| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-22页 |
| ·海水养殖病原菌 | 第10页 |
| ·弧菌病及其致病机理 | 第10-12页 |
| ·弧菌病 | 第10-11页 |
| ·弧菌的致病机理 | 第11-12页 |
| ·重要的海水养殖病原菌—溶藻弧菌 | 第12-13页 |
| ·双精氨酸蛋白转运(Tat)系统和六型分泌系统(T6SS) | 第13-19页 |
| ·革兰氏阴性菌分泌系统 | 第13-15页 |
| ·双精氨酸蛋白转运系统 | 第15-17页 |
| ·双精氨酸蛋白转运系统的组成和功能 | 第15-16页 |
| ·双精氨酸蛋白转运系统底物蛋白 | 第16-17页 |
| ·双精氨酸蛋白转运系统在蛋白质工程中的应用 | 第17页 |
| ·六型分泌系统 | 第17-19页 |
| ·六型分泌系统的结构和功能 | 第17-19页 |
| ·六型分泌系统介导毒力表型多样性 | 第19页 |
| ·本课题的研究背景及意义 | 第19-22页 |
| 第2章 溶藻弧菌Tat蛋白转运系统基因簇的克隆和鉴定 | 第22-28页 |
| ·前言 | 第22页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·菌株和质粒以及引物 | 第22页 |
| ·主要分子生物学试剂及试剂盒 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-24页 |
| ·溶藻弧菌Tat蛋白转运系统基因簇的克隆及其测序 | 第22-24页 |
| ·基因序列及登陆号 | 第24页 |
| ·结果与讨论 | 第24-27页 |
| ·溶藻弧菌Tat蛋白转运系统基因簇的克隆 | 第24页 |
| ·tatABC基因簇的序列分析 | 第24-25页 |
| ·Tat蛋白转运系统底物蛋白分析 | 第25-27页 |
| ·小结 | 第27-28页 |
| 第3章 溶藻弧菌tatABC基因簇突变株和互补株的筛选和鉴定 | 第28-35页 |
| ·前言 | 第28页 |
| ·实验原理 | 第28页 |
| ·实验材料和方法 | 第28-32页 |
| ·菌株和质粒以及引物 | 第28-29页 |
| ·溶藻弧菌Tat相关无标记突变株的构建 | 第29-30页 |
| ·溶藻弧菌互补株的构建 | 第30-32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-34页 |
| ·筛选和鉴定基因簇的无标记突变株和互补株 | 第32-33页 |
| ·tatABC基因簇在TMAO还原酶分泌中的作用 | 第33-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| 第4章 tatABC基因簇对运动性和生物被膜生成的影响 | 第35-38页 |
| ·前言 | 第35页 |
| ·实验材料和方法 | 第35页 |
| ·群游性(swarming)和游动性(swimming)的测定 | 第35页 |
| ·生物被膜生成测定 | 第35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-37页 |
| ·tatABC基因簇对运动性的影响 | 第35-36页 |
| ·tatABC基因簇对生物被膜生成的影响 | 第36-37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| 第5章 tatABC基因簇对生长和环境应激的影响 | 第38-42页 |
| ·前言 | 第38页 |
| ·实验材料和方法 | 第38页 |
| ·生长曲线的测定 | 第38页 |
| ·各种应激对生长影响的测定 | 第38页 |
| ·结果与讨论 | 第38-41页 |
| ·tatABC基因簇对生长的影响 | 第38-39页 |
| ·tatABC基因簇对响应各种应激的影响 | 第39-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 第6章 溶藻弧菌tatABC基因簇对胞外蛋白酶合成和毒力的影响 | 第42-46页 |
| ·前言 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·抗体的制备 | 第42页 |
| ·蛋白印迹 | 第42-43页 |
| ·碱性丝氨酸蛋白酶的检测 | 第43页 |
| ·斑马鱼毒力试验 | 第43页 |
| ·结果与讨论 | 第43-45页 |
| ·tatABC基因簇对碱性丝氨酸蛋白酶合成的影响 | 第43-44页 |
| ·tatABC基因簇对斑马鱼毒性影响 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45-46页 |
| 第7章 溶藻弧菌六型分泌系统(T6SS)基因簇的克隆和鉴定 | 第46-52页 |
| ·前言 | 第46页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46页 |
| ·溶藻弧菌T6SS系统基因簇的克隆及其测序 | 第46页 |
| ·基因序列及登陆号 | 第46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-51页 |
| ·溶藻弧菌T6SS系统基因簇的克隆 | 第46-47页 |
| ·基因簇的序列分析 | 第47-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第8章 溶藻弧菌T6SS基因簇突变株的筛选和鉴定 | 第52-58页 |
| ·前言 | 第52页 |
| ·实验材料和方法 | 第52-53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-57页 |
| ·筛选和鉴定T6SS基因簇的无标记突变株 | 第53-55页 |
| ·T6SS对溶藻弧菌碱性丝氨酸蛋白酶合成的影响 | 第55-56页 |
| ·T6SS对溶藻弧菌毒性的影响 | 第56-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第9章 结论与展望 | 第58-60页 |
| ·结论 | 第58页 |
| ·展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 论文发表 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
