| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| ·苏云金芽孢杆菌简介 | 第9-14页 |
| ·Cyt 蛋白 | 第9-11页 |
| ·Cyt 蛋白种类与特性 | 第9页 |
| ·Cyt 蛋白的结构 | 第9-10页 |
| ·Cyt 蛋白的作用机制 | 第10页 |
| ·Cyt 蛋白的研究进展 | 第10-11页 |
| ·Cry 蛋白 | 第11-14页 |
| ·Cry 蛋白简介 | 第11页 |
| ·Cry 蛋白的结构 | 第11-12页 |
| ·Cry 蛋白的作用机制 | 第12-13页 |
| ·Cry 蛋白的研究进展 | 第13-14页 |
| ·球形芽孢杆菌概述 | 第14-18页 |
| ·Bin 毒素 | 第14-16页 |
| ·Bin 毒素性质 | 第14页 |
| ·Bin 毒素作用机理 | 第14-15页 |
| ·Bin 毒素研究进展 | 第15-16页 |
| ·Mtx1 杀蚊毒蛋白 | 第16-18页 |
| ·Mtx1 杀蚊毒蛋白作用机理 | 第16页 |
| ·Mtx1 研究进展 | 第16-17页 |
| ·Mtx2 和 Mtx3 简介 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的意义 | 第18-20页 |
| 2 实验材料与方法 | 第20-34页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·菌株和载体 | 第20页 |
| ·供试蚊幼虫 | 第20页 |
| ·培养基和试剂 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第20页 |
| ·试剂 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-34页 |
| ·苏云金芽孢杆菌质粒的提取 | 第21-22页 |
| ·球形芽孢杆菌基因组的提取 | 第22-23页 |
| ·核酸琼脂糖凝胶电泳分析 | 第23页 |
| ·大肠杆菌（DH5α）感受态的制备 | 第23-24页 |
| ·目的基因的克隆 | 第24-25页 |
| ·目的基因引物设计 | 第24页 |
| ·高保真酶 PCR 扩增 | 第24-25页 |
| ·PCR 扩增产物的回收 | 第25-26页 |
| ·克隆载体的构建 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第27页 |
| ·克隆质粒的酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·测序 | 第28页 |
| ·Cry4Aa、Cry4Ba、Mtx1、Mtx2 、Mtx3 基因穿梭载体的构建 | 第28-29页 |
| ·Cry-BT 感受态细胞的制备 | 第29页 |
| ·表达菌的制备 | 第29页 |
| ·表达质粒的酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·表达菌的诱导表达 | 第30页 |
| ·表达蛋白的的 SDS-PAGE 检测 | 第30-32页 |
| ·准备工作 | 第30页 |
| ·配制凝胶 | 第30-31页 |
| ·5%浓缩胶的配置 | 第31页 |
| ·样品处理与加样 | 第31页 |
| ·电泳 | 第31页 |
| ·染色和脱色 | 第31-32页 |
| ·不同毒蛋白对蚊幼致死率测定 | 第32-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-50页 |
| ·目的基因的克隆与序列分析 | 第34-46页 |
| ·苏云金芽孢杆菌、球形芽孢杆菌 DNA 的提取 | 第34-35页 |
| ·目的基因的克隆及序列分析 | 第35-36页 |
| ·测序分析 | 第36-46页 |
| ·目的基因的原核表达 | 第46-48页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第46页 |
| ·原核表达载体的双酶切鉴定 | 第46-47页 |
| ·诱导目的蛋白表达 | 第47-48页 |
| ·不同毒蛋白对蚊幼致死率的测定 | 第48-50页 |
| 4 结论与讨论 | 第50-52页 |
| ·结论 | 第50页 |
| ·实验中出现的问题与分析 | 第50-51页 |
| ·克隆基因表达蛋白的功能性分析 | 第51页 |
| ·本实验下一步工作 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简历 | 第59页 |