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20(S)-人参皂苷Rg3诱导结肠癌干细胞凋亡及其机制的初步研究

中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
中英文对照第12-14页
第1章 绪论第14-23页
   ·肿瘤干细胞及生物学特性第14-15页
     ·肿瘤干细胞第14页
     ·肿瘤干细胞生物学特性第14-15页
   ·肿瘤干细胞特异性标志物第15-16页
   ·结肠癌干细胞及其标志物第16-19页
   ·人参皂苷 Rg3第19-22页
     ·人参皂苷 Rg3 促进肿瘤细胞凋亡第20-21页
     ·人参皂苷 Rg3 抑制肿瘤细胞增殖第21页
     ·人参皂苷 Rg3 抑制肿瘤细胞侵袭和转移第21-22页
   ·实验设计思路第22-23页
第2章 材料与试剂第23-29页
   ·细胞株第23页
   ·仪器第23-24页
   ·试剂第24-25页
   ·PCR第25页
   ·主要试剂配制第25-29页
     ·磷酸盐缓冲液(PBS)配制第25-26页
     ·McCoy’s 5A 培养液配制第26页
     ·1640 培养液配制第26页
     ·0.25%胰酶-EDTA 配制(10×)第26页
     ·磁珠分选用 Buffer 配制第26-27页
     ·磁珠分选用 Dnase I 配制第27页
     ·肿瘤干细胞培养液配制第27-28页
     ·药物溶液的配制第28页
     ·吖啶橙(AO)第28页
     ·溴化乙锭(EB)第28-29页
第3章 实验部分第29-44页
   ·结肠癌干细胞的分离、培养及鉴定第29-34页
     ·免疫磁珠法筛选 EpCAM~+CD44~+结肠癌干细胞第29-30页
     ·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的培养第30-31页
     ·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的鉴定第31-34页
       ·软琼脂克隆形成实验第31-32页
       ·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的诱导分化实验第32页
       ·干细胞特异性基因表达的鉴定第32-34页
   ·20(S)-Rg3 对结肠癌干细胞增殖的影响第34-36页
     ·时效/量效关系曲线第34-35页
     ·20(S)-Rg3 对细胞增殖的影响第35-36页
     ·20(S)-Rg3 对成纤维细胞增殖的影响第36页
   ·20(S)-Rg3 对结肠癌干细胞凋亡的影响第36-39页
     ·吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染第36-37页
     ·Annexin V-FITC-PI 双染色法第37-38页
     ·DNA Ladder 检测第38-39页
   ·20(S)-Rg3 诱导结肠癌干细胞凋亡机制的初步研究第39-43页
     ·线粒体膜电位检测(JC-1)第39-40页
     ·Caspase 酶活性检测第40-41页
     ·凋亡相关基因 Bcl-2 及 Bax mRNA 的检测第41-43页
   ·数据统计第43-44页
第4章 实验结果第44-57页
   ·结肠癌干细胞的分离、培养及鉴定第44-47页
     ·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的筛选第44页
     ·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的培养第44-45页
     ·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的鉴定第45-47页
       ·软琼脂克隆形成实验第45-46页
       ·EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的诱导分化第46页
       ·干细胞特异性基因表达的鉴定第46-47页
   ·20(S)-Rg3 对 EpCAM~+CD44~+HCT-116 细胞的增殖的影响第47-50页
     ·时效/量效关系测定第47-48页
     ·20(S)-Rg3 对细胞增殖的影响第48-49页
     ·20(S)-Rg3 对成纤维细胞增殖的影响第49-50页
   ·20(S)-Rg3 对结肠癌干细胞凋亡的影响第50-53页
     ·吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染第50页
     ·Annexin V-FITC-PI 双染色法第50-52页
     ·DNA Ladder 检测第52-53页
   ·20(S)-Rg3 诱导结肠癌干细胞凋亡机制的初步研究第53-57页
     ·线粒体膜电位(JC-1)检测第53-54页
     ·Caspase 酶活性检测第54-55页
     ·凋亡相关基因 Bcl-2 及 Bax mRNA 的检测第55-57页
第5章 结论第57-58页
第6章 讨论第58-61页
参考文献第61-66页
攻读学位期间发表的学术论文及取得的科研成果第66-67页
致谢第67页

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