| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-36页 |
| ·引言 | 第14-15页 |
| ·酶法制备手性药物 | 第15-21页 |
| ·酶的非水相催化 | 第21-25页 |
| ·非水相溶剂体系中作为催化剂的酶及其来源 | 第22页 |
| ·酶反应非水相反应体系 | 第22页 |
| ·水活度的重要性 | 第22-23页 |
| ·非水相溶液体系中酶的稳定性 | 第23-24页 |
| ·非水相溶剂体系中酶的稳定性策略 | 第24-25页 |
| ·介质工程法 | 第24页 |
| ·生物催化剂工程 | 第24-25页 |
| ·脂肪酶相关 | 第25-27页 |
| ·脂肪酶的简介及应用 | 第25页 |
| ·脂肪酶的活性中心结构 | 第25-26页 |
| ·脂肪酶在不同溶剂系统中的催化 | 第26页 |
| ·脂肪酶的手性选择性 | 第26-27页 |
| ·本论文研究背景、意义与方法 | 第27-29页 |
| ·研究背景 | 第27-28页 |
| ·研究意义 | 第28-29页 |
| ·研究内容 | 第29页 |
| 参考文献 | 第29-36页 |
| 第二章 产脂肪酶微生物的筛选 | 第36-46页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·材料与方法 | 第36-40页 |
| ·土样采集 | 第36-37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37-38页 |
| ·富集培养基组成(%) | 第37页 |
| ·初筛培养基 | 第37-38页 |
| ·复筛发酵培养基组分(%) | 第38页 |
| ·方法 | 第38-40页 |
| ·富集培养 | 第38页 |
| ·初筛培养 | 第38页 |
| ·复筛培养 | 第38-39页 |
| ·脂肪酶活性测定 | 第39-40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-44页 |
| ·筛选模型富集效应改善 | 第40-41页 |
| ·筛选结果 | 第41-43页 |
| ·脂肪酶酶活分布 | 第43页 |
| ·冻干脂肪酶 | 第43-44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-46页 |
| 第三章 对甲砜基苯丝氨酸乙酯副反应的研究 | 第46-74页 |
| ·引言 | 第46-47页 |
| ·材料与方法 | 第47-50页 |
| ·供试脂肪酶 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47-48页 |
| ·DL-threo-p-MPSE 自发水解混合物的制备 | 第48页 |
| ·DL-threo-p-MPSE 脂肪酶水解混合物的制备 | 第48页 |
| ·反相高效液相色谱(RP-HPLC)检测 | 第48页 |
| ·正相高效液相色谱(NP-HPLC)检测 | 第48-49页 |
| ·制备液相分离富集 | 第49页 |
| ·~1H 核磁共振(~1HNMR )检测分析 | 第49页 |
| ·质谱(MS)及液相质谱联用(LC-MS)检测分析 | 第49-50页 |
| ·第一次 LC - MS 检测分析 | 第49页 |
| ·第一次 LC - MS 检测分析 | 第49-50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-72页 |
| ·反相 HPLC 副产物的检出 | 第50-52页 |
| ·自发水解体系中副产物的检出 | 第50-51页 |
| ·脂肪酶水解体系中副产物的检出 | 第51-52页 |
| ·副产物的鉴定 | 第52-60页 |
| ·碱水解试验 | 第52-53页 |
| ·BP3 的正相 HPLC 分析 | 第53-55页 |
| ·主要副产物 BP 3 及 BP 6 的1H NM R 及 MS 分析 | 第55-57页 |
| ·其它副产物的 LC - MS 检测分析 | 第57-60页 |
| ·等度洗脱 LC - MS | 第57-58页 |
| ·梯度洗脱 LC - MS | 第58-60页 |
| ·副反应机制 | 第60-64页 |
| ·p- MBA 的生成机制 | 第60-61页 |
| ·席夫碱化合物的生成机制 | 第61-62页 |
| ·p- MPSE 的外消旋及差向异构化机制 | 第62-64页 |
| ·各类因素对于副反应的影响 | 第64-68页 |
| ·pH 对于副反应的影响 | 第64-66页 |
| ·温度对于副反应的影响 | 第66-67页 |
| ·p- MPSE 初始浓度对于副反应的影响 | 第67-68页 |
| ·副反应的抑制 | 第68-72页 |
| ·纯水中金属离子对于副反应的影响 | 第69-70页 |
| ·缓冲液中金属离子对于副反应的影响 | 第70页 |
| ·金属离子抑制副反应机制 | 第70-71页 |
| ·金属离子抑制方法在酶促有机溶剂催化体系中的可行性 | 第71-72页 |
| ·本章小结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-74页 |
| 第四章 有机介质中脂肪酶催化外消 DL - 苏式 -对甲砜基苯丝氨酸乙酯不对称水解的研究 | 第74-94页 |
| ·引言 | 第74页 |
| ·材料与方法 | 第74-80页 |
| ·供试脂肪酶 | 第74-75页 |
| ·主要试剂 | 第75页 |
| ·主要仪器 | 第75页 |
| ·高效液相分析方法 | 第75-77页 |
| ·分析条件 | 第75-76页 |
| ·底物标准曲线 | 第76页 |
| ·底物转化率、底物对映体过量百分数、 E 值的计算方法及酶不对称水解反应前后正相图谱 | 第76-77页 |
| ·反应体系的确立 | 第77-78页 |
| ·脂肪酶的确定 | 第78页 |
| ·碳酸氢铵对酶促反应的影响 | 第78页 |
| ·e.e.s值随时间的变化 | 第78页 |
| ·底物浓度的影响 | 第78页 |
| ·内扩散的考察 | 第78-79页 |
| ·外扩散的考察 | 第79页 |
| ·水含量的影响 | 第79页 |
| ·pH 值的影响 | 第79页 |
| ·温度的影响 | 第79-80页 |
| ·Zn~(2+)对转化率及对映体选择性的影响 | 第80页 |
| ·结果与讨论 | 第80-91页 |
| ·反应体系的选择 | 第80页 |
| ·脂肪酶的确定 | 第80-81页 |
| ·碳酸氢铵对酶促反应的影响 | 第81-82页 |
| ·e.e.s值随时间的变化 | 第82-83页 |
| ·底物浓度的影响 | 第83-85页 |
| ·扩散效应的影响 | 第85-87页 |
| ·内扩散的考察 | 第85-86页 |
| ·外扩散考察 | 第86-87页 |
| ·微水有机溶剂水含量的影响 | 第87-88页 |
| ·pH 值的影响 | 第88-89页 |
| ·温度的影响 | 第89-90页 |
| ·Zn~(2+)对转化率及对映体选择性的影响 | 第90-91页 |
| ·本章小结 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-94页 |
| 第五章 结论与展望 | 第94-96页 |
| ·主要结论 | 第94-95页 |
| ·论文展望 | 第95-96页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第96-98页 |
| 致谢 | 第98页 |