| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-26页 |
| ·文献综述 | 第10-20页 |
| ·GABA_BR基因的克隆及其结构 | 第10-12页 |
| ·GABA_BR在组织和细胞中的分布和定位 | 第12-14页 |
| ·GABA_BR是第一个被发现的由异二聚体组成的GPCR | 第14-19页 |
| ·GABA_BR与基因转录 | 第19-20页 |
| ·问题和展望 | 第20页 |
| ·GABA_BR的研究目的与意义 | 第20-26页 |
| ·GABA_BR的应答机制及生理意义 | 第20-21页 |
| ·GABA_BR的临床意义 | 第21-22页 |
| ·GABA_BR参与针刺镇痛 | 第22-24页 |
| ·人胃癌组织中GABA_BR的免疫组化研究 | 第24-26页 |
| 第二章 常用方法与一般操作步骤 | 第26-31页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第26页 |
| ·试剂配制 | 第26页 |
| ·提取步骤 | 第26页 |
| ·感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第26-27页 |
| ·转化 | 第27页 |
| ·表达蛋白的SDS-PAGE电泳检验 | 第27-29页 |
| ·试剂配制 | 第27-28页 |
| ·实验步骤 | 第28-29页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶的干燥 | 第29页 |
| ·蛋白质浓度的测定(Bradford检测法) | 第29-30页 |
| ·原理 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-30页 |
| ·280nm光吸收法测定蛋白浓度 | 第30-31页 |
| 第三章 GABA_BR蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第31-36页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·所需菌体与载体 | 第31页 |
| ·采用的生物学试剂 | 第31页 |
| ·实验仪器 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-32页 |
| ·GABA_BR的诱导表达 | 第31-32页 |
| ·蛋白表达的条件优化 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-34页 |
| ·不同IPTG浓度诱导 | 第32-33页 |
| ·不同的诱导温度 | 第33页 |
| ·不同的诱导时间 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第四章 包涵体蛋白的纯化与复性 | 第36-52页 |
| ·关于包涵体 | 第36-41页 |
| ·包涵体的性质 | 第36页 |
| ·包涵体形成的原因 | 第36-37页 |
| ·包涵体的优势 | 第37-38页 |
| ·包涵体的分离提取 | 第38页 |
| ·包涵体的溶解 | 第38-39页 |
| ·包涵体的复性和纯化 | 第39-40页 |
| ·包涵体蛋白复性方法 | 第40页 |
| ·包涵体蛋白复性效率 | 第40-41页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·菌株 | 第41页 |
| ·试剂 | 第41-42页 |
| ·仪器 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·目的蛋白的表达 | 第42页 |
| ·包涵体的初步纯化及优化 | 第42页 |
| ·包涵体变性溶解 | 第42-43页 |
| ·变性条件下分子筛柱层析纯化 | 第43页 |
| ·稀释复性 | 第43页 |
| ·透析复性 | 第43页 |
| ·柱上复性 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-50页 |
| ·包涵体的初步纯化 | 第44-45页 |
| ·包涵体的溶解 | 第45-46页 |
| ·融合蛋白的分子筛柱层析纯化 | 第46-47页 |
| ·稀释复性 | 第47-48页 |
| ·透析复性 | 第48-49页 |
| ·柱上复性 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 第五章 结论 | 第52-54页 |
| ·主要结论 | 第52页 |
| ·主要创新点 | 第52页 |
| ·研究展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-57页 |
| 附图 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第62-63页 |