| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 前言 | 第13-18页 |
| 第一章 ALCAT1在甲状腺激素诱导心室重构的病理作用 | 第18-47页 |
| 1. 研究背景 | 第18-20页 |
| 2. 材料和方法 | 第20-26页 |
| ·试剂和设备 | 第20-21页 |
| ·ALCAT1基因敲除鼠的饲养 | 第21页 |
| ·ALCAT1基因型的分析 | 第21-22页 |
| ·甲状腺激素诱导心肌肥厚模型的建立 | 第22页 |
| ·超声心动图检查 | 第22页 |
| ·实时荧光定量PCR分析 | 第22-24页 |
| ·心肌组织脂质过氧化分析 | 第24-25页 |
| ·HE染色和Masson's trichrome染色 | 第25页 |
| ·数据处理和统计学分析 | 第25-26页 |
| 3. 结果 | 第26-43页 |
| ·小鼠ALCAT1基因型的分析结果 | 第26页 |
| ·ALCAT1敲除对小鼠体重和甲状腺素脱碘酶的影响 | 第26-27页 |
| ·甲状腺激素处理对心室组织中ALCAT1表达水平的影响 | 第27-28页 |
| ·心室组织中氧化应激和脂质过氧化度分析 | 第28-29页 |
| ·心室重量,厚度和心肌功能分析 | 第29-31页 |
| ·小鼠心脏的形态学和心肌细胞的面积分析 | 第31-32页 |
| ·RNA提取质量和心肌肥厚生物标记物的测定 | 第32-34页 |
| ·小鼠心肌纤维化程度考察 | 第34-36页 |
| ·ALCAT1的敲除对心室组织中线粒体超微结构和线粒体自噬的影响 | 第36-40页 |
| ·甲状腺激素对WT和ALCAT1敲除小鼠心肌的AKT信号通路影响 | 第40-43页 |
| 4. 讨论 | 第43-46页 |
| 5. 结论 | 第46-47页 |
| 第二章 ALCAT1影响心肌肥厚进程的分子及信号机制 | 第47-84页 |
| 1. 研究背景 | 第47-50页 |
| 2. 材料和方法 | 第50-61页 |
| ·试剂和设备 | 第50页 |
| ·细胞的培养,冻存和复苏 | 第50-51页 |
| ·稳定细胞株筛选 | 第51页 |
| ·MEF细胞的分离和培养 | 第51-52页 |
| ·细胞株增值和分化 | 第52页 |
| ·细胞容积比较 | 第52页 |
| ·细胞线粒体氧自由基的测定 | 第52页 |
| ·细胞脂质过氧化的测定 | 第52-53页 |
| ·细胞mtDNA的测定 | 第53-54页 |
| ·共聚焦显微镜分析骨架蛋白和线粒体的碎片化 | 第54页 |
| ·电子显微镜分析线粒体的形态 | 第54-55页 |
| ·Western blot实验方法 | 第55-57页 |
| ·Western blot分析条件 | 第57-58页 |
| ·ALCAT1对VDAC表达水平的调控 | 第58页 |
| ·ALCAT1高表达对氧化应激诱导的自噬信号调控 | 第58-59页 |
| ·MEF生长曲线和生物标志物衰老相关β-半乳糖苷酶的分析 | 第59-60页 |
| ·ALCAT1对H9C2胰岛素抵抗的调控 | 第60页 |
| ·ALCAT1对甲状腺激素诱导AKT通路激活的调控 | 第60页 |
| ·T4长期和短期诱导后心肌组织中的AKT信号通路 | 第60页 |
| ·数据处理和统计学分析 | 第60-61页 |
| 3. 结果 | 第61-79页 |
| ·稳定细胞株筛选结果 | 第61页 |
| ·ALCAT1提高了H9C2的增值速度 | 第61页 |
| ·ALCAT1对H9C2分化能力和形态学影响 | 第61-62页 |
| ·ALCAT1对细胞容积影响 | 第62-63页 |
| ·ALCAT1增加了线粒体的氧自由基产生 | 第63-64页 |
| ·ALCAT1增加了氧化应激诱导的脂质过氧化度 | 第64-65页 |
| ·ALCAT1增加了mtDNA的氧化损伤 | 第65页 |
| ·ALCAT1高表达对线粒体网络结构的影响 | 第65-67页 |
| ·ALCAT1的敲除减轻了线粒体的氧化损伤 | 第67-71页 |
| ·ALCAT1对自噬体系的调控 | 第71-72页 |
| ·ALCAT1对自噬体系的调控 | 第72-73页 |
| ·ALCAT1对细胞衰老的调控 | 第73-74页 |
| ·ALCAT1对细胞骨架蛋白的影响 | 第74-75页 |
| ·ALCAT1诱导心肌细胞的胰岛素抵抗 | 第75-76页 |
| ·ALCAT1对甲状腺激素诱导AKT通路激活的抑制 | 第76-79页 |
| 4. 讨论 | 第79-83页 |
| 5. 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-92页 |
| 综述 | 第92-106页 |
| 参考文献 | 第98-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 攻读博士学位期间主要研究成果 | 第107页 |
