摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-19页 |
·柞蚕免疫系统研究进展 | 第14-15页 |
·微孢子虫研究进展 | 第15-16页 |
·微孢子虫的生物学分类及寄生机制 | 第15页 |
·柞蚕微孢子虫的分类及侵染过程 | 第15-16页 |
·溶菌酶研究进展 | 第16-17页 |
·蛋白质的质谱分析技术 | 第17页 |
·蛋白质质谱分析技术概述 | 第17页 |
·液相色谱-质谱联用技术概述 | 第17页 |
·实时荧光定量PCR技术 | 第17-18页 |
·本课题研究的目的和意义 | 第18-19页 |
第二章 不同外源物诱导的柞蚕溶菌酶活力的测定 | 第19-26页 |
·材料与试剂 | 第19-20页 |
·试验材料 | 第19页 |
·试验试剂 | 第19页 |
·主要仪器 | 第19-20页 |
·方法 | 第20-22页 |
·柞蚕微孢子虫的提取 | 第20-21页 |
·材料的处理 | 第21页 |
·诱导后柞蚕蛹血淋巴溶菌酶抑菌活性的检测 | 第21-22页 |
·结果 | 第22-24页 |
·柞蚕微孢子虫纯化结果 | 第22页 |
·溶菌酶抑菌活性 | 第22-24页 |
·讨论 | 第24-26页 |
第三章 微孢子虫诱导柞蚕蛹血淋巴特异蛋白条带的质谱分析 | 第26-34页 |
·材料与试剂 | 第26-27页 |
·试验材料 | 第26页 |
·试验试剂 | 第26-27页 |
·主要仪器 | 第27页 |
·方法 | 第27-28页 |
·蛋白电泳上样液的制备 | 第27页 |
·柞蚕血淋巴蛋白质的SDS-PAGE电泳 | 第27-28页 |
·蛋白质胶条鉴定分析 | 第28页 |
·结果 | 第28-33页 |
·柞蚕蛹免疫血淋巴蛋白质SDS-PAGE电泳结果 | 第28-29页 |
·蛋白胶条质谱鉴定结果 | 第29-33页 |
·讨论 | 第33-34页 |
第四章 溶菌酶基因的克隆及序列分析 | 第34-47页 |
·材料与试剂 | 第34-35页 |
·试验材料 | 第34页 |
·试验试剂 | 第34-35页 |
·主要仪器 | 第35页 |
·方法 | 第35-42页 |
·柞蚕血淋巴的制备、总RNA的抽提及mRNA的纯化 | 第35-37页 |
·cDNA的合成 | 第37-38页 |
·柞蚕溶菌酶基因的克隆 | 第38-41页 |
·柞蚕溶菌酶基因的生物信息学分析 | 第41-42页 |
·结果 | 第42-46页 |
·血淋巴总RNA提取质量的检测 | 第42页 |
·克隆产物的检测 | 第42-43页 |
·溶菌酶基因的序列分析 | 第43-44页 |
·溶菌酶氨基酸序列同源性比对 | 第44-45页 |
·溶菌酶系统进化分析 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
第五章 实时荧光定量PCR技术检测不同外源物诱导的柞蚕溶菌酶基因的表达量 | 第47-55页 |
·试验材料与试剂 | 第47-48页 |
·试验材料 | 第47页 |
·试验试剂 | 第47页 |
·主要仪器 | 第47-48页 |
·试验方法 | 第48-50页 |
·柞蚕蛹的诱导及取样 | 第48页 |
·诱导后柞蚕蛹血淋巴总RNA的提取及检测 | 第48-49页 |
·实时荧光定量PCR引物的设计 | 第49页 |
·RT-PCR | 第49页 |
·柞蚕溶菌酶基因的转录表达分析 | 第49-50页 |
·结果与分析 | 第50-53页 |
·RNA完整度和纯度的检测 | 第50页 |
·RNA引物特异性分析及模板量的确定 | 第50-51页 |
·经不同外源物诱导后溶菌酶基因的表达量变化分析 | 第51-53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
第六章 结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
附录 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
攻读硕士学位期间发表文章 | 第62页 |