| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-8页 |
| 引言 | 第8-20页 |
| 1 材料与方法 | 第20-31页 |
| 1．1 材料 | 第20页 |
| 1．2 方法 | 第20-31页 |
| 1．2．1 质粒PBIL的大量提取、纯化及鉴定 | 第20-23页 |
| 1．2．1．1 质粒PBIL的大量提取 | 第20-21页 |
| 1．2．1．2 质粒PBIL的纯化 | 第21-22页 |
| 1．2．1．3 质粒PBIL的酶切鉴定 | 第22页 |
| 1．2．1．4 质粒PBIL的PCR分析 | 第22-23页 |
| 1．2．2 LFYcDNA（UBIp）植物表达载体PBIL转化农杆菌 | 第23页 |
| 1．2．2．1 农杆菌的鉴定 | 第23页 |
| 1．2．2．2 冻融法将PBIL导入根癌农杆菌EHA105 | 第23页 |
| 1．2．2．3 农杆菌中质粒的鉴定 | 第23页 |
| 1．2．3 培养基 | 第23-24页 |
| 1．2．4 甘蔗组织培养与植株再生 | 第24页 |
| 1．2．4．1 外植体来源及处理 | 第24页 |
| 1．2．4．2 愈伤组织的继代、分化出苗 | 第24页 |
| 1．2．4．3 再生植株的生根 | 第24页 |
| 1．2．5 农杆菌法将外源基因LEAFY导入甘蔗 | 第24-25页 |
| 1．2．5．1 Kan梯度预实验 | 第24页 |
| 1．2．5．2 农杆菌侵染愈伤组织与植株再生 | 第24-25页 |
| 1．2．6 基因枪法将LEAFY基因导入甘蔗 | 第25-27页 |
| 1．2．6．1 质粒DNA的准备 | 第25页 |
| 1．2．6．2 受体材料的预处理 | 第25-26页 |
| 1．2．6．3 金粉的准备 | 第26页 |
| 1．2．6．4 微粒载体制备 | 第26页 |
| 1．2．6．5 装弹 | 第26页 |
| 1．2．6．6 轰击 | 第26页 |
| 1．2．6．7 过渡培养 | 第26-27页 |
| 1．2．7 转化植株的GUS活性检测 | 第27页 |
| 1．2．8 转化植株总DNA的PCR分析 | 第27-28页 |
| 1．2．8．1 转化植株总DNA的提取 | 第27-28页 |
| 1．2．8．2 转化植株总DNA的PCR扩增 | 第28页 |
| 1．2．9 转化植株总DNA的PCR-Southern杂交分析 | 第28-31页 |
| 1．2．9．1 杂交溶液的制备 | 第28页 |
| 1．2．9．2 探针的制备 | 第28-29页 |
| 1．2．9．3 探针的标记 | 第29页 |
| 1．2．9．4 DNA转移与固定 | 第29-30页 |
| 1．2．9．5 杂交 | 第30页 |
| 1．2．9．6 检测 | 第30-31页 |
| 2． 结果与分析 | 第31-40页 |
| 2．1 质粒PBIL的PCR扩增 | 第31页 |
| 2．2 甘蔗外植体对Kan浓度的敏感性 | 第31-32页 |
| 2．3 根癌农杆菌法将LEAFY基因导入甘蔗 | 第32-37页 |
| 2．3．1 转化受体材料的选择 | 第32页 |
| 2．3．2 预培养对根癌农杆菌转化效率的影响 | 第32-34页 |
| 2．3．3 乙酰丁香酮对根癌农杆菌转化效率的影响 | 第34页 |
| 2．3．4 超声波处理对根癌农杆菌转化效率的影响 | 第34-35页 |
| 2．3．5 不同甘蔗品种对根癌农杆菌转化效率的影响 | 第35页 |
| 2．3．6 抗性愈伤组织与转化植株的获得 | 第35-36页 |
| 2．3．7 GUS活性检测 | 第36页 |
| 2．3．8 转基因植株的PCR及Southern blotting分析 | 第36-37页 |
| 2．4 基因枪法将LEAFY基因导入甘蔗 | 第37-40页 |
| 2．4．1 预培养对基因枪法转化甘蔗效率的影响 | 第37-38页 |
| 2．4．2 甘露醇处理对基因枪法转化甘蔗效率的影响 | 第38页 |
| 2．4．3 不同甘蔗品种对基因枪法转化甘蔗效率的影响 | 第38-39页 |
| 2．4．4 抗性愈伤组织与转化植株的获得及鉴定 | 第39-40页 |
| 3． 讨论 | 第40-41页 |
| 4． 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 图片 | 第48-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 附录 | 第52-56页 |
