基因功能相关性分析第30-44页
   ·对miR-29a/miR-142-3p过表达与PMA/ATRA诱导髓系分化过程中表达模式相似的基因进行聚类分析第30-34页
   ·GO分析和基因功能相关性分析第34-44页
     ·miR-142-3p过表达与ATRA诱导粒系分化过程中表达上调的基因第34-35页
     ·miR-142-3p过表达与PMA诱导单核细胞分化过程中表达上调的基因第35-36页
     ·miR-29a过表达与ATRA诱导粒系分化过程中表达上调的基因第36-37页
     ·miR-29a过表达与PMA诱导单核细胞分化过程中表达上调的基因第37-39页
     ·miR-142-3p过表达与ATRA诱导粒系分化过程中表达下调的基因第39-40页
     ·miR-29a过表达与ATRA诱导粒系分化过程中表达下调的基因第40-42页
     ·miR-29a过表达与PMA诱导单核细胞分化过程中表达下调的基因第42-44页
 7. 靶基因预测与双荧光报告基因验证第44-47页
   ·靶基因预测第44-46页
   ·双荧光报告基因验证第46-47页
讨论第47-52页
参考文献第52-58页
文献综述第58-76页
 参考文献(References)第73-76页
攻读硕士期间发表和待发表的文章及参加的学术会议第76-77页
致谢第77-80页

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