摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
缩略词表 | 第12-14页 |
第一章 前言 | 第14-36页 |
·猪繁殖与呼吸综合征 | 第14-16页 |
·发现与分布 | 第14-15页 |
·临床症状 | 第15-16页 |
·传播与防控 | 第16页 |
·猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第16-23页 |
·PRRSV的基因组结构 | 第17-18页 |
·PRRSV的生活周期 | 第18-20页 |
·PRRSV病毒的进化 | 第20页 |
·PRRSV引起的固有免疫应答 | 第20-21页 |
·PRRSV引起的体液免疫应答 | 第21-22页 |
·PRRSV引起的细胞免疫应答 | 第22-23页 |
·白介素-12(IL-12) | 第23-31页 |
·IL-12及其受体 | 第24-25页 |
·IL-12信号通路 | 第25-26页 |
·IL-12的表达和调控 | 第26-27页 |
·IL-12的启动子研究 | 第27-28页 |
·IL-12的生物学功能 | 第28-31页 |
·MAPK信号途径 | 第31-35页 |
·ERK1/2 | 第32-33页 |
·p38 MAPK | 第33-34页 |
·JNK | 第34-35页 |
·NF-KB信号途径 | 第35页 |
·研究目的和意义 | 第35-36页 |
第二章 材料与方法 | 第36-54页 |
·主要实验仪器 | 第36页 |
·实验材料 | 第36-40页 |
·实验动物、细胞与病毒 | 第36-37页 |
·实验试剂 | 第37-39页 |
·试剂配置 | 第39-40页 |
·实验方法 | 第40-54页 |
·猪IL-12p40基因5’末端序列测定 | 第40页 |
·Genome Walking | 第40-43页 |
·猪IL-12p40启动子和突变重组质粒构建 | 第43-44页 |
·去内毒素质粒提取 | 第44页 |
·传代细胞的复苏与培养 | 第44-46页 |
·PAM细胞分离与培养 | 第46页 |
·PRRSV的繁殖与滴度测定 | 第46-47页 |
·间接免疫荧光 | 第47页 |
·质粒转染 | 第47-48页 |
·双荧光素酶检测 | 第48页 |
·实时荧光定量PCR | 第48-50页 |
·Western blot检测 | 第50-51页 |
·ELISA检测 | 第51-53页 |
·统计分析 | 第53-54页 |
第三章 实验结果与分析 | 第54-73页 |
·猪IL-12P40基因与启动子的克隆分析 | 第54-62页 |
·猪IL-12p40基因的5’末端序列和上游的启动子序列存在缺失 | 第54-56页 |
·猪IL-12p40基因5’末端序列的克隆 | 第56-57页 |
·猪IL-12p40启动子的克隆和分析 | 第57-59页 |
·猪IL-12p40启动子的活性确定 | 第59-60页 |
·猪IL-12p40启动子元件功能的分析 | 第60-62页 |
·高致病性PRRSV通过JNK-AP-1和NF-KB信号途径上调IL-12P40的表达 | 第62-67页 |
·PRRSV可以在体外条件下诱导IL-12p40的表达 | 第62-63页 |
·HP-PRRSV感染可以诱导IL-12p40的体内表达 | 第63-65页 |
·HP-PRRSV通过MAPK p38、JNK和NF-κB信号途径诱导IL-12p40的表达 | 第65-66页 |
·HP-PRRSV通过JNK-AP-1信号途径诱导IL-12p40的表达 | 第66-67页 |
·PRRSV诱导IL-12P35表达的初步研究 | 第67-73页 |
·PRRSV可以在体外条件下诱导IL-12p35的表达 | 第67-68页 |
·HP-PRRSV体内感染可以诱导IL-12p35的表达 | 第68-69页 |
·HP-PRRSV通过MAPK p38和PKC信号途径诱导IL-12p35的表达 | 第69-70页 |
·PRRSV病毒蛋白不影响IL-12p35的表达 | 第70-71页 |
·PRRSV对IL-12p35表达的诱导能力明显低于PRV和SeV | 第71-73页 |
第四章 总结与讨论 | 第73-77页 |
·猪IL-12P40已有基因序列不完整 | 第73页 |
·猪IL-12P40启动子的激活需要NF-KB、C/EBP-B、AP-1和ISRE转录调控元件的参与 | 第73-74页 |
·HP-PRRSV可以通过JNK-AP-1和NF-KB信号通路上调IL-12P40的表达 | 第74-75页 |
·PRRSV对IL-12P35的诱导依赖于MAPK P38和PKC信号途径 | 第75-77页 |
第五章 结论与展望 | 第77-78页 |
附录 | 第78-86页 |
参考文献 | 第86-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
个人简介 | 第102页 |