摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
目录 | 第7-10页 |
第一部分 引言 | 第10-27页 |
一、 水通道蛋白的发现、命名与分类 | 第10页 |
二、 水通道蛋白的结构 | 第10-12页 |
三、 水通道蛋白的表达和生理功能 | 第12-13页 |
四、 水通道蛋白 5(AQP5)的结构、表达及功能 | 第13-16页 |
(一)AQP5 的结构 | 第13-14页 |
(二)AQP5 的表达及功能 | 第14-16页 |
五、 间充质干细胞的发现、组织来源、生物学特性及生理功能 | 第16-18页 |
(一)间充质干细胞的发现及组织来源 | 第16页 |
(二)间充质干细胞的生物学特性及生理功能 | 第16-18页 |
六、 间充质干细胞的自我更新和干性的维持 | 第18-20页 |
(一)间充质干细胞的自我更新 | 第18-19页 |
(二)间充质干细胞的干性(stemness)维持 | 第19-20页 |
七、 间充质干细胞的分化潜能与信号分子调控 | 第20-24页 |
(一)间充质干细胞的分化潜能 | 第20-21页 |
(二)间充质干细胞多分化潜能的分子调控 | 第21-24页 |
八、 间充质干细胞归巢机制 | 第24-25页 |
九、 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
第二部分 材料与方法 | 第27-42页 |
一、 实验材料 | 第27-29页 |
(一)主要生化和分子生物学试剂 | 第27-28页 |
(二)主要实验仪器和数据分析软件 | 第28页 |
(三)实验动物 | 第28-29页 |
二、 实验方法 | 第29-41页 |
(一)小鼠骨髓间充质干细胞的分离及培养 | 第29页 |
(二)RT-PCR 检测 | 第29-31页 |
(三)免疫印迹 | 第31-33页 |
(四)免疫荧光 | 第33-34页 |
(五)流式细胞术测定 BMSCs 纯度 | 第34页 |
(六)水通透性测定 | 第34页 |
(七)BMSCs 增殖能力测定 | 第34-35页 |
(八)BMSCs 的多项分化特性 | 第35-37页 |
(九)HE 染色和免疫组化 | 第37-38页 |
(十)实时定量 PCR(Real-time quantitative PCR) | 第38-40页 |
(十一)骨损伤修复实验 | 第40页 |
(十二)细胞凋亡检测 | 第40-41页 |
三、 统计学分析 | 第41-42页 |
第三部分 实验结果 | 第42-59页 |
一、 水通道 AQP5 在小鼠骨髓间充质干细胞的表达 | 第42-44页 |
(一)AQP5 在小鼠骨髓贴壁细胞的表达 | 第42-43页 |
(二)AQP5 在小鼠骨髓间充质干细胞的表达 | 第43-44页 |
二、 水通道 AQP5 敲除使 BMSCs 水通透能力下降 | 第44-47页 |
(一)小鼠 BMSCs 的原代分离与培养 | 第44-45页 |
(二)小鼠 BMSCs 纯度鉴定 | 第45-46页 |
(三)AQP5-/-BMSCs 水转运功能降低 | 第46-47页 |
三、 水通道 AQP5 敲除没有影响 BMSCs 增殖能力 | 第47-48页 |
(一)克隆形成实验(CFU-F) | 第47页 |
(二)细胞数检测 | 第47-48页 |
四、 水通道 AQP5 敲除增强了 BMSCs 分化潜能 | 第48-52页 |
(一)AQP5-/-BMSCs 成脂肪分化能力增强 | 第48-49页 |
(二)AQP5-/-BMSCs 成骨分化能力增强 | 第49-51页 |
(三)AQP5-/-BMSCs 成软骨分化能力增强 | 第51-52页 |
五、 水通道 AQP5 敲除加速了骨损伤修复 | 第52-54页 |
(一)骨密度的测定 | 第52-53页 |
(二)骨损伤修复形态学分析 | 第53-54页 |
六、 AQP5 敲除使分化能力增强的机制研究 | 第54-59页 |
(一)分化过程中细胞数分析 | 第54-55页 |
(二)AQP5 敲除使 BMSCs 凋亡率降低 | 第55-56页 |
(三)应用凋亡抑制剂检测分化能力 | 第56-57页 |
(四)AQP5 可能影响 BMSCs 分化的信号通路 | 第57-59页 |
第四部分 讨论 | 第59-61页 |
一、 水通道 AQP5 在干细胞领域的新发现 | 第59页 |
二、 水通道 AQP5 在 BMSCs 存在的意义 | 第59-60页 |
(一)细胞增殖方面 | 第59页 |
(二)细胞分化方面 | 第59-60页 |
三、 水通道 AQP5 影响 BMSCs 分化机制和意义 | 第60-61页 |
第五部分 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-74页 |
英文缩写词 | 第74-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
作者简历 | 第76-77页 |
在学期间公开发表论文及著作情况 | 第77页 |