中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-27页 |
1 BVD 的发现与命名 | 第9页 |
2 BVDV 的病毒学分类地位 | 第9-10页 |
3 BVDV 的形态发生学 | 第10-11页 |
4 牛病毒性腹泻病毒的分子生物学特点 | 第11-14页 |
·BVDV 基因组结构 | 第11-12页 |
·BVDV 基因组编码的蛋白质 | 第12-14页 |
5 BVDV 的分子病流行学 | 第14-15页 |
6 BVDV 的生物型与毒力 | 第15-16页 |
7 CP 型BVDV 与NCP 型BVDV 之间转化的机制[49~55] | 第16-17页 |
8 BVDV 流行原因分析 | 第17-18页 |
·BVDV 基因型的多样性 | 第17页 |
·BVDV 在流行病学方面的复杂性 | 第17-18页 |
·交叉感染 | 第18页 |
9 BVDV 的致病机理 | 第18-20页 |
·持续感染与免疫耐受 | 第18页 |
·粘膜病 | 第18-19页 |
·繁殖障碍 | 第19页 |
·免疫抑制 | 第19-20页 |
·血小板减少症 | 第20页 |
10 我国BVDV 的研究进展 | 第20-23页 |
·国内牛病毒性腹泻病的流行病学 | 第20-22页 |
·我国BVDV 疫苗的研究情况 | 第22-23页 |
11 BVDV 诊断技术研究进展 | 第23-26页 |
·抗体诊断 | 第23-24页 |
·抗原诊断方法 | 第24-26页 |
12 本研究要解决的问题及意义 | 第26-27页 |
第二章 基因1 型和2 型牛病毒性腹泻病毒RT-PCR 检测方法的建立 | 第27-38页 |
1 材料 | 第27-29页 |
·毒株、细胞、菌种 | 第27页 |
·样品来源 | 第27-28页 |
·基础培养基、马血清、RT-PCR 所用酶及试剂、试剂盒 | 第28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
·引物 | 第28-29页 |
2 方法 | 第29-35页 |
·标准毒株的增殖及RT-PCR | 第29-31页 |
·样品RT-PCR 检测 | 第31-35页 |
3 结果 | 第35-37页 |
·参考株NADL(BVDV-1)和890(BVDV-2)的扩增 | 第35-36页 |
·疑似BVDV 样品的 RT-PCR 检测 | 第36页 |
·测序结果与序列分析 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-38页 |
第三章 基因2 型(BVDV-2)牛病毒性腹泻病毒的分离与鉴定 | 第38-48页 |
1 材料 | 第38-39页 |
·病料来源 | 第38页 |
·标准毒株、细胞系、主要试剂、载体、菌种 | 第38-39页 |
·主要设备与仪器 | 第39页 |
·扩增5’UTR 的引物 | 第39页 |
2 方法 | 第39-42页 |
·BVDV-2 的细胞分离与传代 | 第39页 |
·RT-PCR 鉴定 | 第39-41页 |
·分离毒株的形态观察 | 第41-42页 |
·分离毒株的间接免疫荧光试验(IFA) | 第42页 |
3 结果 | 第42-46页 |
·RT-PCR 鉴定结果 | 第42-43页 |
·测序结果与分析 | 第43页 |
·病毒的细胞培养 | 第43-44页 |
·IFA 检测结果 | 第44-45页 |
·电镜观察结果 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
第四章 BVDV-2 分离株E2 和N52-3 基因的克隆及序列分析 | 第48-62页 |
1 材料和方法 | 第48-53页 |
·分离毒株 | 第48页 |
·主要试剂、载体及菌种 | 第48-49页 |
·引物的设计与合成 | 第49页 |
·RNA 的提取 | 第49页 |
·CDNA 的合成 | 第49-50页 |
·PCR 扩增 | 第50-51页 |
·PCR 产物的鉴定 | 第51页 |
·PCR 产物的回收与克隆 | 第51页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第51-52页 |
·PCR 扩增产物的序列测定与分析 | 第52-53页 |
2 结果 | 第53-60页 |
·BVDV-2 分离株E2 基因RT-PCR 扩增及E2 重组质粒的酶切鉴定 | 第53页 |
·BVDV-2 分离株N52-3 基因RT-PCR 扩增及克隆产物的酶切鉴定 | 第53-54页 |
·分离株E2 基因和NS 2/3 的核苷酸及推导氨基酸序列 | 第54页 |
·分离株E2 基因序列分析 | 第54-57页 |
·分离株N52-3 基因序列分析 | 第57-60页 |
3 讨论 | 第60-62页 |
结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
个人简历 | 第69-70页 |
附录 | 第70-76页 |