ABBREVIATIONS | 第1-8页 |
摘要 | 第8-17页 |
Abstract | 第17-29页 |
正文 | 第29-139页 |
第一部分 底物肽-HPLC原位测定跨膜TACE活性方法的建立 | 第29-88页 |
前言 | 第29-32页 |
第一节 底物肽—HPLC测定TACE活性方法的建立 | 第32-68页 |
背景介绍 | 第32-34页 |
Part 1.底物肽及其水解片断的HPLC分离 | 第34-45页 |
·实验仪器与设备 | 第34页 |
·实验材料 | 第34-35页 |
·实验方法 | 第35-36页 |
·结果与讨论 | 第36-45页 |
·本部分小结 | 第45页 |
Part 2.rhTACE纯酶—底物肽体系反应的动力学常数测定 | 第45-56页 |
·实验仪器与设备 | 第45-46页 |
·实验材料 | 第46页 |
·实验方法 | 第46-48页 |
·结果与讨论 | 第48-56页 |
·本部分小结 | 第56页 |
Part 3.底物肽—HPLC法对活细胞原位TACE活性的测定 | 第56-68页 |
·实验仪器与设备 | 第57页 |
·实验材料 | 第57页 |
·实验方法 | 第57-59页 |
·结果与讨论 | 第59-66页 |
·本部分小结 | 第66-68页 |
第二节 TACE活性测定的多方法对比评价 | 第68-83页 |
背景介绍 | 第68页 |
Part 1 生物化学方法——底物胶电泳 | 第68-72页 |
·主要试剂和设备 | 第69-70页 |
·实验方法 | 第70-71页 |
·结果与讨论 | 第71-72页 |
Part 2 免疫学方法——MTT细胞毒法 | 第72-76页 |
·材料、试剂和设备 | 第73页 |
·实验方法 | 第73-74页 |
·结果与讨论 | 第74-76页 |
Part 3 细胞学方法——FACS方法 | 第76-79页 |
·材料、试剂和设备 | 第76-77页 |
·实验方法 | 第77页 |
·结果与讨论 | 第77-79页 |
Part 4 底物肽—HPLC方法的优势及其它各类方法适用性评价 | 第79-83页 |
·检测限和灵敏度评价 | 第79-81页 |
·各方法的适用范围及局限性小结 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-88页 |
第二部分 细胞膜的脂质微环境对膜酶—TACE活性的调节 | 第88-138页 |
前言 | 第88-91页 |
第一节 基于FACS的膜流动性测定技术 | 第91-97页 |
·方法原理 | 第91-92页 |
·材料与方法 | 第92-93页 |
·方法评估 | 第93-97页 |
第二节 M~βCD诱导的膜流动性增强对TACE活性的影响 | 第97-112页 |
·M~βCD对细胞膜流动性的改变 | 第97-102页 |
·M~βCD对U937和HEK293细胞膜上TACE活性的影响 | 第102-111页 |
·本节小结 | 第111-112页 |
第三节 黄连素(BBR)对细胞TACE活性的影响和机制的初步探讨 | 第112-134页 |
·BBR处理后HEK293及U937细胞膜流动性的改变 | 第112-117页 |
·BBR处理后U937细胞的sTNF-a表达量的改变 | 第117-120页 |
·BBR对HEK293细胞膜上TACE水解底物肽活性的影响 | 第120-129页 |
·BBR对HEK293和U937细胞TACE mRNA的影响 | 第129-133页 |
·本节小结 | 第133-134页 |
参考文献 | 第134-138页 |
创新点总结与展望 | 第138-139页 |
附录 | 第139-140页 |
致谢 | 第140-141页 |