| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-22页 |
| ·乳腺的发育 | 第13-14页 |
| ·乳腺结构 | 第13页 |
| ·乳腺发育 | 第13-14页 |
| ·细胞连接分类 | 第14-18页 |
| ·紧密连接 | 第14页 |
| ·间隙连接 | 第14-15页 |
| ·粘着连接 | 第15-18页 |
| ·E-cadherin和Beta-catenin及其表达调控的研究进展 | 第18-20页 |
| ·E-cadherin | 第18-19页 |
| ·连环蛋白 | 第19-20页 |
| ·WNT信号通路的研究进展 | 第20-21页 |
| ·研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-35页 |
| ·E-cadherin及Beta-catenin蛋白的免疫荧光共定位检测 | 第22-23页 |
| ·样品采集 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·主要试剂及配制 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23页 |
| ·E-cadherin及Beta-catenin蛋白表达的检测 | 第23-29页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·主要试剂及配制 | 第23-25页 |
| ·实验方法 | 第25-26页 |
| ·荧光定量RT-PCR检测mRNA的表达 | 第26-29页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞培养及鉴定 | 第29-31页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·培养器皿预处理 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·主要试剂及配制 | 第29-30页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的原代培养及纯化 | 第30-31页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的角蛋白18鉴定 | 第31页 |
| ·王不留行和蒲公英对粘附分子的影响 | 第31-32页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·实验分组 | 第32页 |
| ·荧光定量RT-PCR检测mRNA的表达 | 第32页 |
| ·Western blotting检测E-cadherin、Beta-catenin和Cyclin D1蛋白的表达 | 第32页 |
| ·WST-1检测乳腺上皮细胞细胞增殖能力 | 第32页 |
| ·Beta-catenin基因沉寂对E-cadherin和Cyclin D1表达的影响 | 第32-34页 |
| ·siRNA的设计与合成 | 第32-33页 |
| ·转染操作步骤 | 第33-34页 |
| ·转染效率检测 | 第34页 |
| ·Beta-catenin基因沉寂对E-cadherin和Cyclin D1 mRNA表达的影响 | 第34页 |
| ·Beta-catenin基因沉寂对E-cadherin和Cyclin D1蛋白表达的影响 | 第34页 |
| ·WST-1检测基因沉寂后细胞增殖能力的影响 | 第34页 |
| ·数据处理及统计分析 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-65页 |
| ·不同时期E-cadherin和Beta-catenin的表达部位变化 | 第35-46页 |
| ·青春期E-cadherin和Beta-catenin的表达定位 | 第35-37页 |
| ·妊娠期E-cadherin和Beta-catenin的表达定位 | 第37-40页 |
| ·泌乳期E-cadherin和Beta-catenin的表达定位 | 第40-44页 |
| ·退化期E-cadherin和Beta-catenin的表达定位 | 第44-46页 |
| ·不同时期E-cadherin、Beta-catenin和Cyclin D1蛋白表达检测 | 第46-54页 |
| ·不同时期mRNA表达量变化 | 第46-52页 |
| ·不同时期蛋白表达量变化 | 第52-54页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞的培养 | 第54-55页 |
| ·乳腺上皮细胞的分离培养结果 | 第54页 |
| ·奶牛乳腺上皮细胞鉴定结果 | 第54-55页 |
| ·Beta-catenin基因瞬时沉寂试验结果 | 第55-56页 |
| ·高效抑制序列及最佳干扰时间筛选 | 第55-56页 |
| ·转染效率检测结果 | 第56页 |
| ·王不留行、蒲公英对乳腺上皮细胞的影响 | 第56-61页 |
| ·荧光定量RT-PCR检测结果 | 第56-58页 |
| ·Western blotting检测结果 | 第58-60页 |
| ·王不留行、蒲公英对细胞增殖能力的影响 | 第60-61页 |
| ·基因沉寂对粘附分子的影响 | 第61-65页 |
| ·基因沉寂后的mRNA水平检测结果 | 第61-62页 |
| ·E-cadherin、Beta-catenin和Cyclin D1蛋白水平检测 | 第62-63页 |
| ·基因沉寂对上皮细胞增殖能力的影响 | 第63-65页 |
| 4 讨论 | 第65-70页 |
| ·不同时期E-cadherin、Beta-catenin和Cyclin D1的表达 | 第65-66页 |
| ·基因沉寂对细胞粘附分子的影响 | 第66-68页 |
| ·Beta-catenin基因沉寂 | 第66页 |
| ·基因沉寂对细胞粘附分子及细胞增殖的影响 | 第66-68页 |
| ·添加王不留行和蒲公英对细胞粘附分子的影响 | 第68-69页 |
| ·研究展望 | 第69-70页 |
| 5 结论 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 附录：缩略语表 | 第78-79页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第79页 |
