摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
目录 | 第10-12页 |
引言 | 第12-14页 |
第一部分 载体及突变菌株构建 | 第14-27页 |
·材料 | 第14-15页 |
·菌株 | 第14-15页 |
·主要培养基及抗生素 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15页 |
·主要仪器 | 第15页 |
·实验方法 | 第15-24页 |
·构建同源重组载体 | 第16-19页 |
·pGSM-△lasI载体(串联lasI基因上下游片段自杀性质粒的构建) | 第16-18页 |
·pGSM-Arhll载体(串联r/?7/基因上下游片段自杀性质粒的构建) | 第18-19页 |
·同源重组突变菌株的建立 | 第19-20页 |
·实验具体操作方法 | 第20-23页 |
·接合转移 | 第23-24页 |
·结果 | 第24-25页 |
·载体pGSM-ΔlasI,pGSM-ΔrhlI的鉴定 | 第24页 |
·同源重组构建突变菌株 | 第24-25页 |
·讨论 | 第25-27页 |
第二部分 突变菌株的鉴定 | 第27-38页 |
·材料 | 第27-28页 |
·Southern Blot所用试剂及配制方法 | 第27页 |
·HPLC/MS所需试剂及材料 | 第27-28页 |
·HPLC/MS主要仪器 | 第28页 |
·方法 | 第28-31页 |
·PCR鉴定及基因测序 | 第28页 |
·Souther Blot | 第28-29页 |
·HPLC-MS(高效液相色谱-串联质谱)检测HSL | 第29-31页 |
·结果 | 第31-36页 |
·PCR及基因测序对突变菌株的鉴定 | 第31-32页 |
·Southern blot鉴定突变株PA-ΔlasI | 第32-33页 |
·HPLC/MS检测 | 第33-36页 |
·讨论 | 第36-38页 |
第三部分 lasI与rhlI基因缺失对接合反应频率的影响 | 第38-41页 |
·材料 | 第38页 |
·菌株与质粒 | 第38页 |
·试剂及仪器 | 第38页 |
·方法 | 第38-39页 |
·PA生长曲线 | 第38页 |
·接合反应 | 第38页 |
·统计方法 | 第38-39页 |
·结果 | 第39-40页 |
·PA01野生株及其lasI、rhlI基因单双缺失菌株的生长曲线 | 第39页 |
·lasI与rhlI基因缺失对接合反应频率的影响 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
结语 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-45页 |
综述 | 第45-52页 |
参考文献 | 第49-52页 |
附录 | 第52-54页 |
在校期间发表论文情况 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |