目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
前言 | 第8-18页 |
1 心脑血管疾病、肥胖等慢性疾病严重威胁人类健康 | 第8页 |
2 胆固醇的分子结构和生理功能 | 第8-9页 |
3 胆固醇代谢及其相关疾病 | 第9-11页 |
4 胆固醇的生物合成及其负反馈调控机制 | 第11-14页 |
5 胆固醇代谢调控研究中的体细胞遗传学 | 第14-15页 |
6 正向遗传学与新基因的发现 | 第15-16页 |
7 病毒诱变系统 | 第16-17页 |
8 本论文的创新之处和研究意义 | 第17-18页 |
实验材料和方法 | 第18-30页 |
1 实验材料 | 第18-21页 |
·试剂 | 第18页 |
·细胞系和培养基 | 第18-19页 |
·菌株和质粒 | 第19页 |
·引物序列 | 第19-20页 |
·抗体 | 第20-21页 |
2 实验方法 | 第21-30页 |
·常规的分子生物学技术 | 第21页 |
·病毒的包装和感染 | 第21-22页 |
·结晶紫和油红O染色 | 第22-23页 |
·结晶紫染色 | 第22页 |
·油红O染色 | 第22-23页 |
·细胞全蛋白的抽提 | 第23-24页 |
·细胞RNA抽提 | 第24-25页 |
·RT-PCR | 第25-26页 |
·实时定量PCR | 第26-27页 |
·iPCR | 第27-28页 |
·3’RACE | 第28-30页 |
实验结果 | 第30-46页 |
1 SREBP途径中相关调控因子 | 第30-41页 |
·25-HC对2C5细胞的毒性能被外源递送的胆固醇所克服 | 第30-31页 |
·CHO-7细胞对SR-12813的敏感性严格依赖胞内胆固醇含量 | 第31页 |
·截短型SREBP-2的突变体 | 第31-34页 |
·SREBP-2过表达的突变 | 第34-36页 |
·SCAP过表达的突变体 | 第36-37页 |
·甾醇耐受的第三类突变体---Insig-1缺失的隐性突变 | 第37-41页 |
2 HMGCR途径中的调控因子 | 第41-44页 |
3 其他途径的调控因子 | 第44-46页 |
讨论 | 第46-49页 |
1 基于2C5(CHO-7/Insig-1)细胞以25-HC作为压力的筛选 | 第46-47页 |
2 基于HeLa细胞以SR-12813作为压力的筛选 | 第47页 |
3 基于CHO-7细胞以SR-12813作为压力的筛选 | 第47-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
附录 | 第54-56页 |
1 缩略词表 | 第54页 |
2 硕士期间发表的文章 | 第54-55页 |
3 硕士期间参与的科研项目 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |