摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-27页 |
·解旋酶概述 | 第11-12页 |
·解旋酶家族的分类 | 第12-14页 |
·解旋酶解旋机制及模型 | 第14-16页 |
·Pif解旋酶家族研究进展 | 第16-18页 |
·G4-DNA概述 | 第18-21页 |
·G4-DNA特点 | 第18-21页 |
·G4-DNA解旋酶特点 | 第21页 |
·解旋酶解旋作用研究方法 | 第21-25页 |
·足迹法 | 第22页 |
·电泳迁移率-凝胶阻滞实验 | 第22-23页 |
·动态光散射实验 | 第23页 |
·荧光各向异性分析 | 第23页 |
·快速停留荧光检测技术 | 第23-24页 |
·单分子技术 | 第24-25页 |
·研究目的及意义 | 第25-27页 |
第二章 AnaPif1解旋酶表达载体的构建及蛋白表达纯化 | 第27-37页 |
·材料、仪器 | 第27-29页 |
·质粒、菌种及试剂 | 第27页 |
·配制主要溶液 | 第27-29页 |
·主要仪器设备 | 第29页 |
·方法 | 第29-34页 |
·PCR扩增AnaPif1、sumo基因片段 | 第29-31页 |
·表达载体pET15b-sumo-AnaPif1的构建 | 第31-33页 |
·AnaPif1蛋白的表达纯化 | 第33-34页 |
·结果 | 第34-36页 |
·载体构建以及蛋白表达纯化 | 第34-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
第三章 AnaPif1解旋酶活性分析 | 第37-47页 |
·材料与方法 | 第37-38页 |
·材料 | 第37页 |
·解旋研究所用试剂 | 第37-38页 |
·AnaPif1解旋研究所用仪器 | 第38页 |
·方法 | 第38-40页 |
·荧光底物的制备 | 第38-39页 |
·AnaPif1解旋酶体外最佳解旋条件测定 | 第39-40页 |
·结果 | 第40-45页 |
·反应条件对AnaPif1解旋酶解旋活性影响的分析 | 第40-43页 |
·AnaPif1解旋酶可以利用不同核苷三磷酸作为能量供体 | 第43-44页 |
·AnaPif1解旋酶解旋底物偏好性分析 | 第44-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
第四章 动态光散射分析嗜热菌AnaPif1寡聚状态 | 第47-50页 |
·材料、试剂 | 第47页 |
·材料 | 第47页 |
·所用试剂 | 第47页 |
·实验所用仪器设备 | 第47页 |
·方法 | 第47-48页 |
·结果 | 第48-49页 |
·讨论 | 第49-50页 |
第五章结论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
缩略词 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |