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水通道蛋白AQP5在小鼠骨髓间充质干细胞分化中的功能研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
第一部分 引言第10-27页
 一、 水通道蛋白的发现、命名与分类第10页
 二、 水通道蛋白的结构第10-12页
 三、 水通道蛋白的表达和生理功能第12-13页
 四、 水通道蛋白 5(AQP5)的结构、表达及功能第13-16页
  (一)AQP5 的结构第13-14页
  (二)AQP5 的表达及功能第14-16页
 五、 间充质干细胞的发现、组织来源、生物学特性及生理功能第16-18页
  (一)间充质干细胞的发现及组织来源第16页
  (二)间充质干细胞的生物学特性及生理功能第16-18页
 六、 间充质干细胞的自我更新和干性的维持第18-20页
  (一)间充质干细胞的自我更新第18-19页
  (二)间充质干细胞的干性(stemness)维持第19-20页
 七、 间充质干细胞的分化潜能与信号分子调控第20-24页
  (一)间充质干细胞的分化潜能第20-21页
  (二)间充质干细胞多分化潜能的分子调控第21-24页
 八、 间充质干细胞归巢机制第24-25页
 九、 本研究的目的和意义第25-27页
第二部分 材料与方法第27-42页
 一、 实验材料第27-29页
  (一)主要生化和分子生物学试剂第27-28页
  (二)主要实验仪器和数据分析软件第28页
  (三)实验动物第28-29页
 二、 实验方法第29-41页
  (一)小鼠骨髓间充质干细胞的分离及培养第29页
  (二)RT-PCR 检测第29-31页
  (三)免疫印迹第31-33页
  (四)免疫荧光第33-34页
  (五)流式细胞术测定 BMSCs 纯度第34页
  (六)水通透性测定第34页
  (七)BMSCs 增殖能力测定第34-35页
  (八)BMSCs 的多项分化特性第35-37页
  (九)HE 染色和免疫组化第37-38页
  (十)实时定量 PCR(Real-time quantitative PCR)第38-40页
  (十一)骨损伤修复实验第40页
  (十二)细胞凋亡检测第40-41页
 三、 统计学分析第41-42页
第三部分 实验结果第42-59页
 一、 水通道 AQP5 在小鼠骨髓间充质干细胞的表达第42-44页
  (一)AQP5 在小鼠骨髓贴壁细胞的表达第42-43页
  (二)AQP5 在小鼠骨髓间充质干细胞的表达第43-44页
 二、 水通道 AQP5 敲除使 BMSCs 水通透能力下降第44-47页
  (一)小鼠 BMSCs 的原代分离与培养第44-45页
  (二)小鼠 BMSCs 纯度鉴定第45-46页
  (三)AQP5-/-BMSCs 水转运功能降低第46-47页
 三、 水通道 AQP5 敲除没有影响 BMSCs 增殖能力第47-48页
  (一)克隆形成实验(CFU-F)第47页
  (二)细胞数检测第47-48页
 四、 水通道 AQP5 敲除增强了 BMSCs 分化潜能第48-52页
  (一)AQP5-/-BMSCs 成脂肪分化能力增强第48-49页
  (二)AQP5-/-BMSCs 成骨分化能力增强第49-51页
  (三)AQP5-/-BMSCs 成软骨分化能力增强第51-52页
 五、 水通道 AQP5 敲除加速了骨损伤修复第52-54页
  (一)骨密度的测定第52-53页
  (二)骨损伤修复形态学分析第53-54页
 六、 AQP5 敲除使分化能力增强的机制研究第54-59页
  (一)分化过程中细胞数分析第54-55页
  (二)AQP5 敲除使 BMSCs 凋亡率降低第55-56页
  (三)应用凋亡抑制剂检测分化能力第56-57页
  (四)AQP5 可能影响 BMSCs 分化的信号通路第57-59页
第四部分 讨论第59-61页
 一、 水通道 AQP5 在干细胞领域的新发现第59页
 二、 水通道 AQP5 在 BMSCs 存在的意义第59-60页
  (一)细胞增殖方面第59页
  (二)细胞分化方面第59-60页
 三、 水通道 AQP5 影响 BMSCs 分化机制和意义第60-61页
第五部分 结论第61-62页
参考文献第62-74页
英文缩写词第74-75页
致谢第75-76页
作者简历第76-77页
在学期间公开发表论文及著作情况第77页

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