| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 中英文缩略词对照 | 第11-13页 |
| 第1章 引言 | 第13-17页 |
| 第2章 DHFR 表达质粒及干扰质粒的构建 | 第17-33页 |
| ·实验材料 | 第17-20页 |
| ·主要试剂与材料 | 第17-18页 |
| ·实验仪器 | 第18-19页 |
| ·主要溶液及试剂的配制 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-28页 |
| ·DHFR 表达载体的构建 | 第20-24页 |
| ·DHFR miR-RNAi 质粒的构建 | 第24-25页 |
| ·DHFR 表达质粒及干扰质粒的表达 | 第25-28页 |
| ·实验结果 | 第28-33页 |
| ·DHFR 基因的 PCR 扩增结果 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定结果 | 第29页 |
| ·重组质粒的测序结果 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的荧光表达 | 第30页 |
| ·重组质粒的蛋白表达结果 | 第30-33页 |
| 第3章 DHFR 与 SuFu 之间的相互作用 | 第33-41页 |
| ·实验材料 | 第33-36页 |
| ·主要试剂与材料 | 第33-34页 |
| ·实验仪器 | 第34-35页 |
| ·主要溶液及试剂的配制 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-39页 |
| ·酵母双杂交的验证 | 第36-37页 |
| ·谷胱甘肽-S-转移酶（GST）pull-down 实验 | 第37-39页 |
| ·实验结果 | 第39-41页 |
| ·酵母双杂交的结果 | 第39页 |
| ·GST pull-down 的结果 | 第39-41页 |
| 第4章 DHFR 对 Hedgehog 信号通路的影响 | 第41-53页 |
| ·实验材料 | 第41-43页 |
| ·主要试剂与材料 | 第41-42页 |
| ·实验仪器 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-46页 |
| ·DHFR 对 Hh 信号通路蛋白水平的影响 | 第43页 |
| ·DHFR 对 Hh 信号通路 mRNA 水平的影响 | 第43-45页 |
| ·报告基因荧光素酶活性检测 | 第45-46页 |
| ·MTT 法检测细胞活性 | 第46页 |
| ·实验结果 | 第46-53页 |
| ·DHFR 影响 Hh 信号通路的蛋白水平 | 第46-49页 |
| ·DHFR 影响 Hh 信号通路的 mRNA 水平 | 第49-51页 |
| ·DHFR 影响报告基因荧光素酶活性 | 第51-52页 |
| ·DHFR 影响细胞活性 | 第52-53页 |
| 第5章 讨论 | 第53-56页 |
| 第6章 结论 | 第56-57页 |
| 第7章 下一步工作计划及重点 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第63-64页 |
| 综述 | 第64-74页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
