中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
中英文对照 | 第12-14页 |
第1章 绪论 | 第14-23页 |
·肿瘤干细胞及生物学特性 | 第14-15页 |
·肿瘤干细胞 | 第14页 |
·肿瘤干细胞生物学特性 | 第14-15页 |
·肿瘤干细胞特异性标志物 | 第15-16页 |
·结肠癌干细胞及其标志物 | 第16-19页 |
·人参皂苷 Rg3 | 第19-22页 |
·人参皂苷 Rg3 促进肿瘤细胞凋亡 | 第20-21页 |
·人参皂苷 Rg3 抑制肿瘤细胞增殖 | 第21页 |
·人参皂苷 Rg3 抑制肿瘤细胞侵袭和转移 | 第21-22页 |
·实验设计思路 | 第22-23页 |
第2章 材料与试剂 | 第23-29页 |
·细胞株 | 第23页 |
·仪器 | 第23-24页 |
·试剂 | 第24-25页 |
·PCR | 第25页 |
·主要试剂配制 | 第25-29页 |
·磷酸盐缓冲液(PBS)配制 | 第25-26页 |
·McCoy’s 5A 培养液配制 | 第26页 |
·1640 培养液配制 | 第26页 |
·0.25%胰酶-EDTA 配制(10×) | 第26页 |
·磁珠分选用 Buffer 配制 | 第26-27页 |
·磁珠分选用 Dnase I 配制 | 第27页 |
·肿瘤干细胞培养液配制 | 第27-28页 |
·药物溶液的配制 | 第28页 |
·吖啶橙(AO) | 第28页 |
·溴化乙锭(EB) | 第28-29页 |
第3章 实验部分 | 第29-44页 |
·结肠癌干细胞的分离、培养及鉴定 | 第29-34页 |
·免疫磁珠法筛选 EpCAM~+CD44~+结肠癌干细胞 | 第29-30页 |
·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的培养 | 第30-31页 |
·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的鉴定 | 第31-34页 |
·软琼脂克隆形成实验 | 第31-32页 |
·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的诱导分化实验 | 第32页 |
·干细胞特异性基因表达的鉴定 | 第32-34页 |
·20(S)-Rg3 对结肠癌干细胞增殖的影响 | 第34-36页 |
·时效/量效关系曲线 | 第34-35页 |
·20(S)-Rg3 对细胞增殖的影响 | 第35-36页 |
·20(S)-Rg3 对成纤维细胞增殖的影响 | 第36页 |
·20(S)-Rg3 对结肠癌干细胞凋亡的影响 | 第36-39页 |
·吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染 | 第36-37页 |
·Annexin V-FITC-PI 双染色法 | 第37-38页 |
·DNA Ladder 检测 | 第38-39页 |
·20(S)-Rg3 诱导结肠癌干细胞凋亡机制的初步研究 | 第39-43页 |
·线粒体膜电位检测(JC-1) | 第39-40页 |
·Caspase 酶活性检测 | 第40-41页 |
·凋亡相关基因 Bcl-2 及 Bax mRNA 的检测 | 第41-43页 |
·数据统计 | 第43-44页 |
第4章 实验结果 | 第44-57页 |
·结肠癌干细胞的分离、培养及鉴定 | 第44-47页 |
·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的筛选 | 第44页 |
·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的培养 | 第44-45页 |
·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的鉴定 | 第45-47页 |
·软琼脂克隆形成实验 | 第45-46页 |
·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的诱导分化 | 第46页 |
·干细胞特异性基因表达的鉴定 | 第46-47页 |
·20(S)-Rg3 对 EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的增殖的影响 | 第47-50页 |
·时效/量效关系测定 | 第47-48页 |
·20(S)-Rg3 对细胞增殖的影响 | 第48-49页 |
·20(S)-Rg3 对成纤维细胞增殖的影响 | 第49-50页 |
·20(S)-Rg3 对结肠癌干细胞凋亡的影响 | 第50-53页 |
·吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染 | 第50页 |
·Annexin V-FITC-PI 双染色法 | 第50-52页 |
·DNA Ladder 检测 | 第52-53页 |
·20(S)-Rg3 诱导结肠癌干细胞凋亡机制的初步研究 | 第53-57页 |
·线粒体膜电位(JC-1)检测 | 第53-54页 |
·Caspase 酶活性检测 | 第54-55页 |
·凋亡相关基因 Bcl-2 及 Bax mRNA 的检测 | 第55-57页 |
第5章 结论 | 第57-58页 |
第6章 讨论 | 第58-61页 |
参考文献 | 第61-66页 |
攻读学位期间发表的学术论文及取得的科研成果 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |