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雌、孕激素对卵巢癌细胞株体外生长的影响及其机制研究

致谢第1-9页
中文摘要第9-12页
英文摘要第12-17页
主要名词的英文缩写第17-18页
第一章 前言(文献综述)第18-59页
 1.1 卵巢癌的病因及分子生物学研究现况第18-35页
  1.1.1 卵巢癌流行病学及病因学第18-21页
  1.1.2 卵巢癌分子生物学研究现况第21-35页
   1.1.2.1 抑癌基因的改变第21-25页
   1.1.2.2 癌基因的改变第25-26页
   1.1.2.3 生长因子的改变第26-29页
   1.1.2.4 细胞凋亡与卵巢癌第29-35页
 1.2 雌孕激素与卵巢癌的关系第35-47页
  1.2.1 雌孕激素的生物合成与作用机制第35-43页
  1.2.2 性激素与卵巢癌的关系第43-47页
 1.3 激素替代治疗与卵巢癌第47-59页
  1.3.1 激素替代治疗的基本原理和在更年期妇女治疗中的作用与地位第47-48页
  1.3.2 卵巢恶性肿瘤患者卵巢去势后的生理改变特点第48-49页
  1.3.3 激素替代治疗与卵巢癌发病的关系第49-52页
  1.3.4 激素替代治疗与卵巢癌预后的关系第52-53页
  1.3.5 雌、孕激素对卵巢癌生物学特性的影响第53-58页
  1.3.6 激素替代治疗对卵巢癌治疗中存在问题和本项目研究的目的第58-59页
第二章 材料与方法第59-86页
 2.1 研究材料来源第59页
 2.2 肿瘤细胞系培养与传代第59-61页
  2.2.1 药物与试剂第59页
  2.2.2 主要仪器第59页
  2.2.3 培养液、消化液配制第59-60页
  2.2.4 卵巢癌细胞的培养第60-61页
  2.2.5 雌、孕激素试剂的配制第61页
 2.3 MTT法检测雌、孕激素对卵巢癌细胞的抑制作用第61-63页
  2.3.1 MTT法的基本原理第61-62页
  2.3.2 主要试剂来源及其配制第62页
  2.3.3 主要仪器第62页
  2.3.4 方法第62-63页
  2.3.5 结果判断第63页
 2.4 MTT法检测雌孕激素对卵巢癌细胞生长21天的影响第63-64页
  2.4.1 方法第63页
  2.4.2 结果分析第63-64页
 2.5 细胞计数法检测雌孕激素对卵巢癌细胞生长20天的影响第64-65页
  2.5.1 主要试剂第64页
  2.5.2 主要仪器第64页
  2.5.3 实验方法第64-65页
  2.5.4 结果分析第65页
 2.6 卵巢癌细胞ER、PR和AR蛋白表达的测定第65-66页
  2.6.1 试剂来源第65页
  2.6.2 肿瘤细胞制片第65-66页
  2.6.3 免疫组织化学法测定肿瘤细胞ER、PR和AR蛋白的表达第66页
  2.6.4 结果分析第66页
 2.7 不同浓度雌孕激素作用后卵巢癌细胞ERα、ERβ及PRmRNA表达测定(RT-PCR法)第66-74页
  2.7.1 主要试剂及其配制第67页
  2.7.2 主要仪器第67页
  2.7.3 防止RNA酶污染的措施第67页
  2.7.4 肿瘤细胞总RNA提取第67-68页
  2.7.5 RNA含量用分光光度计检测第68页
  2.7.6 RNA完整性的检测第68-69页
  2.7.7 Dnase处理RNA第69-70页
  2.7.8 cDNA合成第70-71页
  2.7.9 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定PR、ERα和ERβmRNA表达第71-74页
 2.8 流式细胞仪检测雌、孕激素对卵巢癌细胞生长周期的影响第74-76页
  2.8.1 原理第74页
  2.8.2 主要试剂第74-75页
  2.8.3 主要仪器第75页
  2.8.4 方法第75-76页
 2.9 雌孕激素对卵巢癌细胞凋亡的影响第76-82页
  2.9.1 流式细胞术Annexin-V染色法测不同雌孕激素对卵巢癌细胞凋亡的影响第76-79页
  2.9.2 DNA降解分析法检测不同浓度的雌孕激素对卵巢癌细胞凋亡的影响第79-81页
  2.9.3 DNA末端原位标记法(TUNEL)检测不同浓度的雌孕激素对卵巢癌细胞凋亡的影响第81-82页
 2.10 不同浓度雌孕激素对卵巢癌细胞转化生长因子α(TGF-α)蛋白表达的影响第82-85页
  2.10.1 收集、纯化经不同浓度雌孕激素作用后两种卵巢癌细胞株培养液中的蛋白质第82页
  2.10.2 Western Blot方法检测不同浓度雌孕激素作用后卵巢癌细胞转化生长因子α(TGF-α)蛋白表达第82-85页
 2.11 统计学方法第85-86页
第三章 MTT法检测雄孕激素对卵巢癌细胞的抑制作用第86-94页
 3.1 本项实验研究的目的第86页
 3.2 结果第86-92页
  3.2.1 17-β雌二醇对卵巢癌细胞株HO8910增殖的作用第86-88页
  3.2.2 孕酮对卵巢癌细胞株HO8910增殖的作用第88-89页
  3.2.3 17-β雌二醇与孕酮联合对卵巢癌细胞株HO8910增殖的作用第89-91页
  3.2.4 不同浓度雌激素对卵巢癌细胞株PE04和PE014增殖的作用第91页
  3.2.5 不同浓度孕激素对卵巢癌细胞株PE04和PE014增殖的作用第91-92页
 3.3 小结第92-94页
第四章 17-β雌二醇、孕酮对卵巢癌细胞生长曲线的影响第94-106页
 4.1 本项实验研究的目的第94页
 4.2 结果第94-104页
  4.2.1 不同浓度17-β雌二醇对卵巢癌HO8910细胞生长21天的影响第94-95页
  4.2.2 不同浓度孕酮对卵巢癌HO8910细胞生长21天的影响第95页
  4.2.3 不同浓度17-β雌二醇与孕酮联合对卵巢癌HO8910细胞生长21天的影响第95-96页
  4.2.4 不同浓度17-β雌二醇对卵巢癌PE04细胞生长20天的影响第96-98页
  4.2.5 不同浓度孕酮对卵巢癌PE04细胞生长20天的影响第98-100页
  4.2.6 不同浓度17-β雌二醇对卵巢癌PE014细胞生长20天的影响第100-102页
  4.2.7 不同浓度孕酮对卵巢癌PE014细胞生长20天的影响第102-104页
 4.3 小结第104-106页
第五章 不同浓度雌孕激素对卵巢癌细胞系雌激素受体和孕激素受体表达的影响第106-113页
 5.1 本项实验研究的目的第106页
 5.2 实验结果第106-112页
  5.2.1 17-β雌二醇、孕酮及17-β雌二醇和孕酮混合培养液对卵巢癌细胞株HO8910、A2780的ER、PR和AR的表达的影响第106-109页
  5.2.2 不同浓度雌孕激素作用后卵巢癌细胞ERα、ERβ及PRmRNA表达第109-112页
 5.3 小结第112-113页
第六章 雌、孕激素对卵巢癌细胞PE04PE014增殖周期的影响第113-118页
 6.1 本项实验研究的目的第113页
 6.2 实验结果第113-117页
 6.3 小结第117-118页
第七章 不同浓度雌、孕激素对卵巢癌细胞凋亡的作用第118-125页
 7.1 本项实验研究的目的第118页
 7.2 结果第118-123页
  7.2.1 采用Annexin-V染色流式细胞术检测细胞凋亡第118-122页
  7.2.2 DNA琼脂糖电泳分析法测雌孕激素对卵巢癌细胞凋亡的影响第122-123页
  7.2.3 DNA末端原位标记染色法(TUNEL)检测不同浓度雌、孕激素对卵巢癌细胞HO8910凋亡的影响第123页
 7.3 小结第123-125页
第八章 雌、孕激素对卵巢癌细胞系TGF-α蛋白表达的影响第125-131页
 8.1 本项实验研究的目的第125页
 8.2 研究结果第125-130页
  8.2.1 不同浓度雌激素对卵巢癌PE04和PE014细胞中TGF-α蛋白表达的影响第125-127页
  8.2.2 不同浓度孕激素对卵巢癌PE04和PE014细胞中TGF-α蛋白表达的影响第127-130页
 8.3 小结第130-131页
第九章 讨论第131-149页
 9.1 雌激素对卵巢癌细胞株体外增殖的影响第131-135页
 9.2 孕酮对卵巢癌细胞株体外增殖的影响第135-137页
 9.3 17-β雌二醇和孕酮联合对卵巢癌细胞株体外增殖的影响第137页
 9.4 雌、孕激素对卵巢癌细胞中激素受体表达的影响第137-140页
 9.5 雌、孕激素对卵巢癌细胞周期的影响第140-141页
 9.6 雌、孕激素诱导卵巢癌细胞凋亡的作用第141-144页
 9.7 雌、孕激素对卵巢癌细胞中TGF-α蛋白表达的影响第144-147页
 9.8 小结第147-149页
参考文献第149-165页

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