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猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)诱导白介素-12(IL-12)产生的分子机制研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
缩略词表第12-14页
第一章 前言第14-36页
   ·猪繁殖与呼吸综合征第14-16页
     ·发现与分布第14-15页
     ·临床症状第15-16页
     ·传播与防控第16页
   ·猪繁殖与呼吸综合征病毒第16-23页
     ·PRRSV的基因组结构第17-18页
     ·PRRSV的生活周期第18-20页
     ·PRRSV病毒的进化第20页
     ·PRRSV引起的固有免疫应答第20-21页
     ·PRRSV引起的体液免疫应答第21-22页
     ·PRRSV引起的细胞免疫应答第22-23页
   ·白介素-12(IL-12)第23-31页
     ·IL-12及其受体第24-25页
     ·IL-12信号通路第25-26页
     ·IL-12的表达和调控第26-27页
     ·IL-12的启动子研究第27-28页
     ·IL-12的生物学功能第28-31页
   ·MAPK信号途径第31-35页
     ·ERK1/2第32-33页
     ·p38 MAPK第33-34页
     ·JNK第34-35页
   ·NF-KB信号途径第35页
   ·研究目的和意义第35-36页
第二章 材料与方法第36-54页
   ·主要实验仪器第36页
   ·实验材料第36-40页
     ·实验动物、细胞与病毒第36-37页
     ·实验试剂第37-39页
     ·试剂配置第39-40页
   ·实验方法第40-54页
     ·猪IL-12p40基因5’末端序列测定第40页
     ·Genome Walking第40-43页
     ·猪IL-12p40启动子和突变重组质粒构建第43-44页
     ·去内毒素质粒提取第44页
     ·传代细胞的复苏与培养第44-46页
     ·PAM细胞分离与培养第46页
     ·PRRSV的繁殖与滴度测定第46-47页
     ·间接免疫荧光第47页
     ·质粒转染第47-48页
     ·双荧光素酶检测第48页
     ·实时荧光定量PCR第48-50页
     ·Western blot检测第50-51页
     ·ELISA检测第51-53页
     ·统计分析第53-54页
第三章 实验结果与分析第54-73页
   ·猪IL-12P40基因与启动子的克隆分析第54-62页
     ·猪IL-12p40基因的5’末端序列和上游的启动子序列存在缺失第54-56页
     ·猪IL-12p40基因5’末端序列的克隆第56-57页
     ·猪IL-12p40启动子的克隆和分析第57-59页
     ·猪IL-12p40启动子的活性确定第59-60页
     ·猪IL-12p40启动子元件功能的分析第60-62页
   ·高致病性PRRSV通过JNK-AP-1和NF-KB信号途径上调IL-12P40的表达第62-67页
     ·PRRSV可以在体外条件下诱导IL-12p40的表达第62-63页
     ·HP-PRRSV感染可以诱导IL-12p40的体内表达第63-65页
     ·HP-PRRSV通过MAPK p38、JNK和NF-κB信号途径诱导IL-12p40的表达第65-66页
     ·HP-PRRSV通过JNK-AP-1信号途径诱导IL-12p40的表达第66-67页
   ·PRRSV诱导IL-12P35表达的初步研究第67-73页
     ·PRRSV可以在体外条件下诱导IL-12p35的表达第67-68页
     ·HP-PRRSV体内感染可以诱导IL-12p35的表达第68-69页
     ·HP-PRRSV通过MAPK p38和PKC信号途径诱导IL-12p35的表达第69-70页
     ·PRRSV病毒蛋白不影响IL-12p35的表达第70-71页
     ·PRRSV对IL-12p35表达的诱导能力明显低于PRV和SeV第71-73页
第四章 总结与讨论第73-77页
   ·猪IL-12P40已有基因序列不完整第73页
   ·猪IL-12P40启动子的激活需要NF-KB、C/EBP-B、AP-1和ISRE转录调控元件的参与第73-74页
   ·HP-PRRSV可以通过JNK-AP-1和NF-KB信号通路上调IL-12P40的表达第74-75页
   ·PRRSV对IL-12P35的诱导依赖于MAPK P38和PKC信号途径第75-77页
第五章 结论与展望第77-78页
附录第78-86页
参考文献第86-101页
致谢第101-102页
个人简介第102页

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