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真菌溶磷相关基因的克隆与功能分析

摘要第1-5页
Abstract第5-11页
英文缩略表第11-12页
第一章 引言第12-26页
   ·我国的磷矿资源第12页
     ·我国的磷矿资源与特点第12页
   ·土壤中的磷素及其作用第12-14页
     ·土壤中的磷素的形态第12-13页
     ·磷的作用第13-14页
   ·磷肥的转化与有效性第14页
   ·溶磷微生物的研究进展第14-17页
   ·溶磷微生物溶磷机理的研究第17-19页
   ·溶磷相关基因的克隆与功能分析第19-21页
   ·转基因技术在农业生产中的研究进展第21-24页
   ·研究目的、意义及研究内容第24-25页
     ·研究目的和意义第24页
     ·研究内容第24-25页
   ·技术路线第25-26页
第二章 材料与方法第26-47页
   ·实验材料第26-31页
     ·土壤样品第26页
     ·试验用土壤与作物种子第26页
     ·磷源第26页
     ·所用菌株、质粒和引物第26-29页
     ·培养基第29-30页
     ·试剂及缓冲液第30-31页
     ·主要仪器第31页
   ·实验方法第31-47页
     ·溶磷真菌的筛选第31页
     ·溶磷真菌的鉴定第31-32页
     ·溶磷菌液体培养条件下溶磷效果研究第32页
     ·溶磷菌溶磷条件研究第32-33页
     ·液体条件下溶磷菌分泌有机酸测定第33页
     ·液体条件下溶磷菌分泌吲哚乙酸测定第33-34页
     ·溶磷菌温室盆栽环境下溶磷、促生效果研究第34页
     ·溶磷菌田间溶磷、促生效果研究第34-35页
     ·溶磷菌土壤定殖能力测定第35页
     ·溶磷菌土壤环境下分泌有机酸测定第35页
     ·溶磷真菌P93对土壤微生物群落的影响第35-37页
     ·溶磷真菌P93λ噬菌体cDNA文库的构建第37-41页
     ·溶磷相关基因的筛选与生物信息学分析第41页
     ·真菌体内溶磷相关基因psf-Y功能分析第41-43页
     ·psf-Y基因植物表达载体的构建及拟南芥表达第43-47页
第三章 溶磷真菌的分离与筛选第47-53页
   ·结果与讨论第47-52页
     ·溶磷真菌的筛选第47页
     ·溶磷真菌在平板中的溶磷效果第47-49页
     ·菌株的ITS rRNA基因序列分析第49页
     ·菌株的形态观察第49-52页
   ·结论第52-53页
第四章 溶磷真菌溶磷效果研究第53-63页
   ·结果与讨论第53-61页
     ·溶磷菌对难溶磷酸盐及磷矿粉的测定第53-56页
     ·碳源对溶磷菌溶磷效果的影响第56页
     ·氮源对溶磷菌溶磷效果的影响第56-57页
     ·温度对溶磷菌溶磷效果的影响第57页
     ·磷矿粉的量对溶磷效果的影响测定第57-58页
     ·高效液相色谱法测定有机酸浓度第58-61页
   ·结论第61-63页
第五章 溶磷真菌土壤溶磷、促生效果及生态效应研究第63-76页
   ·结果与讨论第63-74页
     ·盆栽条件下溶磷菌对玉米生长的影响第63页
     ·盆栽条件下溶磷菌对土壤有效磷的影响第63-64页
     ·盆栽条件下溶磷菌植株全磷的影响第64页
     ·盆栽条件下溶磷菌土壤定殖能力第64-66页
     ·溶磷菌对土壤有机酸浓度的影响第66-67页
     ·小区试验中溶磷菌剂对玉米促生和产量的影响第67-69页
     ·小区试验中溶磷菌剂对玉米和土壤磷素的影响第69-70页
     ·溶磷菌剂对玉米根际土壤微生物群落结构和多样性的影响第70-74页
   ·小结第74-76页
第六章 菌株P93 CDNA文库构建及溶磷相关基因的筛选第76-86页
   ·结果与讨论第76-85页
     ·溶磷真菌P93 cDNA文库的构建第76-77页
     ·溶磷相关基因的筛选和生物信息学分析第77-82页
     ·携带基因psf-Y克隆子对溶液pH值以及可溶磷的影响第82-83页
     ·携带基因psf-Y克隆子有机酸分泌情况测定第83-85页
   ·结论第85-86页
第七章 溶磷相关基因PSF-Y的功能分析第86-100页
   ·结果与讨论第86-98页
     ·psf-Y基因沉默质粒pSi-psf::hyg的构建第86-87页
     ·棘孢曲霉P93原生质体的制备第87-88页
     ·PEG转化棘孢曲霉P93原生质体第88-89页
     ·野生型菌株与转化菌株形态学观察和溶磷能力第89-92页
     ·拟南芥根特异启动子和磷转运蛋白基因的克隆第92页
     ·表达载体的构建第92-94页
     ·pC-pyk-psf转化拟南芥及分子检测第94-95页
     ·转基因拟南芥种植试验第95-98页
   ·结论第98-100页
第八章 全文结论第100-103页
参考文献第103-120页
附录第120-123页
致谢第123-124页
作者简历第124页

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