蛇根木异胡豆苷糖苷酶及Vinorine合成酶表达、纯化、抑制剂抑制机理和复合物三维结构研究
| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩写表 | 第9-12页 |
| 20种常见氨基酸表 | 第12-17页 |
| 1 研究背景及立题依据 | 第17-32页 |
| ·蛇根木和阿吗灵药用研究背景 | 第18-19页 |
| ·阿吗灵生物合成途径 | 第19-22页 |
| ·SG的研究背景及立体依据 | 第22-27页 |
| ·VS的研究背景及立题依据 | 第27-31页 |
| 附 | 第31-32页 |
| 2 实验材料 | 第32-39页 |
| ·细菌菌株 | 第32页 |
| ·质粒载体 | 第32-34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·主要缓冲系统 | 第34-35页 |
| ·主要化学试剂 | 第35-36页 |
| ·生物试剂 | 第36-37页 |
| ·仪器 | 第37-39页 |
| 3 实验方法 | 第39-62页 |
| ·引物设计与合成 | 第39-40页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第40-41页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第41-42页 |
| ·VS蛋白基因PCR产物的TA克隆 | 第42-43页 |
| ·热击型感受态细胞的制备 | 第43页 |
| ·连接产物转化TOP10感受态细胞 | 第43-44页 |
| ·重组克隆的鉴定 | 第44-46页 |
| ·序列分析 | 第46页 |
| ·蛋白表达 | 第46-47页 |
| ·蛋白质的纯化和分析 | 第47-53页 |
| ·抑制常数的测定 | 第53-54页 |
| ·分析检测方法 | 第54页 |
| ·蛋白结晶 | 第54-57页 |
| ·晶体X-射线衍射数据收集和处理 | 第57-62页 |
| 4 实验结果 | 第62-94页 |
| ·SG表达、纯化、结晶和结构研究结果 | 第62-84页 |
| ·VS突变、表达、纯化和结晶 | 第84-94页 |
| 5 讨论 | 第94-115页 |
| ·异胡豆苷糖苷酶讨论 | 第94-104页 |
| ·Vinorine合成酶讨论 | 第104-115页 |
| 6 结论 | 第115-117页 |
| 7 萜类吲哚生物碱生物合成及结构生物学研究进展 | 第117-124页 |
| ·植物次生代谢产物 | 第117页 |
| ·生物碱合成途径 | 第117-119页 |
| ·植物生物技术与生物碱研究 | 第119-121页 |
| ·分子生物学与生物碱研究 | 第121-122页 |
| ·结构生物学与生物碱研究 | 第122-123页 |
| ·蛋白质结构生物学 | 第123-124页 |
| 参考文献 | 第124-133页 |
| 附录 | 第133-138页 |
| 作者简历 | 第138页 |
