内容提要 | 第1-7页 |
第一章 引言 | 第7-20页 |
·肿瘤与细胞周期 | 第7页 |
·Cyclin D1 | 第7-10页 |
·Cyclin D1 的发现及生物学特点 | 第7-8页 |
·Cyclin D1 与细胞周期调控 | 第8-9页 |
·Cyclin D1 与肿瘤治疗 | 第9-10页 |
·胞内抗体 | 第10-11页 |
·胞内抗体的产生和发展 | 第10页 |
·胞内抗体与肿瘤基因治疗 | 第10-11页 |
·蛋白质组学 | 第11-18页 |
·蛋白质组学的形成 | 第11-13页 |
·蛋白质组学技术的发展 | 第13-16页 |
·蛋白质分离技术 | 第13-14页 |
·染色技术 | 第14页 |
·蛋白质鉴定技术 | 第14-15页 |
·蛋白质组数据库 | 第15页 |
·其他蛋白质组学技术 | 第15-16页 |
·蛋白质组学技术的应用 | 第16-18页 |
·阐明肿瘤的发病机制 | 第16页 |
·筛选、鉴定肿瘤特异性标记物和特异性抗原 | 第16-17页 |
·在药物作用机制及开发中的应用 | 第17-18页 |
·了解细胞内信号转导通路 | 第18页 |
·本论文立题目的及意义 | 第18-20页 |
第二章 实验研究 | 第20-36页 |
·实验材料 | 第20-25页 |
·细胞系 | 第20页 |
·主要试剂和仪器 | 第20-21页 |
·实验试剂的配制 | 第21-24页 |
·所用数据库 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-36页 |
·稳定转染细胞系的培养 | 第25页 |
·蛋白质样品制备 | 第25-28页 |
·细胞全蛋白的提取 | 第25-27页 |
·蛋白质含量的测定 | 第27页 |
·样品的 SDS-PAGE 分析 | 第27-28页 |
·蛋白质样品的双向电泳分析 | 第28-31页 |
·IPG 胶条的水化 | 第28页 |
·第一向等电聚焦(IEF) | 第28-29页 |
·IPG 胶条的平衡 | 第29页 |
·第二向 SDS-PAGE 垂直电泳 | 第29-30页 |
·银染显色 | 第30页 |
·考染分析 | 第30-31页 |
·双向电泳凝胶图像的软件分析 | 第31-32页 |
·蛋白点检测(spot detection) | 第31页 |
·标准化凝胶(normalizing gels) | 第31-32页 |
·蛋白点的匹配(spot matching) | 第32页 |
·蛋白点的生物统计学分析 | 第32页 |
·差异表达蛋白的质谱鉴定 | 第32-36页 |
·质谱测试样品的制备 | 第32-33页 |
·胰酶消化肽段混合物进行质谱检测 | 第33页 |
·肽序列分析(MS-MS) | 第33-34页 |
·数据库查询 | 第34-35页 |
·生物信息学分析 | 第35-36页 |
第三章 实验结果与分析 | 第36-49页 |
·不同方法提取蛋白样品质量分析 | 第36-43页 |
·不同方法提取蛋白样品产率及产物状态 | 第36页 |
·不同方法提取蛋白样品 SDS-PAGE 分析 | 第36-38页 |
·不同方法提取蛋白样品双向电泳分析和方法优化 | 第38-43页 |
·不同细胞系蛋白差异分析 | 第43-49页 |
·稳定转染细胞系蛋白双向电泳分析 | 第43-46页 |
·差异蛋白点的质谱鉴定 | 第46-47页 |
·差异蛋白点的功能分类 | 第47-49页 |
第四章 讨论 | 第49-55页 |
·人癌症细胞蛋白双向电泳样品制备方法的优化 | 第49-50页 |
·抗 Cyclin D1 胞内抗体稳定转染细胞与对照细胞差异蛋白的分析 | 第50-55页 |
第五章 结论 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-69页 |
中文摘要 | 第69-71页 |
Abstract | 第71-73页 |
英文缩写表 | 第73页 |