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多环芳烃降解菌的遗传改造及石油污染土壤的微生物部分修复

目录第1-8页
摘要第8-9页
Abstract第9-11页
第一章 绪论第11-29页
   ·环境中的 PAHs第12-13页
     ·大气中的 PAHs第12-13页
     ·土壤中的 PAHs第13页
     ·水体中的 PAHs第13页
   ·微生物降解 PAHs 的研究进展第13-20页
     ·真菌对 PAHs 的降解第15-16页
     ·细菌对 PAHs 的降解第16-19页
     ·其他微生物对 PAHs 的降解第19页
     ·PAHs 的降解机制及影响因子第19-20页
   ·PAHs 降解酶的研究现状第20-23页
     ·PAHs 降解酶在 PAHs 降解中的作用第20-21页
     ·单加氧酶第21-22页
     ·双加氧酶第22页
     ·过氧化物酶及酪氨酸酶第22-23页
   ·PCR 技术第23-25页
     ·PCR 的基本原理第23-24页
     ·PCR 反应体系及反应程序第24页
     ·引物的设计第24-25页
   ·石油污染土壤的生物修复第25-26页
     ·石油污染土壤的危害第25页
     ·生物修复第25-26页
   ·本论文的研究背景、内容及意义第26-29页
第二章 实验方案设计与研究方法第29-43页
   ·材料第29-33页
     ·菌株与质粒第29页
     ·主要仪器与试剂第29-30页
     ·培养基第30-31页
     ·溶剂第31-33页
   ·研究方法第33-43页
     ·多食鞘氨醇杆菌 SWH-2 基因组的提取第33-34页
     ·环羟基化双加氧酶大亚基编码基因引物的设计第34页
     ·PCR 扩增第34-35页
     ·PCR 产物的回收及连接第35-36页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第36页
     ·PCR 产物的转化及蓝白斑筛选第36-37页
     ·质粒的提取——碱性 SDS 法第37页
     ·质粒的提取——试剂盒法第37-38页
     ·重组质粒的酶切鉴定第38页
     ·重组子的菌液 PCR 鉴定第38-39页
     ·三亲杂交及生长曲线的测定第39-40页
     ·气相色谱法测培养基中菲的含量第40页
     ·三角瓶中石油降解实验第40-41页
     ·菌剂的制作及生物修复石油污染土壤第41页
     ·索氏提取法测土壤中石油含量第41-43页
第三章 结果与分析第43-53页
   ·SWH-2 菌的遗传改造第43-49页
     ·细菌染色体 DNA 的提取第43页
     ·环羟基化双加氧酶大亚基的克隆第43-44页
     ·PCR 产物与 T 载体的连接,转化和筛选第44-47页
     ·自杀性质粒的构建,转化及筛选第47-48页
     ·三亲杂交及生长曲线第48-49页
   ·菌 SWH-21 及菌 SWH-2 对菲及石油的降解第49-50页
     ·菲的降解实验第49-50页
     ·石油的降解实验第50页
   ·菌 SWH-21 对石油污染土壤的修复第50-53页
第四章 讨论第53-55页
第五章 结论第55-57页
参考文献第57-65页
致谢第65-67页
附录第67页

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