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GABA_B受体蛋白(GABA_BR)在大肠杆菌中的表达、纯化及复性研究

摘要第1-4页
Abstract第4-10页
第一章 前言第10-26页
   ·文献综述第10-20页
     ·GABA_BR基因的克隆及其结构第10-12页
     ·GABA_BR在组织和细胞中的分布和定位第12-14页
     ·GABA_BR是第一个被发现的由异二聚体组成的GPCR第14-19页
     ·GABA_BR与基因转录第19-20页
     ·问题和展望第20页
   ·GABA_BR的研究目的与意义第20-26页
     ·GABA_BR的应答机制及生理意义第20-21页
     ·GABA_BR的临床意义第21-22页
     ·GABA_BR参与针刺镇痛第22-24页
     ·人胃癌组织中GABA_BR的免疫组化研究第24-26页
第二章 常用方法与一般操作步骤第26-31页
   ·质粒DNA的提取第26页
     ·试剂配制第26页
     ·提取步骤第26页
   ·感受态细胞的制备(CaCl_2法)第26-27页
   ·转化第27页
   ·表达蛋白的SDS-PAGE电泳检验第27-29页
     ·试剂配制第27-28页
     ·实验步骤第28-29页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶的干燥第29页
   ·蛋白质浓度的测定(Bradford检测法)第29-30页
     ·原理第29页
     ·方法第29-30页
   ·280nm光吸收法测定蛋白浓度第30-31页
第三章 GABA_BR蛋白在大肠杆菌中的表达第31-36页
   ·材料第31页
     ·所需菌体与载体第31页
     ·采用的生物学试剂第31页
     ·实验仪器第31页
   ·实验方法第31-32页
     ·GABA_BR的诱导表达第31-32页
     ·蛋白表达的条件优化第32页
   ·结果与分析第32-34页
     ·不同IPTG浓度诱导第32-33页
     ·不同的诱导温度第33页
     ·不同的诱导时间第33-34页
   ·讨论第34-36页
第四章 包涵体蛋白的纯化与复性第36-52页
   ·关于包涵体第36-41页
     ·包涵体的性质第36页
     ·包涵体形成的原因第36-37页
     ·包涵体的优势第37-38页
     ·包涵体的分离提取第38页
     ·包涵体的溶解第38-39页
     ·包涵体的复性和纯化第39-40页
     ·包涵体蛋白复性方法第40页
     ·包涵体蛋白复性效率第40-41页
   ·材料第41-42页
     ·菌株第41页
     ·试剂第41-42页
     ·仪器第42页
   ·实验方法第42-44页
     ·目的蛋白的表达第42页
     ·包涵体的初步纯化及优化第42页
     ·包涵体变性溶解第42-43页
     ·变性条件下分子筛柱层析纯化第43页
     ·稀释复性第43页
     ·透析复性第43页
     ·柱上复性第43-44页
   ·结果第44-50页
     ·包涵体的初步纯化第44-45页
     ·包涵体的溶解第45-46页
     ·融合蛋白的分子筛柱层析纯化第46-47页
     ·稀释复性第47-48页
     ·透析复性第48-49页
     ·柱上复性第49-50页
   ·讨论第50-52页
第五章 结论第52-54页
   ·主要结论第52页
   ·主要创新点第52页
   ·研究展望第52-54页
参考文献第54-57页
附图第57-61页
致谢第61-62页
攻读学位期间发表的学术论文目录第62-63页

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