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猪特异性脂肪细胞膜蛋白基因的cDNA克隆和测序研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-8页
第一部分 文献综述第8-27页
 1、 导言第8-9页
 2、 脂肪细胞膜蛋白的研究历史第9-12页
 3、 特异性脂肪细胞膜蛋白的应用前景第12-14页
  3.1 改善胴体品质的研究第12-13页
  3.2 脂肪细胞分化的分子机理研究第13页
  3.3 在肥胖病治疗中的应用第13-14页
 4、 猪特异性脂肪细胞膜蛋白研究现状第14-19页
  4.1 前列腺素与脂肪细胞分化研究第15-18页
  4.2 PAMP分子生物学研究第18-19页
 5、 全长cDNA的获得—RACE及其它方法进展第19-27页
  5.1 RACE的原理第20-22页
  5.2 RACE的优点第22页
  5.3 RACE的改良方法第22-27页
第二部分 猪特异性脂肪细胞膜蛋白基因cDNA的克隆和测序第27-49页
 1、 导言第27页
 2、 实验材料第27-32页
  2.1 菌株利克隆载体第27-28页
  2.2 实验动物组织样与血样第28页
  2.3 酶与试剂盒第28页
  2.4 仪器和设备第28-29页
  2.5 试剂和溶液第29-32页
 3、 实验方法第32-43页
  3.1 总RNA的提取第32-33页
  3.2 mRNA的分离与纯化(磁珠法)第33-35页
  3.3 RACE操作流程第35-37页
  3.4 DNA凝胶纯化第37-38页
  3.5 凝胶纯化后的PCR产物的克隆第38-40页
  3.6 感受态细胞的制备(CaCl_2法)第40-41页
  3.7 质粒DNA的小规模抽提:第41页
  3.8 Eco R I酶切质粒鉴定第41-42页
  3.9 猪血DNA的提取第42-43页
  3.10 RNA变性电泳第43页
 4. 结果分析第43-49页
  4.1 总RNA、DNA提取及mRNA分离结果第43-45页
  4.2 RACE反应体系的建立第45页
  4.3 RACE产物的克隆和序列分析第45-48页
  4.4 内含子序列初探第48-49页
第三部分 结论与讨论第49-55页
 1. 脂肪组织总RNA制备第49页
 2. 5’端RACE技术体系的建立第49-51页
  2.1 RNA质量第50页
  2.2 PCR扩增第50-51页
 3. RACE产物的克隆第51-52页
  3.1 DNA片段的回收第51页
  3.2 CaCl_2法制备感受态细胞第51-52页
  3.3 连接第52页
  3.4 酶切鉴定第52页
 4. 测序结果序列分析第52-53页
 5. 内含子序列分析第53-54页
 6. 小结第54-55页
参考文献第55-60页
致谢第60页

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