| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Summary | 第7-9页 |
| 主要缩略词 | 第9-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-43页 |
| 1 链霉菌简介 | 第14-15页 |
| 2 类化合物（polyketides）的生物合成 | 第15-28页 |
| ·聚酮化合物和脂肪酸的生物合成 | 第15-17页 |
| ·聚酮合酶的分类 | 第17页 |
| ·Ⅰ 型聚酮合酶 | 第17-22页 |
| ·Ⅱ 型聚酮合酶 | 第22-26页 |
| ·Ⅲ 型聚酮合酶 | 第26-28页 |
| 3 大环内酯类抗生素（macrolides antibiotics） | 第28-36页 |
| ·阿维菌素 | 第28-33页 |
| ·泰乐菌素(Tylosin) | 第33-36页 |
| 4 抗生素生产菌株的基因改造 | 第36-37页 |
| 5 吉他霉素 | 第37-43页 |
| ·吉他霉素的化学结构 | 第37-38页 |
| ·吉他霉素的生物学活性 | 第38-41页 |
| ·吉他霉素的作用机制 | 第41页 |
| ·吉他霉素的生物合成研究 | 第41-43页 |
| 第二章 吉他霉素生物合成基因簇的克隆和分析 | 第43-94页 |
| 1 引言 | 第43页 |
| 2 实验材料 | 第43-47页 |
| ·菌株 | 第43-44页 |
| ·质粒 | 第44页 |
| ·培养基和化学试剂 | 第44-46页 |
| ·本实验所用的 PCR 引物 | 第46-47页 |
| 3 实验方法 | 第47-53页 |
| ·菌种培养及菌种保藏 | 第47页 |
| ·链霉菌总 DNA 的少量快速提取 | 第47-48页 |
| ·克隆基因簇探针的获取 | 第48-49页 |
| ·PCR 扩增 | 第48页 |
| ·DNA 片段回收 | 第48-49页 |
| ·PCR 产物和载体连接与转化 | 第49页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第49页 |
| ·大肠杆菌质粒 DNA 的小量提取[108] | 第49页 |
| ·大肠杆菌质粒 DNA 的少量快速提取及检测（快检） | 第49页 |
| ·北里链霉菌基因组文库的构建 | 第49-52页 |
| ·北里链霉菌总 DNA 的大量制备 | 第49-50页 |
| ·链轮丝菌总 DNA 的部分酶解和大片段 DNA 的回收 | 第50页 |
| ·柯斯质粒载体 | 第50-51页 |
| ·柯斯质粒的连接、包装和转染 | 第51页 |
| ·北里链霉菌基因组文库的保存 | 第51-52页 |
| ·用 PCR 方法筛选北里链霉菌基因组文库中吉他霉素生物合成基因簇 | 第52页 |
| ·DNA 序列的测定和分析 | 第52-53页 |
| 4 结果与讨论 | 第53-93页 |
| ·克隆探针的获取 | 第53-56页 |
| ·北里霉素的基因组文库的 PCR 筛选和序列测定 | 第56页 |
| ·吉他霉素生物合成基因簇的序列分析 | 第56-90页 |
| ·吉他霉素生物合成基因簇的各个开放阅读框功能分析 | 第61-90页 |
| ·吉他霉素生物合成途径的推导 | 第90-92页 |
| ·Mycarose 和 mycaminose 的生物合成及其链接 | 第90-91页 |
| ·甲氧基丙二酸酰基载体蛋白的生物合成 | 第91-92页 |
| ·I 型聚酮合酶合成聚酮糖苷部分 | 第92页 |
| ·吉他霉素生物基因簇中的调节基因 | 第92-93页 |
| 5 本章小结 | 第93-94页 |
| 第三章 吉他霉素工业菌株的基因工程改造 | 第94-107页 |
| 1 引言 | 第94页 |
| 2 材料与方法 | 第94-96页 |
| ·菌株 | 第94-95页 |
| ·质粒 | 第95页 |
| ·大肠杆菌和北里链霉菌之间的结合转移 | 第95-96页 |
| ·北里链霉菌的发酵培养与吉他霉素的生物测定 | 第96页 |
| 3 结果与讨论 | 第96-106页 |
| ·增加正调节基因拷贝提高吉他霉素发酵水平 | 第96-98页 |
| ·包含 kitK 和 kitL 的质粒构建 | 第96-98页 |
| ·含有多拷贝 kitK 和 kitL 的北里链霉菌工程菌株 | 第98页 |
| ·克隆血红蛋白基因(Vgb) | 第98-100页 |
| ·克隆 S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因 metK 和全局性调节基因 adpA | 第100-101页 |
| ·北里链霉菌基因工程菌株的吉他霉素生产效价和传代稳定性 | 第101-106页 |
| 4. 本章小结 | 第106-107页 |
| 第四章 总结和展望 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-114页 |
| 致谢 | 第114页 |
