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禾谷丝核菌转录组中糖类活性酶基因组成和表达分析研究

目录第1-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
文献综述第11-35页
 1 小麦纹枯病的研究进展第11-16页
   ·小麦纹枯病的分布和危害第11页
   ·病原菌第11-14页
     ·病原菌种类第11-12页
     ·病原菌的形态学及生物学特性第12-14页
   ·病原菌生活史及引起的症状第14页
   ·小麦纹枯病的发生规律以及影响因素第14-15页
   ·小麦纹枯病的预防及防治措施第15-16页
     ·化学防治第15页
     ·农业防治第15页
     ·生物防治第15-16页
     ·选育抗病品种第16页
 2 植物病原真菌致病相关基因的研究第16-20页
   ·致病相关基因第16-17页
   ·糖类活性酶(carbohydrate-active enzymes,CAZymes)的研究第17-20页
     ·糖类活性酶组成及其功能第18-20页
 3 转录组学研究进展第20-25页
   ·转录组的测序技术第20-21页
     ·第一代测序技术第20页
     ·第二代测序技术第20-21页
     ·第三代测序技术第21页
   ·转录组研究方法及丝核菌转录组的研究现状第21-25页
     ·转录组研究方法第21-24页
     ·丝核菌转录组的研究第24-25页
 4 本研究的目的和意义第25-26页
 参考文献第26-35页
第一章 禾谷丝核菌转录组中糖类活性酶的组成分析第35-49页
 摘要第35页
 前言第35-36页
 1 材料和方法第36-40页
   ·试验材料第36-37页
     ·试验供试菌株和小麦品种第36页
     ·主要试剂第36-37页
   ·试验方法第37-40页
     ·提取植物细胞壁CW第37页
     ·供试菌株培养第37页
     ·总RNA提取第37-39页
     ·转录组测序及组装及分析第39页
     ·禾谷丝核菌转录组中CAZymes的组成第39页
     ·禾谷丝核菌的CAZymes和其他菌的比较第39-40页
 2 结果与分析第40-45页
   ·禾谷丝核菌R0301菌株总RNA的质量和浓度第40页
   ·转录组测序概况第40页
   ·禾谷丝核菌转录组中糖类活性酶基因的组成第40-45页
 3 讨论第45-46页
 参考文献第46-49页
第二章 禾谷丝核菌糖类活性酶基因的表达分析及RT-qPCR验证第49-63页
 摘要第49页
 前言第49-50页
 1 材料和方法第50-53页
   ·试验材料第50页
     ·供试菌株及小麦品种第50页
     ·主要试剂第50页
   ·试验方法第50-53页
     ·荧光定量PCR引物设计第50-51页
     ·侵染试验第51页
     ·提取总RNA第51页
     ·建立数字化基因表达谱第51-52页
     ·反转录第52页
     ·荧光定量PCR第52-53页
 2 结果与分析第53-60页
   ·荧光定量PCR引物第53页
   ·侵染试验第53-54页
   ·提取样品的总RNA第54-56页
   ·禾谷丝核菌表达谱中差异表达基因分析第56页
   ·表达谱中参与降解植物细胞壁的酶类基因的表达第56-58页
   ·RT-qPCR验证部分酶类基因在不同侵染阶段的表达第58-60页
 3 讨论第60-61页
 参考文献第61-63页
第三章 禾谷丝核菌木聚糖酶基因的克隆第63-75页
 摘要第63页
 前言第63-64页
 1 材料和方法第64-68页
   ·试验材料第64-65页
     ·试验供试菌株第64页
     ·主要试剂第64-65页
   ·试验方法第65-68页
     ·RACE克隆基因全长第65-68页
     ·分析基因序列第68页
 2 结果与分析第68-72页
   ·RACE克隆基因并结合生物信息学分析第68-72页
 3 讨论第72-73页
 参考文献第73-75页
第四章 禾谷丝核菌原生质体的制备及遗传转化第75-89页
 摘要第75页
 前言第75-76页
 1 材料和方法第76-79页
   ·材料第76-77页
     ·供试菌株第76页
     ·主要试剂第76-77页
   ·试验方法第77-79页
     ·原生质体制备第77页
     ·原生质体的计数、核染色及再生第77-78页
     ·原生质体再生菌株致病力测定第78页
     ·菌株DNA的提取及AFLP差异分析第78页
     ·建立遗传转化体系第78-79页
 2 结果与分析第79-84页
   ·菌丝获得方法及细胞壁消解酶和渗透压稳定剂处理对原生质体制备的影响第79-81页
   ·原生质体核染色、萌发及再生第81-83页
   ·再生菌株的生长速率及致病力分析第83页
   ·对原生质体再生菌株的AFLP差异分析第83-84页
   ·遗传转化体系第84页
     ·选择转化子的潮霉素B浓度测定第84页
     ·遗传转化第84页
 3 讨论第84-87页
 参考文献第87-89页
全文总结第89-91页
 一、本文获得的主要结果第89页
 二、本文的主要创新点第89页
 三、尚待解决的问题第89-91页
攻读硕士期间发表的学术论文第91-93页
致谢第93页

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