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农杆菌介导棉花遗传转化体系优化

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
英文缩略表第11-16页
第一章 绪论第16-40页
   ·植物中常用的遗传转化方法第16-21页
     ·农杆菌介导转化法第17-19页
       ·农杆菌介导法的转化机制第17-18页
       ·农杆菌介导转化法应用第18-19页
     ·基因枪法第19-20页
       ·基因枪法转化机制第19-20页
       ·基因枪法应用第20页
     ·花粉管通道法第20-21页
       ·花粉管通道法机制第20-21页
       ·花粉管通道法应用第21页
   ·农杆菌介导棉花遗传转化体系研究进展第21-25页
     ·农杆菌介导棉花遗传转化体系第21-23页
       ·以子叶和下胚轴为受体的转化体系第21-22页
       ·以胚性愈伤组织为受体的转化体系第22页
       ·以茎尖为受体的遗传转化体系第22-23页
     ·农杆菌介导的三种遗传转化体系比较第23-25页
   ·影响棉花胚性愈伤胚胎发生率的因素第25-32页
     ·棉花胚性愈伤和体细胞胚发生第25-27页
       ·棉花胚性愈伤和体细胞胚发生途径第25-26页
       ·棉花胚性愈伤和体细胞胚发生的形态学分析第26-27页
     ·影响棉花胚性愈伤和胚胎发生率的因素第27-31页
       ·影响棉花胚性愈伤和胚胎发生率的物理因素第27页
       ·影响棉花胚性愈伤和胚胎发生率的生物因素第27-28页
       ·影响棉花胚性愈伤和胚胎发生率的化学因素第28-31页
     ·棉花胚性愈伤和体细胞胚发生的调控机理第31-32页
     ·小结第32页
   ·研究背景、目的和意义第32-39页
     ·棉花纤维发育第32-33页
       ·棉花纤维发育特点第32-33页
       ·棉花纤维发育过程第33页
     ·与棉花纤维发育相关的 M YB 类转录因子第33-37页
       ·M YB 类转录因子第33-35页
       ·棉花纤维发育相关的M YB 转录因子第35-37页
     ·G bM Y 82 转录因子研究进展第37-39页
   ·研究目的和意义第39-40页
第二章 材料与方法第40-56页
   ·实验材料与试剂第40-43页
     ·植物材料第40页
     ·菌株和载体第40页
     ·主要仪器设备第40-41页
     ·酶与试剂盒第41-42页
     ·生化试剂第42页
     ·激素、抗生素和维生素第42-43页
     ·寡链核苷酸引物第43页
   ·方法第43-56页
     ·植物表达载体构建第43-48页
       ·G b MY 82 c D NA 序列克隆第43页
       ·基因c D NA 序列扩增第43-44页
       ·凝胶电泳条带的柱层析纯化回收第44页
       ·DN A 回收片段与pm d1 8 -T V e c t or 的连接第44-45页
       ·大肠杆菌D H5 α感受态的制备第45页
       ·连接产物转化到大肠杆菌第45页
       ·阳性克隆的筛选及测序鉴定第45-46页
       ·质粒抽提第46-47页
       ·表达载体构建第47-48页
     ·工程农杆菌制备第48-49页
       ·农杆菌EHA105/LBA4404感受态的制备第48-49页
       ·农杆菌工程菌株的获得第49页
     ·棉花遗传转化方法第49-52页
       ·以下胚轴为受体的遗传转化体系第49-50页
       ·以胚性愈伤为受体的转化体系第50-51页
       ·以茎尖为受体的转化系统第51-52页
     ·植物基本培养基第52-54页
       ·植物培养基第52-53页
       ·MS B - NH 2 NO 3 培养基第53-54页
     ·转基因植株的P CR 鉴定第54-56页
       ·海岛棉总D NA 提取第54-55页
       ·P CR 鉴定第55-56页
第三章 结果与分析第56-94页
   ·植物表达载体构建第56-58页
     ·植物表达载体第56页
     ·植物表达载体构建过程第56-58页
   ·遗传转化体系优化第58-73页
     ·转化过程第58-60页
     ·抗生素敏感性试验第60-61页
     ·外植体选择第61-62页
     ·农杆菌菌株第62-63页
     ·农杆菌浓度第63-64页
     ·共培养时间第64-65页
     ·C 源第65页
     ·凝固剂第65-66页
     ·85 继代次数第66-67页
     ·形态学分析第67-72页
       ·愈伤组织形态以及出胚情况分析第67-69页
       ·胚性愈伤组织组织第69页
       ·棉胚发生过程第69-70页
       ·畸形胚第70-72页
     ·小结第72-73页
   ·以胚性愈伤为受体的转化体系优化第73-79页
     ·转化过程第73-75页
     ·抗生素敏感性试验第75-76页
     ·外植体选择第76页
     ·农杆菌菌株第76页
     ·农杆菌浓度第76-77页
     ·继代次数第77-78页
     ·小结第78-79页
   ·茎尖再生转化体系优化第79-91页
     ·转化过程第79-81页
     ·抗生素敏感性试验第81-82页
     ·生长素对茎尖形态建成作用第82-83页
     ·分裂素对茎尖形态建成作用第83-85页
       ·6 - BA 对茎尖形态建成作用第83-84页
       ·KT 对茎尖形态建成作用第84-85页
     ·针刺处理对转化效率的影响第85-86页
     ·茎尖类型对转化效率的影响第86-87页
     ·生根诱导时间对茎尖的影响第87-88页
     ·带下胚轴的带有下胚轴的茎尖生根诱导与不带下胚轴的茎尖生根比较第88-89页
     ·形态分析第89-91页
       ·丛生芽诱导第89-90页
       ·黄花苗与正常苗比较第90-91页
     ·小结第91页
   ·结论与展望第91-94页
     ·工作总结第91-93页
     ·创新点第93页
     ·研究展望第93-94页
参考文献第94-108页
致谢第108页

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