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基因2型牛病毒性腹泻病毒的分离、鉴定

中文摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第一章 文献综述第9-27页
 1 BVD 的发现与命名第9页
 2 BVDV 的病毒学分类地位第9-10页
 3 BVDV 的形态发生学第10-11页
 4 牛病毒性腹泻病毒的分子生物学特点第11-14页
   ·BVDV 基因组结构第11-12页
   ·BVDV 基因组编码的蛋白质第12-14页
 5 BVDV 的分子病流行学第14-15页
 6 BVDV 的生物型与毒力第15-16页
 7 CP 型BVDV 与NCP 型BVDV 之间转化的机制[49~55]第16-17页
 8 BVDV 流行原因分析第17-18页
   ·BVDV 基因型的多样性第17页
   ·BVDV 在流行病学方面的复杂性第17-18页
   ·交叉感染第18页
 9 BVDV 的致病机理第18-20页
   ·持续感染与免疫耐受第18页
   ·粘膜病第18-19页
   ·繁殖障碍第19页
   ·免疫抑制第19-20页
   ·血小板减少症第20页
 10 我国BVDV 的研究进展第20-23页
   ·国内牛病毒性腹泻病的流行病学第20-22页
   ·我国BVDV 疫苗的研究情况第22-23页
 11 BVDV 诊断技术研究进展第23-26页
   ·抗体诊断第23-24页
   ·抗原诊断方法第24-26页
 12 本研究要解决的问题及意义第26-27页
第二章 基因1 型和2 型牛病毒性腹泻病毒RT-PCR 检测方法的建立第27-38页
 1 材料第27-29页
   ·毒株、细胞、菌种第27页
   ·样品来源第27-28页
   ·基础培养基、马血清、RT-PCR 所用酶及试剂、试剂盒第28页
   ·主要仪器第28页
   ·引物第28-29页
 2 方法第29-35页
   ·标准毒株的增殖及RT-PCR第29-31页
   ·样品RT-PCR 检测第31-35页
 3 结果第35-37页
   ·参考株NADL(BVDV-1)和890(BVDV-2)的扩增第35-36页
   ·疑似BVDV 样品的 RT-PCR 检测第36页
   ·测序结果与序列分析第36-37页
 4 讨论第37-38页
第三章 基因2 型(BVDV-2)牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定第38-48页
 1 材料第38-39页
   ·病料来源第38页
   ·标准毒株、细胞系、主要试剂、载体、菌种第38-39页
   ·主要设备与仪器第39页
   ·扩增5’UTR 的引物第39页
 2 方法第39-42页
   ·BVDV-2 的细胞分离与传代第39页
   ·RT-PCR 鉴定第39-41页
   ·分离毒株的形态观察第41-42页
   ·分离毒株的间接免疫荧光试验(IFA)第42页
 3 结果第42-46页
   ·RT-PCR 鉴定结果第42-43页
   ·测序结果与分析第43页
   ·病毒的细胞培养第43-44页
   ·IFA 检测结果第44-45页
   ·电镜观察结果第45-46页
 4 讨论第46-48页
第四章 BVDV-2 分离株E2 和N52-3 基因的克隆及序列分析第48-62页
 1 材料和方法第48-53页
   ·分离毒株第48页
   ·主要试剂、载体及菌种第48-49页
   ·引物的设计与合成第49页
   ·RNA 的提取第49页
   ·CDNA 的合成第49-50页
   ·PCR 扩增第50-51页
   ·PCR 产物的鉴定第51页
   ·PCR 产物的回收与克隆第51页
   ·重组质粒的酶切鉴定第51-52页
   ·PCR 扩增产物的序列测定与分析第52-53页
 2 结果第53-60页
   ·BVDV-2 分离株E2 基因RT-PCR 扩增及E2 重组质粒的酶切鉴定第53页
   ·BVDV-2 分离株N52-3 基因RT-PCR 扩增及克隆产物的酶切鉴定第53-54页
   ·分离株E2 基因和NS 2/3 的核苷酸及推导氨基酸序列第54页
   ·分离株E2 基因序列分析第54-57页
   ·分离株N52-3 基因序列分析第57-60页
 3 讨论第60-62页
结论第62-63页
参考文献第63-68页
致谢第68-69页
个人简历第69-70页
附录第70-76页

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