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利用体细胞突变方法鉴定胆固醇代谢调控基因

目录第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-8页
前言第8-18页
 1 心脑血管疾病、肥胖等慢性疾病严重威胁人类健康第8页
 2 胆固醇的分子结构和生理功能第8-9页
 3 胆固醇代谢及其相关疾病第9-11页
 4 胆固醇的生物合成及其负反馈调控机制第11-14页
 5 胆固醇代谢调控研究中的体细胞遗传学第14-15页
 6 正向遗传学与新基因的发现第15-16页
 7 病毒诱变系统第16-17页
 8 本论文的创新之处和研究意义第17-18页
实验材料和方法第18-30页
 1 实验材料第18-21页
   ·试剂第18页
   ·细胞系和培养基第18-19页
   ·菌株和质粒第19页
   ·引物序列第19-20页
   ·抗体第20-21页
 2 实验方法第21-30页
   ·常规的分子生物学技术第21页
   ·病毒的包装和感染第21-22页
   ·结晶紫和油红O染色第22-23页
     ·结晶紫染色第22页
     ·油红O染色第22-23页
   ·细胞全蛋白的抽提第23-24页
   ·细胞RNA抽提第24-25页
   ·RT-PCR第25-26页
   ·实时定量PCR第26-27页
   ·iPCR第27-28页
   ·3’RACE第28-30页
实验结果第30-46页
 1 SREBP途径中相关调控因子第30-41页
   ·25-HC对2C5细胞的毒性能被外源递送的胆固醇所克服第30-31页
   ·CHO-7细胞对SR-12813的敏感性严格依赖胞内胆固醇含量第31页
   ·截短型SREBP-2的突变体第31-34页
   ·SREBP-2过表达的突变第34-36页
   ·SCAP过表达的突变体第36-37页
   ·甾醇耐受的第三类突变体---Insig-1缺失的隐性突变第37-41页
 2 HMGCR途径中的调控因子第41-44页
 3 其他途径的调控因子第44-46页
讨论第46-49页
 1 基于2C5(CHO-7/Insig-1)细胞以25-HC作为压力的筛选第46-47页
 2 基于HeLa细胞以SR-12813作为压力的筛选第47页
 3 基于CHO-7细胞以SR-12813作为压力的筛选第47-49页
结论第49-50页
参考文献第50-54页
附录第54-56页
 1 缩略词表第54页
 2 硕士期间发表的文章第54-55页
 3 硕士期间参与的科研项目第55-56页
致谢第56-57页

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