| 综述 | 第1-22页 |
| ·胆固醇(酯)检测的意义 | 第7-9页 |
| ·酶法测定胆固醇(酯)的研究进展 | 第9-14页 |
| ·酶试剂检测 | 第10-12页 |
| ·常规酶法检测 | 第10-11页 |
| ·胆固醇脱氢酶法 | 第11页 |
| ·荧光法 | 第11-12页 |
| ·电极法 | 第12-13页 |
| ·固定化酶 | 第13-14页 |
| ·热敏电阻法 | 第14页 |
| ·胆固醇酯酶研究进展 | 第14-16页 |
| ·胆固醇酯酶的晶体结构 | 第16-18页 |
| 参考文献 | 第18-22页 |
| 实验部分 | 第22-69页 |
| 中文摘要 | 第22-24页 |
| 英文摘要 | 第24-26页 |
| 一 产胆固醇酯酶菌株的筛选及鉴定 | 第26-34页 |
| 1 材料 | 第26-27页 |
| ·主要菌株 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| 2.试验方法 | 第27-30页 |
| ·菌体培养 | 第27-28页 |
| ·上清液收集及菌体破碎 | 第28页 |
| ·酶活力的测定及酶活力单位定义 | 第28-29页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第29页 |
| ·细菌分离培养 | 第29页 |
| ·细菌的生理、生化鉴定 | 第29页 |
| ·抗生素敏感试验 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-32页 |
| ·产酶菌株的筛选 | 第30页 |
| ·菌种鉴定 | 第30-32页 |
| ·形态学特征 | 第30-31页 |
| ·生理、生化特性 | 第31-32页 |
| ·药敏试验 | 第32页 |
| 4 讨论 | 第32页 |
| 参考文献 | 第32-34页 |
| 二 胆固醇酯酶高产菌株的发酵条件优化 | 第34-47页 |
| 1 材料 | 第34-35页 |
| ·菌种 | 第34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| 2 试验方法 | 第35-38页 |
| ·菌体培养 | 第35页 |
| ·粗酶液提取 | 第35页 |
| ·酶活力的测定及酶活力单位定义 | 第35页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第35页 |
| ·底物及其类似物对酶形成的影响 | 第35-36页 |
| ·卵磷脂含量对酶形成的影响 | 第36页 |
| ·油酸含量对酶形成的影响 | 第36页 |
| ·碳源对胆固醇酯酶形成的影响 | 第36页 |
| ·氮源对胆固醇酯酶形成的影响 | 第36页 |
| ·培养基成分正交实验分析 | 第36-37页 |
| ·Triton X-100含量对对酶形成的影响 | 第37页 |
| ·温度对酶形成的影响 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37页 |
| ·通氧量对酶形成的影响 | 第37页 |
| ·接种量对酶形成的影响 | 第37-38页 |
| ·培养时间对酶形成的影响 | 第38页 |
| ·旋转摇床速度对酶形成的影响 | 第38页 |
| 3 试验结果 | 第38-45页 |
| ·底物及其类似物对酶形成的影响 | 第38页 |
| ·卵磷脂含量对酶形成的影响 | 第38-39页 |
| ·油酸含量对酶形成的影响 | 第39页 |
| ·碳源对胆固醇酯酶形成的影响 | 第39-40页 |
| ·氮源对胆固醇酯酶形成的影响 | 第40页 |
| ·培养基成分正交实验分析 | 第40-42页 |
| ·Triton X-100含量对对酶形成的影响 | 第42页 |
| ·温度对酶形成的影响 | 第42-43页 |
| ·培养基pH对胆固醇酯酶产量的影响 | 第43页 |
| ·通氧量对酶形成的影响 | 第43-44页 |
| ·接种量对酶形成的影响 | 第44页 |
| ·培养时间对酶形成的影响 | 第44-45页 |
| ·旋转摇床速度对酶形成的影响 | 第45页 |
| 4 讨论 | 第45页 |
| 参考文献 | 第45-47页 |
| 三 酶的分离纯化和鉴定 | 第47-59页 |
| 1 材料 | 第47-48页 |
| ·菌株 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47-48页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| 2 试验方法 | 第48-53页 |
| ·粗酶液提取 | 第48页 |
| ·酶活力的测定及酶活力单位定义 | 第48页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第48-49页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第49-50页 |
| ·DEAE-Sepharose FF阳离子交换层析 | 第50-51页 |
| ·DEAE-Sepharose FF层析预试 | 第50页 |
| ·DEAE-Sepharose FF层析柱预处理 | 第50页 |
| ·DEAE-Sepharose FF层析 | 第50-51页 |
| ·Phenyl-Sepharose CL-4B疏水层析 | 第51页 |
| ·SDS—PAGE电泳 | 第51-52页 |
| ·相关溶液的配制 | 第51-52页 |
| ·电泳 | 第52页 |
| ·PAGE电泳 | 第52-53页 |
| ·相关溶液的配制 | 第52-53页 |
| ·电泳 | 第53页 |
| ·HPLC检测 | 第53页 |
| 3 结果 | 第53-57页 |
| ·硫酸铵沉淀结果 | 第53-54页 |
| ·DEAE-Sepharose FF层析结果 | 第54-55页 |
| ·Phenyl Sepharose CL-4B层析结果 | 第55-56页 |
| ·SDS-PAGE电泳结果 | 第56页 |
| ·纯度鉴定 | 第56-57页 |
| 4 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-59页 |
| 四 胆固醇酯酶的酶学特性 | 第59-69页 |
| 1 材料 | 第59页 |
| ·粗酶液的提取 | 第59页 |
| ·主要试剂 | 第59页 |
| ·主要仪器 | 第59页 |
| 2 试验方法 | 第59-61页 |
| ·pH对酶活性的影响 | 第59-60页 |
| ·pH对酶稳定性的影响 | 第60页 |
| ·温度对酶活性的影响 | 第60页 |
| ·温度对酶稳定性的影响 | 第60页 |
| ·胆固醇酯酶的底物特异性 | 第60-61页 |
| ·底物、pH及温度对酶促反应速度的影响 | 第61页 |
| ·部分金属离子和有机化合物对酶活性的影响 | 第61页 |
| 3 结果 | 第61-67页 |
| ·pH对酶活性的影响 | 第61-62页 |
| ·pH对酶稳定性的影响 | 第62页 |
| ·温度对酶活性的影响 | 第62-63页 |
| ·温度对酶稳定性的影响 | 第63页 |
| ·胆固醇酯酶的底物特异性 | 第63-64页 |
| ·胆固醇酯酶米氏常数 | 第64-65页 |
| ·胆固醇酯酶在不同pH条件下的米氏常数Km的测定 | 第65页 |
| ·胆固醇酯酶在不同温度条件下的米氏常数Km的测定 | 第65-66页 |
| ·抑制剂及激活剂对胆固醇酯酶活性的影响 | 第66-67页 |
| 4 讨论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-69页 |
| 总结 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 发表文章目录 | 第72-73页 |
