中文摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-18页 |
目录 | 第18-20页 |
中英文缩略语 | 第20-21页 |
前言 | 第21-24页 |
1 人肝癌耐药细胞株SMMC-7721/ADM的建立及其与人肝癌细胞株SMMC-7721及人正常肝细胞株LO_2的miRNAs表达谱分析 | 第24-52页 |
·材料与方法 | 第24-39页 |
·细胞系 | 第24-25页 |
·主要试剂 | 第25-26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
·主要试剂配制 | 第27-29页 |
·方法 | 第29-39页 |
·统计分析 | 第39页 |
·结果 | 第39-48页 |
·ADM在SMMC-7721的48h IC50 | 第39-40页 |
·SMMC-7721与SMMC-7721/ADM的细胞形态描述 | 第40页 |
·SMMC-7721与SMMC-7721/ADM的生长曲线绘制 | 第40-41页 |
·ADM在SMMC-7721/ADM中的48h IC50测定 | 第41-42页 |
·SMMC-7721与SMMC-7721/ADM的MDR1基因蛋白检测 | 第42页 |
·RNA浓度测定及纯度测定 | 第42-43页 |
·甲醛变性琼脂糖凝胶电泳结果 | 第43页 |
·miRNA芯片筛选结果 | 第43-46页 |
·芯片结果验证 | 第46-48页 |
·讨论 | 第48-51页 |
·结论 | 第51-52页 |
2 miR-1246在肝癌耐药细胞株SMMC-7721/ADM的研究 | 第52-66页 |
·材料与方法 | 第52-58页 |
·细胞株 | 第52页 |
·主要试剂及仪器 | 第52-53页 |
·方法 | 第53-57页 |
·统计分析 | 第57-58页 |
·结果 | 第58-62页 |
·荧光显微镜下观察miRNA inhibitor的转染效率 | 第58页 |
·RT-PCR测定各细胞株miR-1246的相对含量 | 第58-59页 |
·细胞增殖实验 | 第59页 |
·转染miR-1246的SMMC-7721/ADM的48hIC50测定 | 第59-60页 |
·细胞周期实验 | 第60-61页 |
·细胞凋亡实验 | 第61页 |
·细胞迁移实验及细胞侵袭实验 | 第61-62页 |
·讨论 | 第62-65页 |
·结论 | 第65-66页 |
3 hsa-miR-1246的生物信息学分析及靶基因预测验证 | 第66-77页 |
·材料与方法 | 第66-69页 |
·细胞株 | 第66页 |
·主要试剂 | 第66-67页 |
·主要仪器 | 第67页 |
·生物信息学网站 | 第67-68页 |
·方法 | 第68-69页 |
·统计分析 | 第69页 |
·结果 | 第69-72页 |
·靶基因预测结果 | 第69-70页 |
·GO注释及KEGG富集信号通路 | 第70-71页 |
·靶基因确立 | 第71页 |
·Western-blotting验证 | 第71页 |
·RT-PCR 结果 | 第71-72页 |
·讨论 | 第72-76页 |
·结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-85页 |
综述 | 第85-103页 |
参考文献 | 第95-103页 |
攻读学位期间主要研究成果 | 第103-104页 |
致谢 | 第104页 |