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铜绿假单胞菌PAO1 lasI、rhlI基因缺失菌株的构建及其对接合的影响

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
目录第10-12页
引言第12-14页
第一部分 载体及突变菌株构建第14-27页
   ·材料第14-15页
     ·菌株第14-15页
     ·主要培养基及抗生素第15页
     ·主要试剂第15页
     ·主要仪器第15页
   ·实验方法第15-24页
     ·构建同源重组载体第16-19页
       ·pGSM-△lasI载体(串联lasI基因上下游片段自杀性质粒的构建)第16-18页
       ·pGSM-Arhll载体(串联r/?7/基因上下游片段自杀性质粒的构建)第18-19页
     ·同源重组突变菌株的建立第19-20页
     ·实验具体操作方法第20-23页
     ·接合转移第23-24页
   ·结果第24-25页
     ·载体pGSM-ΔlasI,pGSM-ΔrhlI的鉴定第24页
     ·同源重组构建突变菌株第24-25页
   ·讨论第25-27页
第二部分 突变菌株的鉴定第27-38页
   ·材料第27-28页
     ·Southern Blot所用试剂及配制方法第27页
     ·HPLC/MS所需试剂及材料第27-28页
     ·HPLC/MS主要仪器第28页
   ·方法第28-31页
     ·PCR鉴定及基因测序第28页
     ·Souther Blot第28-29页
     ·HPLC-MS(高效液相色谱-串联质谱)检测HSL第29-31页
   ·结果第31-36页
     ·PCR及基因测序对突变菌株的鉴定第31-32页
       ·Southern blot鉴定突变株PA-ΔlasI第32-33页
     ·HPLC/MS检测第33-36页
   ·讨论第36-38页
第三部分 lasI与rhlI基因缺失对接合反应频率的影响第38-41页
   ·材料第38页
     ·菌株与质粒第38页
     ·试剂及仪器第38页
   ·方法第38-39页
     ·PA生长曲线第38页
     ·接合反应第38页
     ·统计方法第38-39页
   ·结果第39-40页
     ·PA01野生株及其lasI、rhlI基因单双缺失菌株的生长曲线第39页
     ·lasI与rhlI基因缺失对接合反应频率的影响第39-40页
   ·讨论第40-41页
结语第41-42页
参考文献第42-45页
综述第45-52页
 参考文献第49-52页
附录第52-54页
在校期间发表论文情况第54-55页
致谢第55页

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