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Real-time PCR及SSR技术在齿瓣石斛药材鉴别中的应用

中文摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-25页
   ·石斛属植物的研究概况第8-11页
     ·石斛属种类、分布及形态特征第8页
     ·石斛属植物化学成分及药理作用第8-9页
     ·中药石斛的研究概况第9-11页
   ·齿瓣石斛概况第11-14页
     ·齿瓣石斛形态特征及分布第11-13页
     ·齿瓣石斛的药用历史第13页
     ·齿瓣石斛及紫皮枫斗的研究现状第13-14页
     ·紫皮枫斗的市场状况第14页
   ·植物中药材鉴别方法第14-21页
     ·植物中药材鉴定方法的发展第14-15页
     ·分子标记技术第15-18页
     ·Real-time PCR技术第18-21页
   ·可用于分子生物学鉴定技术的DNA片段第21-24页
     ·常用于分子鉴别的cpDNA或mtDNA片段第21-22页
     ·NrDNA ITS序列第22-24页
   ·本课题的目的与意义第24-25页
第二章 基于SYBR Green Ⅱ的real-time PCR技术鉴别齿瓣石斛药材及其混伪品第25-45页
 技术流程第25页
   ·材料与方法第25-35页
     ·样本采集与保存第25-28页
     ·DNA提取第28-29页
     ·NrDNA ITS序列的获得第29-30页
     ·Clustal X、MEGA软件分析及齿瓣石斛nrDNA ITS区特异位点的获得第30页
     ·基于SYBR Green Ⅱ的特异性鉴别引物的设计第30-33页
     ·基于叶片提取所得DNA构建鉴别体系第33-35页
     ·鉴别体系在紫皮枫斗鉴别中的应用第35页
   ·结果第35-42页
     ·基于新鲜叶片提取的基因组总DNA构建的鉴别体系第35-40页
     ·SYBR Green Ⅱ real-time PCR鉴别体系鉴别石斛加工所得枫斗商品第40-42页
   ·讨论第42-45页
     ·Real-time PCR技术在动植物鉴别中的应用及其优点第42页
     ·DNA鉴别片段的选择第42-43页
     ·DNA的序列比对第43页
     ·枫斗中多糖及酚类等物质对DNA提取及real-time PCR反应的影响第43-45页
第三章 应用TaqMan探针real-time PCR技术鉴别齿瓣石斛药材第45-53页
   ·材料与方法第45-47页
     ·样本采集与保存第45页
     ·DNA提取第45页
     ·NrDNA ITS序列的获得第45页
     ·Clustal X、MEGA软件分析及齿瓣石斛nrDNA ITS区特异位点的获得第45页
     ·TaqMan探针及配套引物的设计第45-46页
     ·基于新鲜叶片DNA的TaqMan probe鉴别体系的建立第46-47页
       ·ITS通用引物预扩增富集ITS序列第46页
       ·预扩增产物DNA样品纯化第46页
       ·预扩增产物DNA浓度测定及稀释39第46-47页
       ·TaqMan probe real-time PCR 标准曲线建立第47页
       ·TaqMan probe real-time PCR 反应探针特异性检测第47页
       ·TaqMan probe real-time PCR反应定量检测紫皮枫斗含量第47页
   ·结果第47-51页
     ·标准曲线第47-49页
     ·TaqMan probe real-time PCR在新鲜叶片DNA样品中验证特异性第49-50页
     ·TaqMan probe real-time PCR反应定量检测紫皮枫斗结果第50-51页
   ·讨论第51-53页
第四章 基于SSR分子标记鉴定齿瓣石斛及紫皮枫斗第53-60页
   ·材料与方法第53-55页
     ·材料第53页
     ·DNA提取第53页
     ·SSR标记来源第53页
     ·PCR反应及检测第53-55页
     ·数据分析第55页
   ·结果第55-58页
     ·铁皮石斛SSR标记的通用性第55-56页
     ·石斛物种的遗传多样性及遗传分化第56页
     ·GENECLASS 2.0软件分析结果第56-57页
     ·STURCTURE 2.2软件分析结果第57-58页
   ·讨论第58-60页
第五章 结论与展望第60-61页
参考文献第61-68页
附录A第68-70页
附录B第70-77页
在读期间发表的学术论文与研究进展第77-78页
致谢第78页

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