中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-25页 |
·石斛属植物的研究概况 | 第8-11页 |
·石斛属种类、分布及形态特征 | 第8页 |
·石斛属植物化学成分及药理作用 | 第8-9页 |
·中药石斛的研究概况 | 第9-11页 |
·齿瓣石斛概况 | 第11-14页 |
·齿瓣石斛形态特征及分布 | 第11-13页 |
·齿瓣石斛的药用历史 | 第13页 |
·齿瓣石斛及紫皮枫斗的研究现状 | 第13-14页 |
·紫皮枫斗的市场状况 | 第14页 |
·植物中药材鉴别方法 | 第14-21页 |
·植物中药材鉴定方法的发展 | 第14-15页 |
·分子标记技术 | 第15-18页 |
·Real-time PCR技术 | 第18-21页 |
·可用于分子生物学鉴定技术的DNA片段 | 第21-24页 |
·常用于分子鉴别的cpDNA或mtDNA片段 | 第21-22页 |
·NrDNA ITS序列 | 第22-24页 |
·本课题的目的与意义 | 第24-25页 |
第二章 基于SYBR Green Ⅱ的real-time PCR技术鉴别齿瓣石斛药材及其混伪品 | 第25-45页 |
技术流程 | 第25页 |
·材料与方法 | 第25-35页 |
·样本采集与保存 | 第25-28页 |
·DNA提取 | 第28-29页 |
·NrDNA ITS序列的获得 | 第29-30页 |
·Clustal X、MEGA软件分析及齿瓣石斛nrDNA ITS区特异位点的获得 | 第30页 |
·基于SYBR Green Ⅱ的特异性鉴别引物的设计 | 第30-33页 |
·基于叶片提取所得DNA构建鉴别体系 | 第33-35页 |
·鉴别体系在紫皮枫斗鉴别中的应用 | 第35页 |
·结果 | 第35-42页 |
·基于新鲜叶片提取的基因组总DNA构建的鉴别体系 | 第35-40页 |
·SYBR Green Ⅱ real-time PCR鉴别体系鉴别石斛加工所得枫斗商品 | 第40-42页 |
·讨论 | 第42-45页 |
·Real-time PCR技术在动植物鉴别中的应用及其优点 | 第42页 |
·DNA鉴别片段的选择 | 第42-43页 |
·DNA的序列比对 | 第43页 |
·枫斗中多糖及酚类等物质对DNA提取及real-time PCR反应的影响 | 第43-45页 |
第三章 应用TaqMan探针real-time PCR技术鉴别齿瓣石斛药材 | 第45-53页 |
·材料与方法 | 第45-47页 |
·样本采集与保存 | 第45页 |
·DNA提取 | 第45页 |
·NrDNA ITS序列的获得 | 第45页 |
·Clustal X、MEGA软件分析及齿瓣石斛nrDNA ITS区特异位点的获得 | 第45页 |
·TaqMan探针及配套引物的设计 | 第45-46页 |
·基于新鲜叶片DNA的TaqMan probe鉴别体系的建立 | 第46-47页 |
·ITS通用引物预扩增富集ITS序列 | 第46页 |
·预扩增产物DNA样品纯化 | 第46页 |
·预扩增产物DNA浓度测定及稀释39 | 第46-47页 |
·TaqMan probe real-time PCR 标准曲线建立 | 第47页 |
·TaqMan probe real-time PCR 反应探针特异性检测 | 第47页 |
·TaqMan probe real-time PCR反应定量检测紫皮枫斗含量 | 第47页 |
·结果 | 第47-51页 |
·标准曲线 | 第47-49页 |
·TaqMan probe real-time PCR在新鲜叶片DNA样品中验证特异性 | 第49-50页 |
·TaqMan probe real-time PCR反应定量检测紫皮枫斗结果 | 第50-51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
第四章 基于SSR分子标记鉴定齿瓣石斛及紫皮枫斗 | 第53-60页 |
·材料与方法 | 第53-55页 |
·材料 | 第53页 |
·DNA提取 | 第53页 |
·SSR标记来源 | 第53页 |
·PCR反应及检测 | 第53-55页 |
·数据分析 | 第55页 |
·结果 | 第55-58页 |
·铁皮石斛SSR标记的通用性 | 第55-56页 |
·石斛物种的遗传多样性及遗传分化 | 第56页 |
·GENECLASS 2.0软件分析结果 | 第56-57页 |
·STURCTURE 2.2软件分析结果 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
第五章 结论与展望 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
附录A | 第68-70页 |
附录B | 第70-77页 |
在读期间发表的学术论文与研究进展 | 第77-78页 |
致谢 | 第78页 |