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脂肪酶在催化拆分对甲砜基苯丝氨酸乙酯中的应用

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-14页
第一章 绪论第14-36页
   ·引言第14-15页
   ·酶法制备手性药物第15-21页
   ·酶的非水相催化第21-25页
     ·非水相溶剂体系中作为催化剂的酶及其来源第22页
     ·酶反应非水相反应体系第22页
     ·水活度的重要性第22-23页
     ·非水相溶液体系中酶的稳定性第23-24页
     ·非水相溶剂体系中酶的稳定性策略第24-25页
       ·介质工程法第24页
       ·生物催化剂工程第24-25页
   ·脂肪酶相关第25-27页
     ·脂肪酶的简介及应用第25页
     ·脂肪酶的活性中心结构第25-26页
     ·脂肪酶在不同溶剂系统中的催化第26页
     ·脂肪酶的手性选择性第26-27页
   ·本论文研究背景、意义与方法第27-29页
     ·研究背景第27-28页
     ·研究意义第28-29页
     ·研究内容第29页
 参考文献第29-36页
第二章 产脂肪酶微生物的筛选第36-46页
   ·引言第36页
   ·材料与方法第36-40页
     ·土样采集第36-37页
     ·主要试剂第37页
     ·培养基第37-38页
       ·富集培养基组成(%)第37页
       ·初筛培养基第37-38页
       ·复筛发酵培养基组分(%)第38页
     ·方法第38-40页
       ·富集培养第38页
       ·初筛培养第38页
       ·复筛培养第38-39页
       ·脂肪酶活性测定第39-40页
   ·结果与讨论第40-44页
     ·筛选模型富集效应改善第40-41页
     ·筛选结果第41-43页
     ·脂肪酶酶活分布第43页
     ·冻干脂肪酶第43-44页
   ·本章小结第44-45页
 参考文献第45-46页
第三章 对甲砜基苯丝氨酸乙酯副反应的研究第46-74页
   ·引言第46-47页
   ·材料与方法第47-50页
     ·供试脂肪酶第47页
     ·主要试剂第47页
     ·主要仪器第47-48页
     ·DL-threo-p-MPSE 自发水解混合物的制备第48页
     ·DL-threo-p-MPSE 脂肪酶水解混合物的制备第48页
     ·反相高效液相色谱(RP-HPLC)检测第48页
     ·正相高效液相色谱(NP-HPLC)检测第48-49页
     ·制备液相分离富集第49页
     ·~1H 核磁共振(~1HNMR )检测分析第49页
     ·质谱(MS)及液相质谱联用(LC-MS)检测分析第49-50页
       ·第一次 LC - MS 检测分析第49页
       ·第一次 LC - MS 检测分析第49-50页
   ·结果与讨论第50-72页
     ·反相 HPLC 副产物的检出第50-52页
       ·自发水解体系中副产物的检出第50-51页
       ·脂肪酶水解体系中副产物的检出第51-52页
     ·副产物的鉴定第52-60页
       ·碱水解试验第52-53页
       ·BP3 的正相 HPLC 分析第53-55页
       ·主要副产物 BP 3 及 BP 6 的1H NM R 及 MS 分析第55-57页
       ·其它副产物的 LC - MS 检测分析第57-60页
         ·等度洗脱 LC - MS第57-58页
         ·梯度洗脱 LC - MS第58-60页
     ·副反应机制第60-64页
       ·p- MBA 的生成机制第60-61页
       ·席夫碱化合物的生成机制第61-62页
       ·p- MPSE 的外消旋及差向异构化机制第62-64页
     ·各类因素对于副反应的影响第64-68页
       ·pH 对于副反应的影响第64-66页
       ·温度对于副反应的影响第66-67页
       ·p- MPSE 初始浓度对于副反应的影响第67-68页
     ·副反应的抑制第68-72页
       ·纯水中金属离子对于副反应的影响第69-70页
       ·缓冲液中金属离子对于副反应的影响第70页
       ·金属离子抑制副反应机制第70-71页
       ·金属离子抑制方法在酶促有机溶剂催化体系中的可行性第71-72页
   ·本章小结第72-73页
 参考文献第73-74页
第四章 有机介质中脂肪酶催化外消 DL - 苏式 -对甲砜基苯丝氨酸乙酯不对称水解的研究第74-94页
   ·引言第74页
   ·材料与方法第74-80页
     ·供试脂肪酶第74-75页
     ·主要试剂第75页
     ·主要仪器第75页
     ·高效液相分析方法第75-77页
       ·分析条件第75-76页
       ·底物标准曲线第76页
       ·底物转化率、底物对映体过量百分数、 E 值的计算方法及酶不对称水解反应前后正相图谱第76-77页
     ·反应体系的确立第77-78页
     ·脂肪酶的确定第78页
     ·碳酸氢铵对酶促反应的影响第78页
     ·e.e.s值随时间的变化第78页
     ·底物浓度的影响第78页
     ·内扩散的考察第78-79页
     ·外扩散的考察第79页
     ·水含量的影响第79页
     ·pH 值的影响第79页
     ·温度的影响第79-80页
     ·Zn~(2+)对转化率及对映体选择性的影响第80页
   ·结果与讨论第80-91页
     ·反应体系的选择第80页
     ·脂肪酶的确定第80-81页
     ·碳酸氢铵对酶促反应的影响第81-82页
     ·e.e.s值随时间的变化第82-83页
     ·底物浓度的影响第83-85页
     ·扩散效应的影响第85-87页
       ·内扩散的考察第85-86页
       ·外扩散考察第86-87页
     ·微水有机溶剂水含量的影响第87-88页
     ·pH 值的影响第88-89页
     ·温度的影响第89-90页
     ·Zn~(2+)对转化率及对映体选择性的影响第90-91页
   ·本章小结第91-93页
 参考文献第93-94页
第五章 结论与展望第94-96页
   ·主要结论第94-95页
   ·论文展望第95-96页
攻读硕士学位期间发表论文情况第96-98页
致谢第98页

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