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嗜热菌Anaerobaculum hydrogeniformans Pif1解旋酶的表达纯化及活性分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 文献综述第11-27页
   ·解旋酶概述第11-12页
   ·解旋酶家族的分类第12-14页
   ·解旋酶解旋机制及模型第14-16页
   ·Pif解旋酶家族研究进展第16-18页
   ·G4-DNA概述第18-21页
     ·G4-DNA特点第18-21页
     ·G4-DNA解旋酶特点第21页
   ·解旋酶解旋作用研究方法第21-25页
     ·足迹法第22页
     ·电泳迁移率-凝胶阻滞实验第22-23页
     ·动态光散射实验第23页
     ·荧光各向异性分析第23页
     ·快速停留荧光检测技术第23-24页
     ·单分子技术第24-25页
   ·研究目的及意义第25-27页
第二章 AnaPif1解旋酶表达载体的构建及蛋白表达纯化第27-37页
   ·材料、仪器第27-29页
     ·质粒、菌种及试剂第27页
     ·配制主要溶液第27-29页
     ·主要仪器设备第29页
   ·方法第29-34页
     ·PCR扩增AnaPif1、sumo基因片段第29-31页
     ·表达载体pET15b-sumo-AnaPif1的构建第31-33页
     ·AnaPif1蛋白的表达纯化第33-34页
   ·结果第34-36页
     ·载体构建以及蛋白表达纯化第34-36页
   ·讨论第36-37页
第三章 AnaPif1解旋酶活性分析第37-47页
   ·材料与方法第37-38页
     ·材料第37页
     ·解旋研究所用试剂第37-38页
     ·AnaPif1解旋研究所用仪器第38页
   ·方法第38-40页
     ·荧光底物的制备第38-39页
     ·AnaPif1解旋酶体外最佳解旋条件测定第39-40页
   ·结果第40-45页
     ·反应条件对AnaPif1解旋酶解旋活性影响的分析第40-43页
     ·AnaPif1解旋酶可以利用不同核苷三磷酸作为能量供体第43-44页
     ·AnaPif1解旋酶解旋底物偏好性分析第44-45页
   ·讨论第45-47页
第四章 动态光散射分析嗜热菌AnaPif1寡聚状态第47-50页
   ·材料、试剂第47页
     ·材料第47页
     ·所用试剂第47页
     ·实验所用仪器设备第47页
   ·方法第47-48页
   ·结果第48-49页
   ·讨论第49-50页
第五章结论第50-52页
参考文献第52-58页
缩略词第58-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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