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稻瘟菌激活蛋白基因pemG1在水稻和烟草中的表达及功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 文献综述第13-38页
   ·蛋白激发子第13-15页
     ·过敏蛋白Harpin第13页
     ·激发素Elicitin第13-14页
     ·激活蛋白Activator Protein第14页
     ·无毒蛋白第14页
     ·病毒激发子第14-15页
   ·转基因水稻第15-23页
     ·水稻转基因方法第15-18页
     ·水稻遗传转化中所用的外植体第18页
     ·水稻遗传转化中所用的培养基第18-19页
     ·水稻遗传转化中所用的目的基因第19-22页
     ·转基因水稻现存的问题和对策第22-23页
   ·转基因烟草第23-26页
     ·烟草转基因研究的意义第23页
     ·外源基因导入烟草的方法第23-24页
     ·烟草抗TMV 基因工程策略第24-26页
   ·转化子的筛选方法第26-28页
     ·用报告基因进行筛选第26-27页
     ·用选择标记基因进行筛选第27-28页
   ·转基因植物的检测方法第28-30页
     ·外源基因整合水平的检测第28页
     ·外源基因转录水平的检测第28-29页
     ·外源基因表达水平的检测第29页
     ·其它检测技术第29-30页
   ·转基因植物中外源基因的遗传稳定性第30-31页
   ·转基因植物的安全性第31-35页
     ·转基因植物对生物安全的影响第32-33页
     ·提高转基因植物安全性的策略第33-35页
   ·研究背景和意义第35-36页
   ·试验设计第36-38页
第二章 稻瘟菌激活蛋白基因pemG1 植物表达载体的构建第38-47页
   ·材料和方法第38-44页
     ·材料第38页
     ·主要试剂和药品第38-39页
     ·转化水稻的植物表达载体的构建第39-40页
     ·转化烟草的植物表达载体的构建第40-42页
     ·植物表达载体转化根癌农杆菌第42-44页
   ·结果与分析第44-45页
     ·植物表达载体的酶切和测序检测第44页
     ·根癌农杆菌中植物表达载体的检测第44-45页
   ·讨论第45-46页
   ·小结第46-47页
第三章 转pemG1 基因植株的获得第47-57页
   ·材料和方法第47-50页
     ·主要试剂和药品第47页
     ·转pemG1 基因日本晴的获得第47-48页
     ·转pemG1 基因普通烟和三生烟的获得第48-50页
   ·结果与分析第50-53页
     ·不同培养基在组织培养中的效果及转基因日本晴的获得第50-51页
     ·转基因普通烟和三生烟的获得第51-53页
   ·讨论第53-55页
     ·水稻组织培养培养基第53-54页
     ·籼稻的组织培养第54页
     ·筛选标记基因第54-55页
     ·关于水稻转基因的方法第55页
   ·小结第55-57页
第四章 转pemG1 基因植株的分子检测第57-75页
   ·材料和方法第57-65页
     ·主要试剂和药品第57页
     ·主要溶液的配制第57-58页
     ·主要仪器设备第58页
     ·转基因植株的PCR 检测第58-59页
     ·转基因植株的Southern blot 检测第59-61页
     ·转基因植株的RT-PCR 及Northern blot 鉴定第61-62页
     ·转基因植株的Western blot 鉴定第62-65页
     ·转基因后代的遗传分析及纯合阳性株系的筛选第65页
   ·结果与分析第65-72页
     ·转基因水稻的分子鉴定第65-70页
     ·转基因烟草的分子鉴定第70-72页
     ·转基因后代的遗传分析第72页
     ·纯合转基因株系的筛选第72页
   ·讨论第72-73页
     ·关于转基因植物的分子检测方法第72-73页
     ·关于纯合转基因株系的筛选第73页
   ·小结第73-75页
第五章 转pemG1 基因植株的抗病性和农艺性状第75-91页
   ·材料和方法第75-77页
     ·转基因水稻的稻瘟病抗性鉴定第75-76页
     ·转基因水稻的农艺性状观察第76页
     ·转基因三生烟的TMV 抗性鉴定和mRNA 检测第76-77页
   ·结果与分析第77-86页
     ·转基因水稻对稻瘟病的抗性第77-82页
     ·转基因水稻的生长性状第82-83页
     ·转基因三生烟对TMV 的抗性第83-85页
     ·pemG1 基因mRNA 积累水平与对TMV 抗性的相关性分析第85-86页
   ·讨论第86-90页
     ·稻瘟菌激活蛋白基因在水稻和烟草中的表达提高了转基因植株抗病性第86-87页
     ·稻瘟菌激活蛋白基因在水稻中的表达促进了水稻生长第87页
     ·转基因植物抗病性的稳定遗传第87页
     ·双拷贝转化子的后代用于抗病性试验的可行性第87-88页
     ·PemG1 蛋白诱导抗病性的机制第88-89页
     ·蛋白激发子应用前景分析第89-90页
   ·小结第90-91页
第六章 结论第91-92页
参考文献第92-106页
致谢第106-107页
作者简历第107页

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