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抗Cyclin D1胞内抗体分子调控机制的蛋白质组学研究

内容提要第1-7页
第一章 引言第7-20页
   ·肿瘤与细胞周期第7页
   ·Cyclin D1第7-10页
     ·Cyclin D1 的发现及生物学特点第7-8页
     ·Cyclin D1 与细胞周期调控第8-9页
     ·Cyclin D1 与肿瘤治疗第9-10页
   ·胞内抗体第10-11页
     ·胞内抗体的产生和发展第10页
     ·胞内抗体与肿瘤基因治疗第10-11页
   ·蛋白质组学第11-18页
     ·蛋白质组学的形成第11-13页
     ·蛋白质组学技术的发展第13-16页
       ·蛋白质分离技术第13-14页
       ·染色技术第14页
       ·蛋白质鉴定技术第14-15页
       ·蛋白质组数据库第15页
       ·其他蛋白质组学技术第15-16页
     ·蛋白质组学技术的应用第16-18页
       ·阐明肿瘤的发病机制第16页
       ·筛选、鉴定肿瘤特异性标记物和特异性抗原第16-17页
       ·在药物作用机制及开发中的应用第17-18页
       ·了解细胞内信号转导通路第18页
   ·本论文立题目的及意义第18-20页
第二章 实验研究第20-36页
   ·实验材料第20-25页
     ·细胞系第20页
     ·主要试剂和仪器第20-21页
     ·实验试剂的配制第21-24页
     ·所用数据库第24-25页
   ·实验方法第25-36页
     ·稳定转染细胞系的培养第25页
     ·蛋白质样品制备第25-28页
       ·细胞全蛋白的提取第25-27页
       ·蛋白质含量的测定第27页
       ·样品的 SDS-PAGE 分析第27-28页
     ·蛋白质样品的双向电泳分析第28-31页
       ·IPG 胶条的水化第28页
       ·第一向等电聚焦(IEF)第28-29页
       ·IPG 胶条的平衡第29页
       ·第二向 SDS-PAGE 垂直电泳第29-30页
       ·银染显色第30页
       ·考染分析第30-31页
     ·双向电泳凝胶图像的软件分析第31-32页
       ·蛋白点检测(spot detection)第31页
       ·标准化凝胶(normalizing gels)第31-32页
       ·蛋白点的匹配(spot matching)第32页
       ·蛋白点的生物统计学分析第32页
     ·差异表达蛋白的质谱鉴定第32-36页
       ·质谱测试样品的制备第32-33页
       ·胰酶消化肽段混合物进行质谱检测第33页
       ·肽序列分析(MS-MS)第33-34页
       ·数据库查询第34-35页
       ·生物信息学分析第35-36页
第三章 实验结果与分析第36-49页
   ·不同方法提取蛋白样品质量分析第36-43页
     ·不同方法提取蛋白样品产率及产物状态第36页
     ·不同方法提取蛋白样品 SDS-PAGE 分析第36-38页
     ·不同方法提取蛋白样品双向电泳分析和方法优化第38-43页
   ·不同细胞系蛋白差异分析第43-49页
     ·稳定转染细胞系蛋白双向电泳分析第43-46页
     ·差异蛋白点的质谱鉴定第46-47页
     ·差异蛋白点的功能分类第47-49页
第四章 讨论第49-55页
   ·人癌症细胞蛋白双向电泳样品制备方法的优化第49-50页
   ·抗 Cyclin D1 胞内抗体稳定转染细胞与对照细胞差异蛋白的分析第50-55页
第五章 结论第55-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-69页
中文摘要第69-71页
Abstract第71-73页
英文缩写表第73页

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