致谢 | 第1-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
英文摘要 | 第12-17页 |
主要名词的英文缩写 | 第17-18页 |
第一章 前言(文献综述) | 第18-59页 |
1.1 卵巢癌的病因及分子生物学研究现况 | 第18-35页 |
1.1.1 卵巢癌流行病学及病因学 | 第18-21页 |
1.1.2 卵巢癌分子生物学研究现况 | 第21-35页 |
1.1.2.1 抑癌基因的改变 | 第21-25页 |
1.1.2.2 癌基因的改变 | 第25-26页 |
1.1.2.3 生长因子的改变 | 第26-29页 |
1.1.2.4 细胞凋亡与卵巢癌 | 第29-35页 |
1.2 雌孕激素与卵巢癌的关系 | 第35-47页 |
1.2.1 雌孕激素的生物合成与作用机制 | 第35-43页 |
1.2.2 性激素与卵巢癌的关系 | 第43-47页 |
1.3 激素替代治疗与卵巢癌 | 第47-59页 |
1.3.1 激素替代治疗的基本原理和在更年期妇女治疗中的作用与地位 | 第47-48页 |
1.3.2 卵巢恶性肿瘤患者卵巢去势后的生理改变特点 | 第48-49页 |
1.3.3 激素替代治疗与卵巢癌发病的关系 | 第49-52页 |
1.3.4 激素替代治疗与卵巢癌预后的关系 | 第52-53页 |
1.3.5 雌、孕激素对卵巢癌生物学特性的影响 | 第53-58页 |
1.3.6 激素替代治疗对卵巢癌治疗中存在问题和本项目研究的目的 | 第58-59页 |
第二章 材料与方法 | 第59-86页 |
2.1 研究材料来源 | 第59页 |
2.2 肿瘤细胞系培养与传代 | 第59-61页 |
2.2.1 药物与试剂 | 第59页 |
2.2.2 主要仪器 | 第59页 |
2.2.3 培养液、消化液配制 | 第59-60页 |
2.2.4 卵巢癌细胞的培养 | 第60-61页 |
2.2.5 雌、孕激素试剂的配制 | 第61页 |
2.3 MTT法检测雌、孕激素对卵巢癌细胞的抑制作用 | 第61-63页 |
2.3.1 MTT法的基本原理 | 第61-62页 |
2.3.2 主要试剂来源及其配制 | 第62页 |
2.3.3 主要仪器 | 第62页 |
2.3.4 方法 | 第62-63页 |
2.3.5 结果判断 | 第63页 |
2.4 MTT法检测雌孕激素对卵巢癌细胞生长21天的影响 | 第63-64页 |
2.4.1 方法 | 第63页 |
2.4.2 结果分析 | 第63-64页 |
2.5 细胞计数法检测雌孕激素对卵巢癌细胞生长20天的影响 | 第64-65页 |
2.5.1 主要试剂 | 第64页 |
2.5.2 主要仪器 | 第64页 |
2.5.3 实验方法 | 第64-65页 |
2.5.4 结果分析 | 第65页 |
2.6 卵巢癌细胞ER、PR和AR蛋白表达的测定 | 第65-66页 |
2.6.1 试剂来源 | 第65页 |
2.6.2 肿瘤细胞制片 | 第65-66页 |
2.6.3 免疫组织化学法测定肿瘤细胞ER、PR和AR蛋白的表达 | 第66页 |
2.6.4 结果分析 | 第66页 |
2.7 不同浓度雌孕激素作用后卵巢癌细胞ERα、ERβ及PRmRNA表达测定(RT-PCR法) | 第66-74页 |
2.7.1 主要试剂及其配制 | 第67页 |
2.7.2 主要仪器 | 第67页 |
2.7.3 防止RNA酶污染的措施 | 第67页 |
2.7.4 肿瘤细胞总RNA提取 | 第67-68页 |
2.7.5 RNA含量用分光光度计检测 | 第68页 |
2.7.6 RNA完整性的检测 | 第68-69页 |
2.7.7 Dnase处理RNA | 第69-70页 |
2.7.8 cDNA合成 | 第70-71页 |
2.7.9 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定PR、ERα和ERβmRNA表达 | 第71-74页 |
2.8 流式细胞仪检测雌、孕激素对卵巢癌细胞生长周期的影响 | 第74-76页 |
2.8.1 原理 | 第74页 |
2.8.2 主要试剂 | 第74-75页 |
2.8.3 主要仪器 | 第75页 |
2.8.4 方法 | 第75-76页 |
2.9 雌孕激素对卵巢癌细胞凋亡的影响 | 第76-82页 |
2.9.1 流式细胞术Annexin-V染色法测不同雌孕激素对卵巢癌细胞凋亡的影响 | 第76-79页 |
2.9.2 DNA降解分析法检测不同浓度的雌孕激素对卵巢癌细胞凋亡的影响 | 第79-81页 |
2.9.3 DNA末端原位标记法(TUNEL)检测不同浓度的雌孕激素对卵巢癌细胞凋亡的影响 | 第81-82页 |
2.10 不同浓度雌孕激素对卵巢癌细胞转化生长因子α(TGF-α)蛋白表达的影响 | 第82-85页 |
2.10.1 收集、纯化经不同浓度雌孕激素作用后两种卵巢癌细胞株培养液中的蛋白质 | 第82页 |
2.10.2 Western Blot方法检测不同浓度雌孕激素作用后卵巢癌细胞转化生长因子α(TGF-α)蛋白表达 | 第82-85页 |
2.11 统计学方法 | 第85-86页 |
第三章 MTT法检测雄孕激素对卵巢癌细胞的抑制作用 | 第86-94页 |
3.1 本项实验研究的目的 | 第86页 |
3.2 结果 | 第86-92页 |
3.2.1 17-β雌二醇对卵巢癌细胞株HO8910增殖的作用 | 第86-88页 |
3.2.2 孕酮对卵巢癌细胞株HO8910增殖的作用 | 第88-89页 |
3.2.3 17-β雌二醇与孕酮联合对卵巢癌细胞株HO8910增殖的作用 | 第89-91页 |
3.2.4 不同浓度雌激素对卵巢癌细胞株PE04和PE014增殖的作用 | 第91页 |
3.2.5 不同浓度孕激素对卵巢癌细胞株PE04和PE014增殖的作用 | 第91-92页 |
3.3 小结 | 第92-94页 |
第四章 17-β雌二醇、孕酮对卵巢癌细胞生长曲线的影响 | 第94-106页 |
4.1 本项实验研究的目的 | 第94页 |
4.2 结果 | 第94-104页 |
4.2.1 不同浓度17-β雌二醇对卵巢癌HO8910细胞生长21天的影响 | 第94-95页 |
4.2.2 不同浓度孕酮对卵巢癌HO8910细胞生长21天的影响 | 第95页 |
4.2.3 不同浓度17-β雌二醇与孕酮联合对卵巢癌HO8910细胞生长21天的影响 | 第95-96页 |
4.2.4 不同浓度17-β雌二醇对卵巢癌PE04细胞生长20天的影响 | 第96-98页 |
4.2.5 不同浓度孕酮对卵巢癌PE04细胞生长20天的影响 | 第98-100页 |
4.2.6 不同浓度17-β雌二醇对卵巢癌PE014细胞生长20天的影响 | 第100-102页 |
4.2.7 不同浓度孕酮对卵巢癌PE014细胞生长20天的影响 | 第102-104页 |
4.3 小结 | 第104-106页 |
第五章 不同浓度雌孕激素对卵巢癌细胞系雌激素受体和孕激素受体表达的影响 | 第106-113页 |
5.1 本项实验研究的目的 | 第106页 |
5.2 实验结果 | 第106-112页 |
5.2.1 17-β雌二醇、孕酮及17-β雌二醇和孕酮混合培养液对卵巢癌细胞株HO8910、A2780的ER、PR和AR的表达的影响 | 第106-109页 |
5.2.2 不同浓度雌孕激素作用后卵巢癌细胞ERα、ERβ及PRmRNA表达 | 第109-112页 |
5.3 小结 | 第112-113页 |
第六章 雌、孕激素对卵巢癌细胞PE04PE014增殖周期的影响 | 第113-118页 |
6.1 本项实验研究的目的 | 第113页 |
6.2 实验结果 | 第113-117页 |
6.3 小结 | 第117-118页 |
第七章 不同浓度雌、孕激素对卵巢癌细胞凋亡的作用 | 第118-125页 |
7.1 本项实验研究的目的 | 第118页 |
7.2 结果 | 第118-123页 |
7.2.1 采用Annexin-V染色流式细胞术检测细胞凋亡 | 第118-122页 |
7.2.2 DNA琼脂糖电泳分析法测雌孕激素对卵巢癌细胞凋亡的影响 | 第122-123页 |
7.2.3 DNA末端原位标记染色法(TUNEL)检测不同浓度雌、孕激素对卵巢癌细胞HO8910凋亡的影响 | 第123页 |
7.3 小结 | 第123-125页 |
第八章 雌、孕激素对卵巢癌细胞系TGF-α蛋白表达的影响 | 第125-131页 |
8.1 本项实验研究的目的 | 第125页 |
8.2 研究结果 | 第125-130页 |
8.2.1 不同浓度雌激素对卵巢癌PE04和PE014细胞中TGF-α蛋白表达的影响 | 第125-127页 |
8.2.2 不同浓度孕激素对卵巢癌PE04和PE014细胞中TGF-α蛋白表达的影响 | 第127-130页 |
8.3 小结 | 第130-131页 |
第九章 讨论 | 第131-149页 |
9.1 雌激素对卵巢癌细胞株体外增殖的影响 | 第131-135页 |
9.2 孕酮对卵巢癌细胞株体外增殖的影响 | 第135-137页 |
9.3 17-β雌二醇和孕酮联合对卵巢癌细胞株体外增殖的影响 | 第137页 |
9.4 雌、孕激素对卵巢癌细胞中激素受体表达的影响 | 第137-140页 |
9.5 雌、孕激素对卵巢癌细胞周期的影响 | 第140-141页 |
9.6 雌、孕激素诱导卵巢癌细胞凋亡的作用 | 第141-144页 |
9.7 雌、孕激素对卵巢癌细胞中TGF-α蛋白表达的影响 | 第144-147页 |
9.8 小结 | 第147-149页 |
参考文献 | 第149-165页 |