| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-25页 |
| ·寡肽转运蛋白 PEPT2 及氨甲环酸衍生物 | 第9-12页 |
| ·寡肽转运蛋白 PepT2 的结构与功能 | 第9-11页 |
| ·氨甲环酸衍生物 | 第11-12页 |
| ·质粒重组及诱导表达 | 第12-24页 |
| ·质粒载体 | 第12-16页 |
| ·实验室常用的克隆载体 | 第13-15页 |
| ·原核表达中常用的表达载体 | 第15-16页 |
| ·目标基因的扩增 | 第16-17页 |
| ·构建重组质粒所需要的酶 | 第17-19页 |
| ·限制性内切酶 | 第17-19页 |
| ·DNA 连接酶 | 第19页 |
| ·重组质粒的转化方法 | 第19-21页 |
| ·CaCl_2转化法 | 第20页 |
| ·电转化法 | 第20-21页 |
| ·其它转化法 | 第21页 |
| ·重组质粒的筛选方法 | 第21-23页 |
| ·平板筛选法 | 第22页 |
| ·电泳筛选法 | 第22-23页 |
| ·PCR 筛选法 | 第23页 |
| ·重组质粒诱导表达的方法 | 第23-24页 |
| ·IPTG 导表达 | 第23-24页 |
| ·温度诱导表达 | 第24页 |
| ·本课题的选题意义及主要内容 | 第24-25页 |
| 第二章 寡肽转运蛋白 PEPT2(1-134)的原核表达 | 第25-36页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·实验仪器与设备 | 第25页 |
| ·实验试剂 | 第25-26页 |
| ·实验菌种及载体质粒 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-31页 |
| ·PepT2(1-134)基因的 PCR 扩增 | 第26-27页 |
| ·PepT2(1-134)基因序列的引物设计 | 第26-27页 |
| ·PepT2(1-134)基因的 PCR 扩增 | 第27页 |
| ·重组质粒 PepT2(1-134) -pET30a(+)的制备 | 第27-29页 |
| ·载体质粒的制备 | 第27页 |
| ·PCR 产物和 pET30a(+)质粒的双酶切 | 第27-28页 |
| ·PepT2(1-134)基因与 pET30a(+)载体的连接 | 第28-29页 |
| ·重组质粒 PepT2(1-134) -pET30a(+)的转化 | 第29页 |
| ·CaCl2法制备 DH5α感受态细胞 | 第29页 |
| ·PepT2(1-134) -pET30a(+)质粒导入感受态细胞 | 第29页 |
| ·重组质粒 PET30a(+)-PepT2(1-134)的检测与鉴定 | 第29-31页 |
| ·PET30a(+)-PepT2(1-134)的电泳检测 | 第29-30页 |
| ·PET30a(+)-PepT2(1-134)的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·PET30a(+)-PepT2(1-134)质粒 PCR 鉴定 | 第30页 |
| ·PET30a(+)-PepT2(1-134)质粒测序 | 第30-31页 |
| ·PepT2(1-134)的诱导表达 | 第31页 |
| ·实验结果与讨论 | 第31-35页 |
| ·PepT2(1-134)基因的 PCR 扩增 | 第31-32页 |
| ·PET30a(+)-PepT2(1-134)表达质粒的构建 | 第32-33页 |
| ·PET30a(+)-PepT2(1-134)表达质粒的 PCR 及酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·PET30a(+)-PepT2(1-134)的测序 | 第34页 |
| ·PepT2(1-134)蛋白的诱导表达 | 第34-35页 |
| ·本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 氨甲环酰类物质的合成及其性质研究 | 第36-53页 |
| ·材料与方法 | 第36-41页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·实验方法 | 第37-40页 |
| ·氨甲环酸氨基的保护 | 第37页 |
| ·氨甲环酰组氨酸的合成 | 第37-39页 |
| ·氨甲环酰谷氨酰苯丙氨酸的合成 | 第39页 |
| ·氨甲环酰谷氨酰赖氨酸的合成 | 第39页 |
| ·氨甲环酰丝氨酰酪氨酸的合成 | 第39页 |
| ·氨甲环酰亮氨酰组氨酸的合成 | 第39页 |
| ·氨甲环酰丝氨酰苯丙氨酸的合成 | 第39-40页 |
| ·氨甲环酸修饰物与小牛胸腺 DNA 的相互作用 | 第40-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-51页 |
| ·氨甲环酰类衍生物的结构表征 | 第41-47页 |
| ·氨甲环酰组氨酸的结构表征 | 第41-42页 |
| ·氨甲环酰谷氨酰苯丙氨酸的结构表征 | 第42-43页 |
| ·氨甲环酰谷氨酰赖氨酸的结构表征 | 第43-44页 |
| ·氨甲环酰丝氨酰酪氨酸的结构表征 | 第44-45页 |
| ·氨甲环酰亮氨酰组氨酸的结构表征 | 第45-46页 |
| ·氨甲环酰丝氨酰苯丙氨酸的结构表征 | 第46-47页 |
| ·紫外光谱法研究氨甲环酸衍生物与 DNA 的相互作用 | 第47-51页 |
| ·氨甲环酰组氨酸与 DNA 的相互作用 | 第47-48页 |
| ·氨甲环酰谷氨酰苯丙氨酸与 DNA 的相互作用 | 第48-49页 |
| ·氨甲环酰谷氨酰赖氨酸与 DNA 的相互作用 | 第49-50页 |
| ·氨甲环酰丝氨酰酪氨酸与 DNA 的相互作用 | 第50页 |
| ·氨甲环酰亮氨酰组氨酸与 DNA 的相互作用 | 第50-51页 |
| ·氨甲环酰丝氨酰苯丙氨酸与 DNA 的相互作用 | 第51页 |
| ·本章小结 | 第51-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简历 | 第59页 |
