摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-24页 |
第一章 绪论 | 第24-39页 |
·引言 | 第24-26页 |
·研究背景 | 第24-25页 |
·研究目的和意义 | 第25-26页 |
·项目来源与经费支持 | 第26页 |
·国内外研究现状与评述 | 第26-37页 |
·植物成花研究 | 第26-29页 |
·植物成花调控研究 | 第29-30页 |
·遗传转化体系研究进展 | 第30-31页 |
·油茶栽培和育种相关研究 | 第31-35页 |
·油茶花发育相关研究 | 第35-37页 |
·研究目标和主要研究内容 | 第37-38页 |
·研究目标 | 第37页 |
·研究内容 | 第37-38页 |
·技术路线 | 第38-39页 |
第二章 普通油茶花芽分化过程春梢生理变化研究 | 第39-56页 |
·材料与方法 | 第39-40页 |
·试验地介绍 | 第39页 |
·试验材料 | 第39-40页 |
·采样方法 | 第40页 |
·测定指标及方法 | 第40页 |
·数据统计和分析 | 第40页 |
·结果与分析 | 第40-52页 |
·花芽分化过程春梢生长变化 | 第40-41页 |
·花芽分化过程春梢不同部位器官氮碳化合物含量变化 | 第41-44页 |
·花芽分化过程春梢的不同部位器官内源激素含量变化 | 第44-48页 |
·花芽分化过程春梢不同部位器官中激素含量对比分析 | 第48-52页 |
·小结 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-56页 |
·春梢生长变化 | 第53页 |
·春梢中可溶性蛋白和碳水化合物含量变化 | 第53-54页 |
·春梢中内源激素含量变化 | 第54-56页 |
第三章 普通油茶花器官形成过程春梢生理变化 | 第56-71页 |
·材料与方法 | 第56-57页 |
·试验材料 | 第56页 |
·采样方法 | 第56-57页 |
·测定指标及方法 | 第57页 |
·数据统计和分析 | 第57页 |
·结果与分析 | 第57-68页 |
·花芽发育过程形态变化 | 第57-58页 |
·花芽在不同发育时期相关生理指标变化 | 第58-61页 |
·花器官发育期内源激素含量变化 | 第61-65页 |
·花器官发育期各种内源激素动态平衡分析 | 第65-68页 |
·小结 | 第68-69页 |
·讨论 | 第69-71页 |
·花芽发育过程形态变化 | 第69页 |
·春梢中可溶性蛋白和碳水化合物含量变化 | 第69-70页 |
·春梢中内源激素含量变化 | 第70-71页 |
第四章 主要环境因子对普通油茶成花影响 | 第71-90页 |
·材料与方法 | 第71-75页 |
·试验材料 | 第71页 |
·试验方法 | 第71-72页 |
·采样方法和测定指标 | 第72页 |
·RNA 提取 | 第72-73页 |
·RNA 质量鉴定 | 第73页 |
·cDNA 第一链合成 | 第73-74页 |
·qRT-PCR 反应 | 第74-75页 |
·结果与分析 | 第75-86页 |
·花芽分化期不同器官碳氮化合物含量差异比较 | 第75-78页 |
·花芽分化期不同器官植物内源激素含量和不同激素间对比变化 | 第78-83页 |
·花芽分化期春梢茎尖花发育相关基因表达 | 第83-84页 |
·花芽发育进程的影响 | 第84-85页 |
·环境因素对成花的影响 | 第85-86页 |
·小结 | 第86-87页 |
·讨论 | 第87-90页 |
·环境因素对普通油茶花芽分化的影响 | 第87-88页 |
·成花相关基因与油茶成花的关系 | 第88-89页 |
·环境因素对普通油茶花发育的影响 | 第89-90页 |
第五章 油茶花芽发育转录组测序与花发育基因表达分析 | 第90-104页 |
·材料与方法 | 第90-93页 |
·试验材料与试剂 | 第90页 |
·采样方法 | 第90-91页 |
·RNA 提取 | 第91页 |
·转录组上机测序样品的制备 | 第91页 |
·qRT-PCR | 第91-92页 |
·转录组测序数据处理与分析 | 第92-93页 |
·结果与分析 | 第93-101页 |
·转录组分析 | 第93-99页 |
·成花相关基因在花芽分化过程表达分析 | 第99-100页 |
·成花相关基因在花器官形成过程表达分析 | 第100-101页 |
·小结 | 第101页 |
·讨论 | 第101-104页 |
·转录组测序分析 | 第101-102页 |
·成花相关基因表达分析 | 第102页 |
·普通油茶成花途径及成花关键基因分析 | 第102-104页 |
第六章 油茶花发育过程数字表达谱测序和分析 | 第104-137页 |
·试验材料与方法 | 第105-106页 |
·试验材料 | 第105页 |
·采样和 RNA 提取方法 | 第105页 |
·上机测序前准备和方法 | 第105页 |
·生物信息学分析 | 第105-106页 |
·结果与分析 | 第106-135页 |
·表达谱测序 | 第106-112页 |
·差异表达基因分析 | 第112-113页 |
·差异表达基因生物信息学分析 | 第113-130页 |
·影响成花可能代谢途经 unigene 数量分析 | 第130-131页 |
·花芽分化期淀粉和蔗糖代谢 Kegg pathway 及相关 Unigene 表达量分析 | 第131-133页 |
·花器官形成相关 unigenes 表达 | 第133-134页 |
·普通油茶成花过程基因表达模式 | 第134-135页 |
·小结 | 第135页 |
·讨论 | 第135-137页 |
·数字表达谱测序 | 第135-136页 |
·生物信息学分析 | 第136页 |
·成花途径预测 | 第136-137页 |
第七章 花发育相关基因 FT、PI 克隆及遗传转载体构建 | 第137-156页 |
·材料、试剂与设备 | 第137-139页 |
·材料 | 第137-138页 |
·试剂 | 第138页 |
·仪器设备 | 第138-139页 |
·实验方法 | 第139-145页 |
·LB 培养基制备 | 第139页 |
·引物设计 | 第139-140页 |
·总 RNA 提取和鉴定 | 第140页 |
·cDNA 第一链合成 | 第140页 |
·普通油茶 FT 和 PI 基因分离 | 第140页 |
·电泳检测 | 第140页 |
·目的片段的回收 | 第140-141页 |
·目的片段与 pMD18-T 载体连接 | 第141-142页 |
·菌落 PCR 检测 | 第142页 |
·质粒 DNA 提取 | 第142-143页 |
·同源性分析及聚类分析 | 第143页 |
·生物信息学分析 | 第143页 |
·Gateway 方法载体构建流程 | 第143-145页 |
·农杆菌感受态制备 | 第145页 |
·农杆菌电击转化 | 第145页 |
·结果与分析 | 第145-153页 |
·转录组测序中 FT 和 PI 基因获得 | 第145-146页 |
·FT 和 PI 基因转录组测序和扩增片段测序结果对比 | 第146-147页 |
·FT 基因结构及同源性分析 | 第147-150页 |
·PI 氨基酸序列同源性和聚类分析 | 第150-152页 |
·载体构建检测 | 第152-153页 |
·小结 | 第153-154页 |
·讨论 | 第154-156页 |
·普通油茶花发育分子调控 | 第154页 |
·目的基因选择 | 第154-155页 |
·遗传转化体系构建 | 第155-156页 |
第八章 普通油茶体胚再生体系初步建立 | 第156-176页 |
·材料与方法 | 第157-159页 |
·试验材料与试剂 | 第157页 |
·采样地点和时间 | 第157页 |
·试验设计 | 第157-158页 |
·数据处理 | 第158-159页 |
·结果与分析 | 第159-172页 |
·不同 pH 对普通油茶幼胚愈伤组织诱导影响 | 第159页 |
·不同培养基与激素配比对幼胚愈伤组织诱导影响 | 第159-161页 |
·2.4-D、KT 与添加物配比对幼胚愈伤组织诱导影响 | 第161-163页 |
·2.4-D、KT、TDZ 和添加物配比对幼胚愈伤组织诱导影响 | 第163-164页 |
·四种激素配比试验对幼胚愈伤组织诱导影响 | 第164-166页 |
·六种激素试验配比对愈伤组织诱导影响 | 第166-167页 |
·愈伤组织继代培养与植株的再生 | 第167-169页 |
·不同类型外植体和愈伤组织特点 | 第169-172页 |
·小结 | 第172-173页 |
·讨论 | 第173-176页 |
·培养基 | 第173-174页 |
·植物激素 | 第174-175页 |
·外植体类型 | 第175页 |
·添加物 | 第175-176页 |
第九章 普通油茶体胚再生体系优化及外植体的发育特性 | 第176-189页 |
·试验材料与方法 | 第176-178页 |
·试验材料及采样方法 | 第176页 |
·试验设计 | 第176-177页 |
·调查及测定指标 | 第177页 |
·数据分析 | 第177-178页 |
·结果与分析 | 第178-185页 |
·合子胚果形指标变化 | 第178页 |
·合子胚生理指标变化 | 第178-180页 |
·长林 53 号油茶体胚诱导 | 第180-183页 |
·体胚萌发及生长培养基优化 | 第183-185页 |
·小结 | 第185-186页 |
·讨论 | 第186-189页 |
·外植体发育状况对体胚诱导影响 | 第186页 |
·外植体中碳氮化合物含量对体胚诱导影响 | 第186-187页 |
·外植体内源激素水平对体胚诱导影响 | 第187页 |
·胚状体萌发及生长的相关影响因素 | 第187-189页 |
第十章 农杆菌介导 FT 和 PI 基因遗传转化过程条件优化 | 第189-199页 |
·试验材料与方法 | 第189-191页 |
·试验材料 | 第189页 |
·试验仪器和试剂 | 第189页 |
·根癌农杆菌的活化与外植体的侵染 | 第189-190页 |
·试验方法 | 第190-191页 |
·数据分析 | 第191页 |
·结果与分析 | 第191-196页 |
·抗生素筛选 | 第191-192页 |
·在遗传转化过程中不同因素对抗性愈伤组织获得率影响 | 第192-194页 |
·遗传转化过程中不同因素对愈伤组织农杆菌污染影响 | 第194-196页 |
·选择培养及植株再生 | 第196页 |
·小结 | 第196-197页 |
·讨论 | 第197-199页 |
·抗生素筛选 | 第197页 |
·提高转化率 | 第197页 |
·污染控制 | 第197-198页 |
·选择培养及植株再生 | 第198-199页 |
第十一章 结论与讨论 | 第199-209页 |
·结论 | 第199-205页 |
·普通油茶花芽分化过程春梢生长和生理生化变化 | 第199页 |
·普通油茶花器官形成过程生理生化变化 | 第199-200页 |
·环境因素对普通油茶成花影响 | 第200-201页 |
·普通油茶转录组测序和花发育相关基因表达 | 第201页 |
·花器官形成过程数字表达谱测序和生物信息学分析 | 第201-202页 |
·花发育相关基因分析和植物表达载体构建 | 第202页 |
·普通油茶体胚再生体系初步构建 | 第202-203页 |
·普通油茶体胚再生体系优化 | 第203-204页 |
·农杆菌介导 FT 和 PI 基因遗传转化过程条件优化 | 第204-205页 |
·讨论 | 第205-206页 |
·普通油茶花发育过程的生理生化变化 | 第205页 |
·环境因素对植物成花影响 | 第205-206页 |
·油茶成花发育过程的分子机制及花发育关键基因 | 第206页 |
·普通油茶花发育的分子水平调控 | 第206页 |
·展望 | 第206-209页 |
参考文献 | 第209-228页 |
附录 | 第228-231页 |
在读期间的学术研究 | 第231-232页 |
致谢 | 第232页 |